分化抑制因子ndpk

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1、分化抑制因子NDPK【关键词】白血病【摘要】目的研究分化抑制因子―――核苷二磷酸激酶A（NDPK-A）在血清中的含量及其与血液病的相关性，探讨血清NDPK-A含量检测对于血液病诊断和疗效判断的意义。方法应用重组NDPK-A标准品及相应抗体建立双抗体夹心ELISA法测定NDPK-A含量，应用此方法测定正常人和血液病患者血清NDPK-A含量。结果30例正常人血清NDPK-A含量为（4.22±0.45）μg/L，26例白血病患者血清NDPK-A含量为（21.07±12.03）μg/L，9例淋巴瘤患者血清NDPK-A

2、含量为（32.31±8.75）μg/L，8例骨髓瘤患者血清NDPK-A含量为（14.80±5.87）μg/L。白血病患者治疗前后血清NDPK-A含量差异显著，14例治疗前患者NDPK-A含量为（31.25±10.35）μg/L，治疗后患者NDPK-A含量为（12.17±4.16）μg/L。结论建立的双夹心ELISA法可以灵敏、准确地测定血清NDPK-A含量;NDPK-A含量检测可发展为白血病的早期诊断和疗效判断指标。关键词核苷二磷酸激酶A白血病双抗体夹心酶联免疫吸附测定法.【Abstract】Objectiv

3、eToinvestigatetherelationshipbetNDPK-Alevelandthedevelopmentofleukemia，andthesignificanceofNDPK-Adeterminationinleukemiadiagnosis.MethodsAsandanNDPK-Aanditsantibodies，ployedtodetectserumNDPK-Aconcentrationinhealthypeopleandpatientsatologicalmalignancies.Res

4、ultsSerumNDPK-Aconcentrationong30healthyvolunteers.Itong26leukemiapatients，and32.31±8.75μg/Lamong9lymphomapatients，and14.80±5.96μg/Lamong8myelomapatients.Furthermore，thereiapatients.SerumNDPK-Aconcentrationong14untreatedpatients，and12.17±4.16μg/Lamong12trea

5、tedpatients.ConclusionTheELISAusedhereple，sensitiveandaccuratefordeterminationofserumNDPK-Alevel，ightbedevelopedintoanearlydiagnosisandprognosticfactorofleukemia.KeyiaELISA核苷二磷酸激酶A（NDPK-A）是抑癌基因nm23-H1的编码产物，除了能够催化NDP和NTP之间的磷酸基转移反应外，还可以调节细胞增殖、分化、发育和凋亡［1，2］。多项

6、研究表明，NDPK-A的表达量与多种肿瘤的转移潜能呈负相关，这一关系在肺癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌等恶性肿瘤患者中尤为明显［3，4］。另外，NDPK-A可以抑制血细胞分化，最近有研究报道，血清NDPK-A含量与白血病的预后相关，高NDPK-A含量的白血病患者预后差［5，6］。为了探讨血清NDPK-A含量检测对于白血病早期诊断和疗效判断的意义，笔者建立了血清NDPK-A含量双抗体夹心ELISA检测方法，并检测了部分血样，现报告如下。1材料与方法1.1主要仪器酶标仪（芬兰Labsystem公司K-3）1.2

7、主要试剂鼠抗人NDPK-A单克隆抗体购自日本SEikagakuKogyo公司，兔抗NDPK-A多克隆抗体购自SantaCruz公司，HRP标记的抗兔IgG抗体购自华美生物工程公司;重组人NDPK-A标准品由日本Toho大学医学院YoshioHonma教授惠赠;正常人混合血清、白血病患者血清参考品由本室制备。制备试剂盒所用小牛血清、Tin，洗板后加入酶标抗抗体，37℃孵育1h，加入底物TMB，37℃显色15min，2mol/LH2SO4终止反应，酶标仪测定A450/630，同时制备标准曲线，计算各血样中NDPK

8、-A含量。2结果2.1标准曲线rhNDPK-A标准品以生理盐水倍比稀释，浓度自1.5625～3200mg/L，共12份，平行条件测定各份标准品的光密度。取均值进行曲线拟合，结果如图1中对数刻度标准曲线所示。曲线拟合结果表明，在3.125～3200mg/L范围内，NDPK-A含量与光密度有极好的相关性（y=a+bx+cx2，s=0.0154，R2=0.997）。2.2方法的稳定性rhNDPK-A标准品