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时间:2018-11-25
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1、胸腔积液的细胞学检查进展 积液是临床常见症状之一。正确鉴别积液的性质对疾病的诊治预后有重要意义。随着实验室诊断技术的提高,近年来胸腔积液的检测在细胞形态学、细胞染色体及免疫细胞化学等方面都有着较大的进展,为临床提供了更可靠的依据。本文对此作一简要综述。 一、沉渣涂片瑞吉氏染色 瑞吉氏染色能清楚地显示细胞浆成份和细胞核染色质结构,易于良恶性细胞的判别。1.恶性细胞 见到典型恶性瘤细胞即可确诊为恶性胸液。王东钢〔1〕报道该法瘤细胞检出率38.8%。若用脑脊液细胞玻片离心沉淀器收集细胞,由于细胞收集高达80.4%,故敏感性大大提高,阳性
2、预测值达93.5%。李亚红〔2〕报道积液送检量增至250ml,取新鲜下层积液离心涂片染色,瘤细胞首次检出率为83.3%,三次以上送检检出率达100%。我们通过对胸液标本(5~10ml)两次离心浓集细胞涂片瑞吉氏染色,先低倍镜扫描全片,遇有可疑细胞时再转油镜鉴定细胞性质,恶性细胞检出率达78%,特异性为94.3%〔3〕。2.血细胞粘附肿瘤细胞花环〔3〕 在含恶性肿瘤细胞的胸腹水或心包积液的涂片中,将≥3个白细胞(淋巴、粒细胞、巨噬细胞)或红细胞粘附于瘤细胞胞浆边缘周围,形成花环样,称之为血细胞粘附肿瘤细胞花环。我室在查见恶性细胞的179
3、例胸腹水涂片中,79例查见血细胞粘附肿瘤细胞花环,每份涂片约5~6cm2,平均花环数9.6±5.7个。追踪随访,有16例在首次查见血细胞粘附肿瘤细胞花环后的15~51天内病故。由此可见,血细胞粘附肿瘤细胞花环的出现可能提示部分肿瘤的恶性发展〔4〕。3.免疫岛 巨噬细胞与周围已转化和未转化的淋巴细胞的堆积团称为免疫岛。免疫岛可能是由于肿瘤抗原及病原微生物刺激机体免疫反应所致。在120例患者的胸腹液涂片中发现52例(43.3%)患者的胸腹液中存在免疫岛。结核和肿瘤患者,占77%。14例结核性胸腹液中11例查见免疫岛,每份涂片面积(2.0c
4、m×2.5cm),平均免疫岛数59.6±12.8个;60例恶性胸腹液中29例查见免疫岛,每份涂片面积同上,平均免疫岛数39.2±18.9个〔3、5〕。4.其他 胸腹液涂片瑞吉氏染色镜检还可见到分叶核细胞包裹杆菌现象〔3〕,提示细菌或结核杆菌感染;化脓性炎症所致胸水的中性粒细胞明显升高,并可见分叶核细胞噬菌现象;在并发真菌感染的胸水涂片中可见噬真菌细胞或分叶核细胞包裹真菌。若同时做抗酸染色、革兰氏染色及培养可进一步鉴定病原。 二、沉渣涂片细胞化学染色 王应〔6〕等对胸水中的瘤细胞进行多种化学染色,结果显示瘤细胞的过氧化物酶染色(PO
5、X)、苏丹黑B染色(SB)均呈阴性;而糖原染色(PAS)、碱性磷酸酶染色(ALP)、特异性脂酶染色(ASD-CE)、非特异性脂酶染色(α-NAE)、酸性磷酸酶染色(ACP)等呈不同程度的阳性反应。 三、荧光染色 用吖啶橙荧光染色,由于肿瘤细胞增生旺盛,细胞浆及核仁内有大量的RNA,染色后呈桔红或火焰色荧光;细胞核中有大量的DNA则呈黄绿色荧光。该法检测恶性胸水阳性率达78.3%,假阳性率14.3%〔7〕。 四、核仁组成区嗜银蛋白染色(AgNOR) 陈丽珠〔8〕等用Croker染色方法对150例胸腹水中的良恶性细胞进行分析,结果表明
6、:良性组中的淋巴细胞、间皮细胞及非典型增生间皮细胞的AgNOR核颗粒均数都小于1.98个/细胞核,且87%的颗粒为规则小圆形,三种细胞间也无明显差异(P>0.05)。恶性组中瘤细胞AgNOR颗粒都超过4.98个/细胞核,82%以上的颗粒为不规则型及弥散型分布,与良性组比较有显著差异(P<0.05)小莉〔9〕等以类似方法分析60例恶性胸腹水细胞和70例良性胸腹水细胞,前者细胞AgNOR颗粒数平均为每核4.35±2.18个,后者平均为1.80±0.79个,若以良性组AgNOR颗粒均值加一个标准差(即2.59)为判断良恶性的阈值,对恶性胸腹
7、水诊断的敏感性为75%,特异性为86.5%。我室浆膜腔积液涂片的AgNOR颗粒分布形态分为四种:核仁型、核仁内型、聚集型及弥散型。AgNOR颗粒数,恶性细胞16.7±3.8个/核、异型间皮细胞6.9±3.5个/核、巨噬细胞2.1±0.8个/核,有明显差异,AgNOR颗粒数高于上述文献。我们认为胸水AgNOR能提供淋巴细胞与小细胞型瘤细胞,以及非典型增生细胞与腺癌细胞的鉴别依据。该法也可在其他脱落细胞的检查中推广应用。 五、免疫细胞化学染色 可采用ABC法〔10〕,即亲和素-生物素复合物法(Avidin-Biotin-plex,ABC
8、)。根据细胞的显色反应判断细胞表面或浆内是否有相应的瘤细胞抗原,如用癌胚抗原(CEA)抗体检测腺癌细胞的CEA表达,用甲胎蛋白(AFP)抗体检测肝癌细胞的AFP表达等。本法特异性高,可确定癌瘤细胞的来源及类型,但影响因素
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