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时间:2018-11-10
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1、冻干血小板再水化后聚集作者:刘景汉,卢发强*,庄远,车辑,陈麟凤【摘要】 本研究旨在观察冻干血小板再水化后聚集反应性变化。以4种不同浓度的凝血酶、瑞斯托霉素、ADP、胶原作诱导剂,使用APACT2型血小板聚集仪,检测冻干再水化和新鲜血小板的最大聚集率,以ADP为诱导剂,检测胞内外海藻糖对再水化冻干血小板最大聚集率的影响。结果表明:当凝血酶、瑞斯托霉素、ADP、胶原浓度分别为1U/ml、1.6mg/ml、20μmol/L、2μg/ml时,新鲜血小板最大聚集率达100%左右,冻干再水化血小板最大聚集率分别达(70.17±7.36)%、(15.3
2、±2.81)%、(68.67±6.86)%、(64.67±11.6)%。胞内外海藻糖组、胞外海藻糖组、空白对照组冻干再水化血小板最大聚集率分别达(66.0±4.69)%、(25.3±2.42)%、(11.5±1.87)%(P<0.01)。结论:凝血酶、瑞斯托霉素、ADP、胶原浓度分别为1U/ml、1.6mg/ml、20μmol/L、2μg/ml可作为血小板聚集实验的合适浓度,胞内外海藻糖使冻干再水化血小板最大聚集率显著提高。【关键词】再水化;冻干血小板;海藻糖;血小板 AggregationafterRehydrationofLyophil
3、izedPlatelets AbstractThisstudyedtoinvestigatetheaggregationofrehydrated-lyophilizedplatelets.Theaggregationrateoffreshandrehydrated-lyophilizedplateletseasuredbyusingthrombin,ristocetin,ADPandcollagenasinductorsandAPACT2aggregameter;theeffectsofintra-andextra-cellulartreh
4、aloseonmaximumaggregationrateofrehydrated-lyophilizedplateletsbin,ristocetin,ADPandcollagenl,1.6mg/ml,20μmol/Land2μg/ml.Themaximumaggregationratesofrehydrated-lyophilizedplateletsinintro-andextra-cellalartrehalose,extracellulartrehaloseandblankcontrolgroupseanbin(1U/ml),ris
5、tocetin(1.6mg/ml),ADP(20μmol/L)andcollagen(2μg/ml)areoptimalforplateletsaggregationtests,theinternalandextracellulartrehalosesignificantlyenhancetheaggregationofrehydrated-lyophilizedplatelets. Keymol/LNaCl、9.4mmol/LNa2HPO4、0.6mmol/LKH2PO4、pH6.8),蒸馏水,4种血小板聚集反应诱导剂分别为凝血酶、胶原、
6、ADP、瑞斯托霉素。 主要仪器 ALPHA1-2冻干机(德国产品),mol/L海藻糖组和1%人血清白蛋白;胞外海藻糖组:冻干前未负载海藻糖,在冻干液中添加30mmol/L海藻糖和1%人血清白蛋白;胞内外海藻糖组:冻干前负载海藻糖,冻干液添加30mmol/L海藻糖和1%人血清白蛋白。 统计学处理 血小板冻干再水化后参数用(X±SD)表示,两均数间比较采用配对t检验,用CHISS统计软件录入数据,进行统计学处理。 结果 凝血酶浓度对新鲜和再水化冻干血小板最大聚集率的影响 结果分别见表1和图1。在凝血酶生理浓度范围内,总体趋势是:随凝
7、血酶浓度增加,血小板最大聚集率升高,当凝血酶浓度为1.0U/ml时,新鲜血小板最大聚集率达101±3.347%,复水血小板最大聚集率为70.17±7.36%。Table1.Effectofthrombinconcentrationonaggregationoffreshandrehydrated-lyophilizedplatelets(略) 瑞斯托霉素浓度对新鲜和再水化冻干血小板最大聚集率的影响 随着瑞斯托霉素浓度增加,血小板最大聚集率升高,当瑞斯托霉素浓度为1.6mg/ml时,新鲜血小板最大聚集率达99.8±1.17%,复水后的血小板
8、最大聚集率为15.3±2.81%(表2和图2)。Table2.Effectofristocetinconcentrationonaggregationoffresh
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