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时间:2018-11-20
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1、益气活血解毒法对溃疡性结肠炎模型大鼠血浆及结肠组织P选择素的影响作者:安贺军 王新月 于玫 沈静许丽艳 林芳冰【摘要】【目的】 观察益气活血解毒法对溃疡性结肠炎(UC)模型大鼠血浆及结肠组织P选择素表达的影响。【方法】选用SD大鼠,随机分为4组,即正常组、模型组、中药组(灌胃20g·kg-1·d-1剂量的溃结复发方)、西药组(灌胃0266g·kg-1·d-1剂量的畅美混悬液);分别于给药后10、30d和停药后10d取材,采用酶联免疫吸附法检测各组血浆P选择素含量,免疫组化法检测结肠组织P选择素的表达。【结果
2、】模型组各时间段血浆P选择素含量显著升高(均P<005或P<001),中药组各时间段血浆P选择素含量显著低于模型组(均P<005或P<001),西药组治疗10d及治疗30d时血浆P选择素含量显著低于模型组(P<005或P<001);模型组各时间段结肠组织P选择素表达显著高于正常组(均P<001),中药组治疗30d及停药后10d结肠组织P选择素表达显著降低(均P<001),且停药后10d作用优于西药组(P<005);西药组治疗10d及治疗
3、30d结肠组织P选择素表达显著降低(均P<001),且治疗10d时作用优于中药组(P<001)。【结论】益气活血解毒法抗UC复发的作用可能与其能有效降低模型大鼠的血浆及结肠组织P选择素水平,阻抑血小板活化有关。 【关键词】益气活血解毒法; 结肠炎/中药疗法; P选择素/血液; 结肠/病理学; 疾病模型,动物; 大鼠溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)是一种以慢性炎症和溃疡形成为主要病理特征的消化道疾病。由于其患病率逐年增加、高复发率、与结肠直肠癌发生关系密切而成为目前研究热点。本研究观察了益气活
4、血解毒法组成的溃结复发方对三硝基苯磺酸(TNBS)诱发的UC模型大鼠血浆及结肠组织P选择素表达的影响,探讨其抗溃疡性结肠炎复发的作用机制。现将结果报道如下。 1 材料与方法 11 实验动物 清洁级健康雄性SD大鼠,体质量160~200g,由中国人民解放军军事医学科学院实验动物中心提供,动物合格证号:SCXK(京)20060006。 12 主要试剂与仪器 2、4、6三硝基苯磺酸(TNBS)为Sigma公司产品,批号:074K007;水合氯醛购自恒业中远化工有限公司;酶联免疫吸附(ELISA)法试剂盒由美国RB公司进口分装,购自北京百
5、事创新科技有限公司;免疫组化法检测试剂盒购自北京百事创新科技有限公司;LDZ52型离心机由北京医用离心机厂生产;LabsystemsDragonK3全自动多功能酶标仪;Shandon全自动石蜡包埋机;Shandon全自动石蜡切片机;OlympusVanox显微镜;Nikon显微照相系统;ImageproPlus41图像分析系统。 13 药物 溃结复发方主要药物组成有炒五灵脂10g、生蒲黄10g、当归10g、赤白芍各10g、焦槟榔10g、煨木香10g、黄连10g、黄柏10g、生黄芪30g、连翘20g、炒白术10g,
6、均购自北京中医药大学东直门医院,由北京中医药大学东直门医院制剂室煎制,灌胃剂量为体质量60kg成人药量的8倍;奥沙拉秦钠胶囊剂(畅美)由天津力生制药有限公司生产,灌胃剂量为体质量60kg成人药量的8倍。 14 动物模型复制[1-2] 将大鼠正常饲养1周后,禁食24h(不禁水),称体质量,100mg/L水合氯醛(38mL/kg)腹腔麻醉,将一直径2mm、长约12cm的橡胶管由大鼠肛门轻缓插入,约深8~10cm,然后以085mLTNBS/乙醇液(120mg/kgTNBS+体积分数50%乙醇025mL),约5s
7、灌注完毕;将造模鼠倒置8min后(尽量减少造模试剂流出)放回笼内。 15 动物分组及给药 将120只大鼠随机分为4组,其中模型组、西药组、中药组每组各30只,均予造模;正常组30只,不予造模,但与其他3组同步禁食、麻醉,同步饲养观察。于造模后第2天起正常组、模型组以蒸馏水灌胃,每次1mL/只;西药组以畅美混悬液按0266g·kg-1·d-1剂量灌胃给药;中药组以溃结复发方按20g·kg-1·d-1剂量灌胃给药,均每天1次,共40d。 16 取材 分别于给药后10、30d和停药后10d,各组随机
8、取10只大鼠,以100mg/L水合氯醛(38mL/kg)腹腔麻醉,腹主动脉取血,20
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