髓内循环破坏致骨内高压兔模型的建立及减压的影响

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1、髓内循环破坏致骨内高压兔模型的建立及减压的影响【关键词】髓内循环；骨内高压；钻孔；减压；软骨,关节；代谢　　【Abstract】AIM:Todevelopareliablemethodofanimalmodelingofhighintraosseouspressure(IP)resultedfromthedamageofintraosseouscirculationsystemandobservetheeffectofdrillingdepressiontreatments.METHODS:Therabbitmode

2、lalandmiddlefemoralmedullarycavityofonesideageintramedullarybloodcirculationandtocausecontinuoushighIP.IPbetepoints.HEstaining,lightmicroscope,eletronmicroscopeandimmunohistochemicalmethodorphologyofdistalarticularcartilageanditsmetabolismchangesatdifferenttime

3、points.RESULTS:HighIPedafterthedamageoftheintramedullarybloodcirculationanditlastedforalongtimeinundrillingdepressiongroup.MP1）的异常增高在软骨退变中起重要作用［2］，是软骨受损的指标之一.既往建立骨内高压动物模型采用的是肢体关节固定法、外周循环阻滞法、交叉韧带及滑膜组织切除法［3］，没有直接破坏髓内循环的方法.我们通过骨水泥填塞造成髓内循环的破坏，建立骨髓腔内循环障碍所致的动物模型以完善骨

4、内高压动物模型的病因种类，为进一步研究骨内高压及其对关节软骨的影响创造实验基础.　　1材料和方法　　1.1材料　　新西兰大白兔54只由重庆医科大学实验动物中心提供，雌雄不拘，体质量（3.0±0.3）kg，兔龄5mo±7d.随机选取6只作为正常对照，其余48只随机分成2组，每组24只.聚甲基丙烯酸甲酯TJ骨水泥(天津市合成材料工业公司生产的PMMA)；16号上颌窦穿刺针（上海埃斯埃医械制品有限公司）；HU50型智能数显测压仪（安徽赛英电子研究所提供）；重酒石酸去甲基肾上腺素注射液(上海禾丰制药有限公司)；MMP1一

5、抗,购于美国Chemicon公司，二抗及配套试剂为武汉博士德生物公司产品.　　1.2方法　　取兔右侧股骨髓腔内骨水泥灌注填塞，左侧作为空白对照.将48只兔以速眠新0.15mL/kg前肢im麻醉后，俯卧位下肢外展30度固定于手术台，以兔股骨第3转子为中心，作长约3cm的后外侧切口，沿肌间隙进入，暴露第3转子、大转子及转子间窝，在转子间窝处开髓，以探针探测髓腔方向后，再以手持式磨钻扩髓至股骨中段狭窄处，生理盐水反复冲洗，使被破坏的骨质、髓内容物完全冲出，干纱条沾干.将PMMA骨水泥揉成直径0.4cm圆团植入髓腔，以探针推

6、至中段狭窄处，保留远端1/2髓腔空间.待先前植入的骨水泥固化后，同法调配PMMA，搅拌均匀装入注射器，以长针头插入髓腔触及填塞处，抬高股骨近端，加压推注徐徐退针至骨水泥溢出，开髓创口.将实验兔随机分成2组，分别为钻孔减压组和未钻孔减压组，每组24只；每组又分为4个不同观察时段（每时段6只动物），分别为术后4，8，16，32处，暴露股骨远端，将测压仪与穿刺针及注满1g/L浓度的肝素生理盐水的注射器三通相连，以穿刺针斜行向近心端与股骨长轴呈30°穿入髓腔达对侧皮质，退针少许，观察仪器显示数据，待其无明显变化后，记录所得压

7、力值即为股骨远端髓内压.术后当日测量完术侧骨内压后，随机选取6只家兔立即给予耳缘静脉0.1mg/L重酒石酸去甲肾上腺素0.1mL/kg，观察骨内压变化情况.取不同时段的钻孔减压组与未钻孔减压组家兔股骨远端关节行HE染色光镜观察.取各组家兔关节软骨标本行电子显微镜观察.取各组家兔股骨远端关节标本脱钙，石蜡包埋切片，免疫组化检测MMP1在软骨内的表达.　　统计学处理：实验数据以x±s表示，采用SPSS10.0统计软件进行多样本均数比较的方差分析.P<0.05为差异有统计学意义.　　2结果　　2.1骨内压力的变化术

8、后iv去甲肾上腺素后，正常组骨内压先升至（3.60±0.20）kPa,0.5h后降为（2.30±0.35）kPa；术侧骨内压上升为（4.67±0.49）kPa，0.5h后下降为（4.13±0.42）kPa.正常组中注射去甲肾上腺素后骨内压升高和降低的幅度差为（1.29±0.16）kPa，而手术组骨内压升高和降低的幅度差为（0.54±0.10）k