小鼠的苯急性吸入毒性试验的分析

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1、小鼠的苯急性吸入毒性试验的分析摘要：［目的］掌握毒理学动物实验的动物分组方法；了解急性毒性试验剂量组距的确定方法及各染毒剂量的计算；掌握寇式法计算急性毒性参数LD50的方法；学会对化学物进行急性毒性评价及分级。［方法］随机选取昆明种的，健康的，初成年的，性成熟的，体重介于18至25g的小鼠雌雄各半共70只，按照随机区组法将小鼠分成6个实验组，1个对照组，每组雌雄各半共十只，然后按照公式确定每个组的染毒剂量，对照组不染毒，观察120min,记录不同染毒剂量下各时段小鼠的中毒反应，最后统一分析。［结果］苯具有急性毒性，中毒表现：兴奋症状、抑制症状（闭眼

2、、侧卧），呼吸急促转袞弱，除低剂量组外每组都应该有小鼠死亡运用。改良寇氏法公式得logLC50=l.848,故LC50=70.47X10mg/l;s=0.0193（LD50的标准误）；LD5095%CI（可信区间）=（70.45X103,70.50X10'）mg/Lo［结论］:LC50为70.47X10mg/l,属于低毒毒物关键词：苯；急性毒性；LD50；随机分组；改良寇式法前言：苯在常温下为一种高度易燃，有香味的无色的液体，为一种有机化合物，也是组成结构最简.单的芳香烃。苯有高的毒性，也是一种致癌物质。它难溶于水，易溶于有机溶剂，本身也可作为有机

3、溶剂。苯也是石油化工的基本原料，苯的产量和生产的技术水平是一个国家石油化工发展水平的标志之一苯具有的环系叫苯环，是最简单的芳环。苯对人体有许多危害，比如：1.造血的损害作用；2.致癌、致畸作用；3.苯致DNA、RNA损伤的基因毒性；4.职业暴露人群遗传损伤效应。笨对人体中毒可分为急性和慢性中毒。本研究旨在了解其急性毒性试验剂量的相关计算以及操作。（一）材料与方法：1.昆明种小鼠：雌雄各半，70只；2.动物天平：2只；3.染号液：饱和结晶紫（紫色）、饱和苦味酸（黄色）乙醇溶液；4.静式染毒罐：60L7个；5.随机数字表试验方法：1.试验动物选择与处理

4、：选择健康、初成年，性成熟的昆明种小白鼠70只（沈阳医学院实验中心提供），17〜25g,雌雄各半，分别按性别称重，编号。预实验得出LD0与LD100,LD50的计算方法符合改进寇氏公式的条件，随机分组，分6个剂量组和-个NS组，每组10只。①编号方法：采用不同颜色标记法，即黄色代表个位，蓝色代表十位，以此类推，只是让出11、22、33号…….，避免混淆。②分组方法：随机区组法，将两性别分别按体重从小到大排序，按每组动物数划分为n个区组（如每组10只动物，就划分为10个区组），每区组动物数与组数相等；然后每只动物选取一个随机数字，用组数n去除随机数字

5、得余数，按余数将动物分到各组：0->A组；1->B组；2—C组；3—D组；4->E组；5—F组；6—G组以此类推。按上述原则线条不重复数字分组，遇重复数字分到其余各组。2.确定染毒剂量：按照于是结果求出对数组距1=（1叩1^100-1叩11）0）/（组数—1）求出各组染毒剂量及加样量。a=CL/d氺1000*x其巾a为加苯量（ml）;C为染毒剂量（mg/L）；L染毒罐容积（L）;X为苯的纯度；d力苯的质量体积比。组别对数剂量染毒剂量（ml）加苯量（ml）A1.5333.942.28B1.63643.252.90C1.74255.213.71D1.8

6、4870.474.73E1.95489.956.04FG2.060114.827.713.染毒观察:按各组设计剂W:加入苯,塞紧胶塞。幵动风扇，观察2小时。4.受试物：国药集团化学试剂有限公司生产的分析纯液态苯，比重P为0.89g/ml,纯度〉99.5%,5.观察指标：观察小鼠最早死亡时间和数量及染毒期间小鼠的巾毒症状，用改良寇氏法计算出LD50,进行毒性分级。实验结果：染毒后小鼠出现不同程度屮毒症状大致表现为：兴奋症状：疫挛，乱跑、乱窜、反射亢进、管状尾；抑制症状：软弱无力、运动迟缓、闭眼、侧卧；呼吸由缓慢变为深浅；高剂量组出现症状较早且明显，随

7、后出现抽搐，更严重者死亡，剂量越低出现的死亡数越少，低剂量组一般不出现死亡。兴奇疲状抑制症状呼吸症状死亡时间乱跑、乱蹿软弱无力缓而深最早死亡时间搔抓、尖叫运动迟缓频而浅只数等反射亢进步态蹒跚张口呼吸管状尾闭眼、蜷缩疫挛侧卧、反射消失（二）各组动物死亡情况（实验记录）表1静式吸入染毒2h小鼠死亡情况组别剂量(mg/1)动物数死亡数死亡率（P）存活率（q）PQA33.9410001.00B43.2510001.00C55.2110001.00D70.471060.60.40.24R89.951090.90.10.09F114.821010100G（三）

8、LC50的计算:因改良寇氏法实验设计要求，因A和B组动物死亡数相故A组不参加计算。按改良寇氏法公式计算：m=Xk—i（Ep