冻干血小板再水化后聚集论文

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1、冻干血小板再水化后聚集论文.freell、1.6mg/ml、20μmol/L、2μg/ml时，新鲜血小板最大聚集率达100%左右，冻干再水化血小板最大聚集率分别达（70.17±7.36）%、（15.3±2.81）%、（68.67±6.86）%、（64.67±11.6）%。胞内外海藻糖组、胞外海藻糖组、空白对照组冻干再水化血小板最大聚集率分别达(66.0±4.69)%、(25.3±2.42)%、(11.5±1.87)%(P＜0.01)。结论：凝血酶、瑞斯托霉素、ADP、胶原浓度分别为1U/ml、1.6mg/ml

2、、20μmol/L、2μg/ml可作为血小板聚集实验的合适浓度，胞内外海藻糖使冻干再水化血小板最大聚集率显著提高。【关键词】再水化;冻干血小板；海藻糖；血小板AggregationafterRehydrationofLyophilizedPlateletsAbstractThisstudyedtoinvestigatetheaggregationofrehydrated-lyophilizedplatelets.Theaggregationrateoffreshandrehydrated-lyophilize

3、dplateletseasuredbyusingthrombin，ristocetin，ADPandcollagenasinductorsandAPACT2aggregameter;theeffectsofintra-andextra-cellulartrehaloseonmaximumaggregationrateofrehydrated-lyophilizedplateletsbin，ristocetin，ADPandcollagenl，1.6mg/ml，20μmol/Land2μg/ml.Themaxi

4、mumaggregationratesofrehydrated-lyophilizedplateletsinintro-andextra-cellalartrehalose，extracellulartrehaloseandblankcontrolgroupseanbin(1U/ml)，ristocetin(1.6mg/ml)，ADP(20μmol/L)andcollagen(2μg/ml)areoptimalforplateletsaggregationtests，theinternalandextrace

5、llulartrehalosesignificantlyenhancetheaggregationofrehydrated-lyophilizedplatelets.Keymol/LNaCl、9.4mmol/LNa2HPO4、0.6mmol/LKH2PO4、pH6.8），蒸馏水，4种血小板聚集反应诱导剂分别为凝血酶、胶原、ADP、瑞斯托霉素。主要仪器ALPHA1-2冻干机（德国产品），aximumaggregatianrateofrehydrated-lyophilisatedplateletsindiffe

6、renttreatedgroups（略）讨论前期血小板负载海藻糖研究结果表明，海藻糖可通过一种简单方法-液相内吞机理，在37℃条件下，经过4小时负载，被有效载入到血小板胞质内部，且在细胞质中均匀分布［6-8］，这为血小板冻干再水化后聚集功能的实验研究提供了理论依据。从4种诱导剂作用下再水化冻干血小板聚集反应的剂量效应关系可看出，在正常生理范围内随着诱导剂浓度增加，再水化冻干血小板最大聚集率提高，但当诱导剂达到一定浓度时，血小板最大聚集率可维持在一恒定水平。本研究筛选的4种诱导剂的合适浓度分别为：凝血酶1U/m

7、l，瑞斯托霉素1.6mg/ml，ADP20μmol/L，胶原2μg/ml。这些适宜浓度可作为再水化冻干血小板聚集实验的基本条件。有效负载海藻糖至细胞内是保证再水化冻干血小板功能恢复的关键，细胞外的海藻糖只能起到稳定细胞膜，而非细胞内物质的作用，只有胞内外海藻糖同时存在，且达到一定浓度，才能在细胞整个冻干再水化过程中，同时起到保护细胞内脂类和蛋白等物质和细胞膜的作用。血小板聚集实验是反应血小板功能的主要实验之一，血小板在诱导剂作用下，易发生激活、颗粒释放、及聚集反应变化。冻干保护剂-海藻糖在整个血小板冻干前的预

8、处理、冻干、及冻干后再水化过程中，可有效抑制血小板的体外激活损伤，保护血小板聚集功能。海藻糖不仅可作为血小板的冻干保护剂，亦可作为其它组织、器官、造血干细胞的冰冻、冻干保护剂，它的巨大保护作用机理之一是生物大分子物质中的水分子替代学说，因而避免冻干损伤。由于它的较高玻璃化转化温度，因此在室温条件下形成稳定的玻璃化状态，保护干燥态的细胞。本研究表明，在ADP作用下胞内外负载海藻糖后血小板的最大聚集率明