案件中检测不到精子或无法扩增男性dna的情况论述

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1、案件中检测不到精子或无法扩增男性DNA的情况论述-->案件中检测不到精子或无法扩增男性DNA的情况论述摘要：抗P30胶体金免疫试纸条（又称精斑试纸条）是利用免疫学方法和色谱层析技术对前列腺特异性抗原（PSA,又称P30）进行特异性检测的一种简便方法[1]。由于操作简单、耗时短、无需特殊设备和结果易判读等优点而被广泛用作法医学实际检案中的精斑确证试验。医学毕业论文但在实际案件中，有时会出现精斑试纸条检测呈现阳性结果，却检测不到精子或无法扩增男性DNA的情况，为验证及比较灵敏度及特异性，本文进行了一些探讨，现报道如下。关键词：精斑试纸条免疫学方法实际案件1材料和方法1.1材

2、料精斑试纸条：购自美国E-boatDallas公司。样品：10支阴道棉签拭子取自一周内无性生活的女性志愿者，阴道分泌液斑取自4名未婚女性志愿者，尿液斑取自4名上述未婚女性志愿者和5名男性志愿者。唾液斑和汗液斑各取自5名男性志愿者。1份人精液标本由附属医院检验科提供。5份多囊卵巢综合征患者阴道分泌液斑由附属医院生殖中心提供。鸡和猪精液样本各一份由农业大学提供。1.2方法1.2.1样品制备剪取5mm×5mm阴道液斑、尿液斑、唾液斑、汗液斑，剪取5mm×5mm×5mm阴道拭子样本，置150μL生理盐水中浸泡过夜，随后各吸取50μL浸泡液用生理盐水作1∶1，1∶2，1∶5，1∶

3、10，1∶50，1∶100稀释。取人精液1μL作1∶10，1∶100，1∶1000，1∶10000，1∶100000稀释。1.2.2精斑试纸条的使用按试纸条说明书介绍方法操作，分别在5min、10min观察结果，仅质控线出现红色为阴性，质控线和检测线均出现红色为阳性，质控线出现红色、检测线出现淡红色为弱阳性。1.2.3精子检查采用精子涂片HE染色法。1.2.4STR检测采用Promega公司的Po试剂盒检测。2结果2.1阴道拭子、阴道分泌液斑检测结果（表1）2.210min检查为阳性的4份样本稀释后的检测结果精斑试纸条的检测结果见表2，精子涂片HE染色法均未检见精子2.

4、3生理周期分泌液斑的检测结果1名阳性女志愿者的滤泡期、排卵期和黄体期的阴道分泌液斑，黄体期样品在5min时观察为阴性，10min时的观察结果为阳性，其余时期结果均为阴性。2.4尿液斑检测结果5名男性志愿者和4名女性志愿者尿液斑检测结果均呈阴性。2.5唾液斑检测结果5名男性志愿者唾液斑检测结果均呈阴性。2.6汗液斑检测结果5名男性志愿者汗液斑检测结果均呈阴性。2.7多囊卵巢综合征患者阴道分泌液斑检测结果5例未经治疗的多囊卵巢综合征患者中有1例阴道分泌液斑10min检查结果为阳性。2.8动物和人精液检测结果鸡和猪精液各一份，检测结果均呈阴性。人精液稀释至10000倍，仍呈阳

5、性结果，但检测线显现红色的时间比质控线迟且颜色浅。稀释至100000倍，仍可见红色的检测线，但显色的时间明显延迟，在质控线出现1～2min后才出现。10min时观察，质控线和检测线色度相似。人精液标本稀释至1∶1000时仍可检见精子，当稀释至1∶10000后偶然可检出少量精子。2.9STR检测4份10min检查为阳性的女性志愿者样品Amelogenin基因均只检出X基因峰，其余15个常染色体STR峰数≤2。3讨论精斑试纸条是一种采用免疫学技术检测精液中前列腺特异抗原的试纸条，本实验所用试纸条的说明书介绍其灵敏度达2000～3000倍，可能各厂家产品的灵敏度并非一致，Ho

6、chmeister等人报告试纸条灵敏度可达500000～1000000倍[2]，文献报道[3]人精液稀释640000倍仍可测得阳性结果。本文稀释10000～100000倍仍可呈阳性反应，说明所用的试纸条的灵敏度非常高。临床上，精斑试纸条常用来检测前列腺炎和前列腺癌患者血清中PSA水平。精浆特异蛋白是一种由前列腺分泌的糖蛋白，是人精液所特有的抗原成分，因此，检测前列腺特异抗原现已成为确证精斑最有效的方法之一，尤其是对微量陈旧检材[3]。文献曾报道[4],男性尿液、血液均可检测出PSA。汗液、乳汁和羊水也存在低水平的PSA，说明女性也可以分泌PSA[5]。但本文收集的9份男

7、、女尿液斑，5份尿液斑，5份唾液斑，5份汗液斑均呈阴性，说明本实验所用试纸条不受体液的影响且具有器官特异性。另外，本文收集2种动物精液样本，经精斑试纸条检测结果均为阴性，说明该试纸条具有一定的种属特异性。本实验采集了10份阴道拭子，出现了2个阳性反应。PSA作为精液中的蛋白组分，受外界影响比各种酶小，说明其稳定性好，性交后精液与阴道液混合后PSA仍能存留较长时间，因而，虽取自一周内无性生活的女性，但不排除阳性反应者的阴道内仍保留微量PSA；也不排除两个拭子为阳性的个体与服用过避孕药或治疗中使用了激素类药物有关[5]；4名未婚女性志愿者阴道