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时间:2018-11-19
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1、野菊花总黄酮提取工艺的响应面设计优化论文【关键词】响应面;,,野菊花;,,黄酮摘要:目的优化野菊花总黄酮提取工艺。方法在分析单因素的基础上,以总黄酮得率为响应值,采用响应面实验设计方法(RSD)对其提取工艺进行研究。结果最佳工艺参数为乙醇浓度56.6%,提取温度80℃,液固比为19.6,提取时间为3.2h,提取1次,该工艺条件可使总黄酮得率达4.64%。结论该工艺条件可为工业生产提供参考数据。响应面试验设计法可在连续范围内进行分析.freelalExtractingConditionsforChrysanthemumIndicumL.b
2、yResponseSurfaceDesign(RSD)Abstract:ObjectiveToexaminetheprocedureforthechemicalextractionoftheflavonoidsinChrysanthemumindicumL.MethodsTheprocedurefortheextractionedumparameters,ent.ResultsItpleixedaroundat80℃for3.2h.Therecoveryyieldofflavonoidsgotto4.64%onceextraction.
3、ConclusionTheprocedureoftheextractioncanbehelpfultothefactoryscaleproduction.KeyumindicumL.;Flavonoids野菊花[1]为菊科植物野菊ChrysanthemumindicumL.北野菊C.borealeMak.或岩香菊C.javandulaefolium(Fish)Mak.的头状花序。秋冬二季花初开放时采摘,晒干或蒸后晒干入药,性凉,味苦、辛,归肺肝经,具有疏风清热、消肿解毒的功效,是一种临床历史长达上千年的常用中药。应用现代中药化学的分析手
4、段发现在野菊花中蕴含着丰富的生物类黄酮化合物,体现出野菊花在降血压,改善心血管循环,清除超氧阴离子自由基抗衰老,防护紫外线等方面的功效。为了科学、充分地利用野菊花的黄酮资源,采用响应面试验设计方法(RSD)对影响总黄酮得率的关键因素进行条件优化,给大批量生产提供参考数据。响应面试验设计方法RSD[2]是利用合理的试验设计并通过实验得到的一定数据,采用多元二次回归方程来拟合因素与响应值之间的函数关系,通过对回归方程的分析来寻求最优工艺参数,解决多变量问题的一种统计方法。随着计算机的发展,它已成为精度高、应用广并具有实用价值的优化技术。1仪
5、器与试剂1.1仪器756PC型可见-紫外分光光度仪:上海光谱仪器有限公司,FA2004N电子天平:上海精密科学仪器有限公司。1.2试剂与样品芦丁对照品,购自中国(天津)药品生物制品检定所;野菊花中药饮片购自天津君福大药房(产地为河北,经中医医师张淑英确认为中药野菊花正品)其它试剂均为分析纯。2方法2.1定量原理[3]根据《中国药典》(2000年版)及当前普遍采用的“NaNO2AlNO3NaOH”体系。2.2标准曲线的制定2.2.1对照品试液的配制称量105℃下烘干至恒重的芦丁对照品0.0620g,用适量95%乙醇充分溶解,放冷,转移至1
6、00ml容量瓶中,用95%乙醇定容至刻度,摇匀做为对照品储备试液。此试液中芦丁浓度为0.62g/L。2.2.2标准曲线的绘制精密量取对照品试液0.0,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0ml,分别置于25ml量瓶中,各加95%乙醇至6ml,加5%亚硝酸钠溶液1ml,使混匀,放置6min。加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6min。加5%氢氧化钠溶液5ml,用95%乙醇定容至刻度,摇匀,静置。15min后测试500nm下的吸光度值,以不含芦丁的空白溶液为参比。将所得吸光度值与浓度的关系列于表1。表1芦丁标准液浓度与吸光度值(略)应用最
7、小二乘法将表1中的芦丁标准液浓度与吸光度值做一元线性回归分析,由MicrosoftExcel获得回归曲线。结果见图1。图1芦丁吸光度与浓度标准曲线(略)3影响黄酮得率的单因素考虑3.1乙醇浓度的确定每次称取15g野菊花粗粉,在80℃,料液比1∶20,浸提2h,浸提一次的条件下,依次以质量分数为30%~100%的乙醇进行浸提,冰水浴快速冷却后抽滤。取10ml续滤液用提取时的乙醇溶液定容至50ml。量取3ml显色后定容至25ml,在500nm下测得的吸光度与乙醇浓度的关系见图2。从图2可以看出,在乙醇浓度为50%~70%内对应吸光度值有个小
8、平台。这种现象反映出野菊花中所含的生物黄酮类化合物具有黄酮苷元和糖苷两种形式,随着乙醇浓度的降低,前者的溶出量相对减少,后者则相对增加,中等浓度的乙醇溶液对两者的溶出率较适当。因此选择乙醇浓度范围50%~7
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