广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量测定

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1、广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量测定【摘要】目的测定广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量,评价华南忍冬药材质量。方法采用高效液相色谱法,AngilentODSC18(4.6mm×150mm,5μm)柱,以乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,三相的比例0～20min为7∶5∶88,25min为13∶13∶74；流速为0.5mL/min；检测波长为327nm；柱温为30℃。结果广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量范围为2.21%～3.94%。结论广西不同产地华南忍冬中绿原酸含量存在一定的差异,但均已达到《中华人民共和国药典》的要求。【关键词】华南忍冬；绿原酸；高效液相色谱法；含量测定Ab

2、stract：ObjectiveTodeterminethecontentofchlorogenicacidinFructusLoniceraConfusaDC(FLCD)fromdifferentplacesinGuangxibyHPLC,andevaluateitsinternalquality.MethodsHPLCseparationedonaAgilentC18analyticalcolumn(4.6mm×150mm,5μm)bygradientelutingethanol-0.05%phosphoricacidatthefloL/min.Thecolumntemperature

3、.ResultsThechlorogenicacidcontentofFLCDfromdifferentplacesinGuangxirangedfrom2.21%to3.94%.ConclusionThechlorogenicacidcontentsofFLCDfromdifferentplacesinGuangxiaredifferent,butallofthemareuptothestandardofPhamarcopoeiaofthePeople’sRepublicofChina.Keyination华南忍冬为山银花的一种,系忍冬科忍冬属植物华南忍冬LoniceraconfusaD

4、C.的干燥花蕾,具有清热解毒之功效,同时还是重要的化工原料和优良饮品原料。2000年版及其之前的《中华人民共和国药典》将华南忍冬当作山银花使用,2005年版《中华人民共和国药典》将华南忍冬定为山银花3种植物之一[1]。　　1仪器与试药安捷伦Agilent1100高效液相色谱仪；CG-16illiporeSimplicity-185超纯水仪(美国密里博公司)；BP211D电子分析天平(德国赛多利斯)；Agilent8453紫外分析仪(美国安捷伦科技公司)。绿原酸对照品(由中国药品生物制品检定所提供,批号110753-200413)；实验用10批样品均经广西中医药研究所副研究员方鼎鉴定为忍冬科

5、植物华南忍冬LoniceraconfusaDC.的干燥花蕾或带初开的花。甲醇、乙腈(天津四友生物医学技术有限公司,色谱纯)、乙醇(北京化工厂,分析纯)、磷酸[中国医药(集团)上海化学试剂公司,分析纯],其他试剂均为分析纯。　　2方法与结果　　2.1对照品溶液的制备取绿原酸对照品3mg,精密称量,置10mL容量瓶中,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,得到浓度为0.3mg/mL的溶液,备用。　　2.2供试品溶液的制备精密称定华南忍冬药材粉末0.1g,精密加入70%乙醇50mL,超声提取30min,所得溶液趁热离心15min,取上清液即可。　　2.3色谱条件色谱柱为AgilentC18柱(150mm

6、×4.6mm,5μm)；流动相为乙腈-甲醇-0.05%磷酸,0～20min三相的比例为7∶5∶88,25min为13∶13∶74,体积流量为0.5mL/min；柱温为30℃；检测波长327nm；进样10μL；理论塔板数以绿原酸计不低于1000。　　2.4线性关系考察精密吸取上述绿原酸对照品溶液1mL,置2mL容量瓶中,加70%乙醇稀释至刻度,摇匀,得浓度为0.15mg/mL对照品溶液。按此方法分别制得浓度为0.075、0.0375、0.0187mg/mL的对照品溶液,按上述色谱条件分别进样测定。以峰面积积分值为纵坐标,绿原酸的浓度(mg/mL)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程为：Y＝71

7、290.5169X－159.97853,r＝0.9998,结果表明在0.1870～3.00mg范围内线性关系良好。　　2.5精密度试验精密量取上述同一供试品溶液10μL,重复进样6次,按上述色谱条件测定,绿原酸峰面积积分值的RSD＝0.50%。　　2.6重复性试验分别取同一批样品各6份,按“2.2”项下方法制备并进行测定,结果绿原酸的平均含量为3.30%,RSD＝1.05%。　　2.7稳定性试验取同一供试品溶液,按上述色