赤芍与白芍药材高效毛细管电泳指纹图谱方法学研究

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1、赤芍与白芍药材高效毛细管电泳指纹图谱方法学研究王磊磊，陈军辉，王虹，殷月芬，王小如，杨东方【摘要】目的确定赤芍和白芍的高效毛细管电泳分析方法，建立赤芍和白芍的高效毛细管电泳法（HPCE）指纹图谱。方法HPCE工作条件：采用未涂层熔融石英毛细管(内径75μm,有效长度50cm)，分离电压为25kV，柱温25℃，二极管阵列检测器(DAD)检测波长为220nm，缓冲液为30mmol/L硼砂(pH=9.0)溶液。按此条件对来自不同产地的7种赤芍样品和8种白芍样品进行了分析。结果建立了赤芍和白芍HPCE指纹图谱，采用中药指纹图谱

2、相似度计算软件，以系统生成的对照指纹图谱为对照模板对不同样品的图谱进行相似度计算。结论该方法简捷、有效，可以用于赤芍和白芍药材的质量控制。【关键词】赤芍；白芍；高效毛细管电泳法；指纹图谱Abstract：ObjectiveTosetupamodernHighPerformanceCapillaryElectrophoresisanalysismethodforseparatinganddetectingRadixpaeoniaeAlbaandRadixpaeoniaeRubraandestablishtheirfing

3、erprints.MethodsSevensamplesofRadixpaeoniaeAlbaandeightsamplesofRadixpaeoniaeRubra×75μmi.d.),30mmol/Lborate(pH=9.0)asbuffer,therunvoltageis+25kV,detection,andcolumntemperatureof25℃.ResultsThefingerprintsedandparedbythesoftilarityevaluationsystemforchromatographi

4、cfingerprint.ConclusionTheresultsshoethodofHPCEfingerprintisreliableandaccuratetocontrolthequalityoftedicines.KeyanceCapillaryElectrophoresis;Fingerprint赤芍为毛茛科芍药PaeonialactifloraPall.或川赤芍PaeoniaveitchiiLynch.直接使用的干燥根，其味苦，微寒，归肝经，具有清热凉血、散瘀止痛之功能。白芍为毛莨科芍药Paeonialact

5、tifloraPal1.水煮去皮后使用的干燥根，其味苦、酸，微寒，归肝、脾经，具有平肝止痛、养血调经、敛阴止汗之功能〔1〕。两种药材中均含有芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷等单萜苷类和苯甲酸、没食子酸等酸类成分〔2，3〕，其中总苷类物质为药材的主要活性成分〔4〕，因此2005版《中国药典》规定芍药苷的含量作为赤芍和白芍的质控指标。但是赤芍和白芍的疗效和在临床使用上有很大不同，仅使用单一成分作为指标进行质量控制，不能全面反映药材的有效成分，难以真正全面地控制药材的内在质量。中药指纹图谱是指中药材经适当处理后，采用一定的分

6、析手段，得到的能够标示该中药材及其制剂的各组分群体特性的共有峰的图谱〔5〕。色谱指纹图谱是通过把复杂的化学成分进行分离，形成高低不同的峰，组成一张色谱图，整个色谱图表达了该样品所含化学成分的多少和量的大小，不仅可用于已知成分的分析，还可以用于未知成分的分析〔6〕。因此指纹图谱目前被国际上公认为是植物药和中草药质量控制最有效的工具之一〔7〕，如《美国草药典》(AHP)为五味子、甘草等热点植物药确定了比较稳定可靠的TLC、HPLC分析结果和指纹图谱，为该类药材的生产和应用提供依据〔8〕。近年来，将色谱指纹图谱的方法用于赤芍

7、和白芍研究的相关文献也不断出现，但这些文献多利用高效液相色谱法（HPLC）进行研究〔9～12〕，如王巧等〔10〕利用HPLC分析了三十多种赤芍和白芍药材的醇提物，建立了白芍与赤芍的HPLC指纹图谱分析方法。但用HPLC进行中药成分分析，运行成本较高、分析时间长，而且常遇到一些问题，例如色谱柱易受污染，并且对于含极性成分较多的中药，其“指纹”的特征性不强。相比而言，高效毛细管电泳法（HPCE）分析中药则有独特的优势，具有柱效高、快速、进样体积小，水溶性样品的“指纹”特征性强，前处理简单，而且分析运行成本低〔13，14〕的

8、优点。关于赤芍或白芍HPCE指纹图谱的研究未见报道，所以本文对赤芍和白芍药材的HPCE指纹图谱进行了探索性研究，以期为有效控制赤芍和白芍药材质量提供新的方法。1仪器与试剂G1062A型HPCE仪(美国Agilent公司)，配有二极管阵列检测器(DAD)；未涂层熔融石英毛细管(美国Agilent公司)，内径75μm，有效长度50cm