圆二色谱仪使用

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1、圆二色谱仪使用手册实验前请先阅读第一部分注意事项2011年4月6日整编河北大学理化中心目录一、注意事项二、光源的选择三、MOS450波长的校正四、电压的调节五、MOS-450圆二色光谱扫描操作规程六、MOS450-SFM300动力学操作方法一、注意事项1、滴定及变温实验时，需要磁子搅拌。实验结束时首先拔掉搅拌电源。在样品池内无磁子的情况下搅拌器空转会烧毁控温元件。2、光源(也就是氙灯或汞氙灯)不可频繁开关。举例而言，如果马上不用仪器，但半个小时后需要使用仪器，就不要为了节约光源寿命而将光源关闭。短时间内频繁开关光源反而会缩短光源寿命

2、。3、光电倍增管移动时(比如从圆二色模式换为荧光模式)，注意用软件将Hv（高压）关闭。4、扫描速度在0.5-5s/nm。使用手册上写的扫描速度有误，特别注意不要低于0.5秒/nm,过快的扫描速度易造成calibration移位。5、如需用到emission单色器，就是那个需要用光纤连接的单色器，扫描速度要大于1s/nm,连0.5s/nm都不能用。6、PMT的HV不要超过1000V.7、使用控温附件进行变温实验时，一定要将地上的那个水浴恒温槽打开，水槽温度设为20度以下即可。8、TCU上设置为remote;Powersupply设置为

3、ARC.9、仪器运行过程中，更换样品时，shutter最好关闭。二、光源的选择1、电源：图1中的Lamppowersupply处有Xe（红色）、Xe(Hg)（红色）、零线（黑色）三个插孔。零线插头为黑色，直接插到黑色的零线插孔中。火线插头为红色，在做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时插在Xe（红色）插孔中，在做快速动力学测量的时候插在Xe(Hg)插孔中。2、光源选择：图2中的Verticalsetting部位下方的底座上有Xe、Xe(Hg)两个标示前后排列。手动松开中间的大圆头Screws(图2中)，可以拉出或推进Verticalset

4、ting。当Verticalsetting的金属头通过前后移动到下方的哪个标示位置上，也就是那个标示所示的灯正对着光路，为测试用光源。做快速动力学测量的时候选Xe(Hg)，做圆二色、紫外、荧光的光谱扫描时选Xe，最后再旋紧中间的大圆头Screws。注：Xe（Hg）灯中的Hg元素有一些很强的特征谱线，加强了Xe元素发光的强度，对于动力学测量要求一个波长的光源能量要强，才能测量较为精确的谱图。而对于光谱扫描，单独的Xe元素谱线较为平滑，光源对扫描的影响较小。图1图2三、MOS450波长的校正仪器使用一段时间后需要对仪器进行波长校正，以保

5、证测量的准确性，波长校正的操作步骤如下：1、确认样品仓中没有任何样品和样品池。2、根据光源选择的操作说明，将光源换为Xe（Hg）灯。3、打开ALX-250、MM-450和PMS-450电源。4、点击电脑中的BioKine软件图标，进入测量主界面。5、在主界面选择Device菜单的Scanningspectrometer命令，进入光谱扫描界面。点击按钮设置参数，在光谱测量模式里选择Fluorescence模式，波长扫描范围200-750nm，进行光谱扫描，得出如图1所示谱图。此时检测器位置为与入射光成180度的位置，不用改为荧光的位置

6、。图16、谱图在546nm处应该出一个峰，比较546nm处的峰是否有偏差。如果超出+/-1nm的范围，需要进行波长校正。7、举例说明，如果在550nm处出峰，波长偏了4nm，那么就在图2所示主界面左下栏的Ex处填入550nm，按回车键。图21、点击图2主界面Install菜单的Spectrometeradvancedsettings命令，出现图3所示的窗口，点击Excitation下方的Calibration按钮，进入波长校正界面，如图4。图3图4在图4所示窗口里的Currentwavelength处输入546，点击OK按钮，进行波

7、长校正。Xe灯校准波长467nm；Xe(Hg)灯校准波长546nm。操作完以上各步骤，波长校正完成。可进行正常的测量操作。四、电压的调节1.选择Xe灯，打开ALX-250稳定10分钟，将ALX-250的功率调整到150W；2.在打开ALX-250的同时，打开MM-450电源，机器预热10min；3.确保空仓（样品池中无待测样品）。狭缝设置为2nm4.点击电脑桌面上的图标，进入BioKine软件操作主界面。点击Install的Device，出现图1，只选中MOS-450，点击OK。图1进入图2界面，点击，图2输入EX值200nm，打开

8、shutter，Hvon，Auto值为200左右。五、MOS-450圆二色光谱扫描操作规程1、选择Xe灯，打开ALX-250稳定10分钟，将ALX-250的功率调整到150W；2、在打开ALX-250的同时，打开仪器电源，先开MM-4