微生物实验复习资料(压缩版)

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1、1.1.取镜2.放镜：3.对光：①用低倍物镜对光②反光镜③升高聚光器④并打开光阑。4.滴油5.油镜（从侧面观察使载物台上升，使油镜浸入油中）6.粗调：螺旋调焦（上升，待看到物像7细调：螺旋调焦8绘图9护养10还原2.培养基是按微生物生长繁殖所耑的营养配制成的营养基质，又称人工培养基。用來培养分离鉴定，保存各种微生物。3.①细菌生长繁殖的必备条件：营养物质和环境条件。②细菌的营养.•水、碳素营养、氮素营养、无机盐、生长因素等。适宜的环境：絚离子浓度、温度、气体、渗透压。③制备培养基的原则和要求：1.培养基需有适合微生物生长的营养物质2.配制的

2、培养基须有适合的酸碱度（pH值）。3.配制培养基时，盛装培养基的容器应该没有抑制细菌生长的有害物质。4.所制备的培养基应该是透明的或半透明。5.制备的培养基不得含有任何活的细菌。4.纯分离技术：使微生物共生群体分离开，得到纯培养的过程称微生物的纯分离技术。得到的纯培养物称纯种。纯种：指一种或一株微生物培养物屮所有的细胞只来源同一个细胞的后代。分离纯化法：（细菌分离纯化）1、显微揀作器单细胞挑収法2、稀释涂布平板法3、稀释浞合（倾注）平板法4、平板划线法5.平板划线：是借助将蘸有混合细菌的接种环在平板表面多方向的连续划线，使混杂的微生物细胞在

3、平板表面分散，浓度变稀，经培养得到由单个细胞繁殖而成的菌落，从而达到纯化的目的。平板划线的原则和目的：通过划线稀释细菌和获得单个菌落.6.平板（平皿）划线要领：1划线均匀而细密，不重复。3培养基不能划破。2充分的利用培养基的面积。4培养吋培养皿倒置。7.细菌在固体培养基中生长表现：1、大小（mm表示。1mm以内露滴状；l-2mm小菌落。2--4mm屮等大菌落；4-6mm以上称大菌落或巨大菌落）2、形状（圆形、不规则形）3、边缘（整齐、锯齿状）4、表面性状（光滑、粗糙、）5、隆起度（扁平、隆起、中凸）6、颜色及透明度（黄色、灰白、光泽、透明）

4、7、硬度（干燥、湿润、粘液）8、溶血（在血培养基上的表现）8.液体培养基接种法：用于增菌及鉴定细菌生长特点，如表面生长，沉淀生长，均匀混浊生长等。9.细菌在液体培养基屮生长的三种不同现象：混浊：细菌均匀弥漫扩散，出现不同程度混浊。沉淀：细菌由下沉。肉眼可见沉淀物（颗粒絮状）菌膜：耑氧菌易在液面生长，形成可见的菌膜，菌环。1.染色剂分类：碱性染色剂：（电离后分子带正电荷）；碱性染色剂主要于染核和异染颗粒等细胞结构。酸性染色剂：（电离后分子带负电荷）；酸性染色剂主要用于染细胞质。复合染色剂：（在电离后分子不带电荷，故也称为中性染色剂）；复合染色

5、剂主要用来染螺旋体和立克次体。2.革兰氏染色步骤为：紫、碘、酒、红四步1、草酸铵结晶紫染色1-2min（碱性染料着染），水洗；2、革兰氏碘液染1-3min（媒染剂媒染），水洗；3、酒精脱色30s左右（脱色剂），水洗；4、稀释的石炭酸复红30s—lmin（复染），水洗。千燥，镜检。3.革兰氏阳性菌：细胞壁肽聚糖层厚，交联而成的肽聚糖网状结构致密，经乙醇处理发生脱水作用，使孔径缩小，通透性降低，结晶紫与碘形成的大分子复合物保留在细胞内而不被脱色，结果使细胞呈现紫色。革兰氏阴性菌：细胞壁肽聚糖层薄，网状结构交联少，类脂含量较高，经乙醇处理后，类脂

6、被溶解，细胞壁孔径变大，通透性增加，结晶紫与碘的复合物被溶出细胞壁，因而细菌细胞被脱色，再经石炭酸复红复染后细胞呈红色。4.革兰氏染色时注意事项：1、要用幼龄培养物作革兰氏染色；2、涂片不宜太厚，以免脱色不完全造成假阳性5.特殊染色法是对细菌特殊结构进行染色的方法。包括芽胞染色、荚膜染色、鞭毛染色等。6.芽胞染色原理：细菌的芽孢壁比营养体的细胞壁结构复杂而且致密，透性低，着色和脱色都比营养体细胞困难。方法：采用碱性染料微加热着染或延长染色时间，使营养体（菌体）和芽胞都着色再脱去营养体细胞的颜色而保留芽胞的颜色，再用其他颜色的染液着染营养体方

7、法，并可在显微镜下区别。7.芽胞染色结果是：营养体染成红色，芽孢染成绿色。8.细菌的生化试验就是检测细菌是否利用某种物质并进行代谢及合成产物。判断和确定细飽合成和分解代谢物的特征，借此来鉴定细飽的种类。9.选作的七项生化试验1）醇糖分解试验：不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，能利用或不能利用。能利用则产酸产气，或产酸不产气。2）吲哚（Indol）试验：某些细菌能分解蛋白胨屮的色氨酸，生成吲哚。吲哚的存在可用显色反应表现出来。吲哚与对二甲基氨基苯甲醛结合，形成玫瑰吲哚，为红色化合物。用于肠杆菌科各菌属的鉴别3）MR（methylred）

8、试验：某咎细菌在葡萄糖蛋白胨水培养基巾能分解葡萄糖产生丙酮酸，进一步分解可产生乳酸，琥珀酸、醋酸和甲酸等大量酸性产物，可使培养基PH值1降至pH4.5以下。使甲基红指示剂变红。现