大鼠三叉神经痛模型的建立

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时间:2018-10-29

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1、大鼠三叉神经痛模型的建立【关键词】三叉神经痛动物模型脱髓鞘改变大鼠原发性三叉神经痛是老年人群中常见病、多发病。随着人口老龄化倾向,该病的发病率有增高趋势。目前治疗三叉神经痛的手术方法很多,但多为破坏性治疗,且疗效不能令人满意。因此有必要建立一个可靠的大鼠三叉神经痛模型,以便进一步了解和研究三叉神经痛的发病过程及治疗方法。尽管目前三叉神经痛的发病机理学说众多,但比较公认且有纤维解剖学证据的是微血管压迫学说[12],本实验模型正是以此学说为基础建立的。1材料和方法1.1实验动物选择健康成年雄性SpragueDauley

2、(SD)大白鼠18只,体重200220g。18只大鼠随机分为模型组、手术对照组和正常对照组3组,每组6只,模型组行眶内结扎大鼠眶下神经,手术对照组只暴露不结扎。1.2模型建立2%戊巴比妥钠对大鼠进行腹腔内注射(40mg·kg-1)麻醉。大鼠取俯卧位,8%硫化钠溶液脱毛,3%的碘伏消毒,铺无菌巾。手术是在YZ20T6同光路手术显微镜直视下完成的。作头顶部中线直切口,显露额骨和鼻骨,暴露眼眶,可见眼眶的边界由上额骨、额骨、泪骨和颧骨组成,对眼眶周围仔细解剖游离。将眶内容物用一个棉签轻轻拨开即可见到位于眶底部内侧的眶下神经

3、,约1.5mm粗细。在眶内从近端仔细分离眶下神经至远端的眶下孔,用两根铬肠线(50)间距约2mm力度适中地结扎在眶下神经上,为达到理想的效果,压迫程度的标准为:在显微镜下可见结扎线使神经的直径略微变细,但尚不阻断神经外膜的血液循环。切口用丝线(50)缝合。在对照组中,眶下神经以同样方法被暴露,但不被结扎[3]。1.3行为测试将各组大鼠分别于手术前1d,术后7、14、28、42、56和70d行机械刺激反应阈值测试。机械刺激反应阈值是由STOELTING.ANOVA:F(1,14)=16.376,P<0.01]。

4、见表1。表1手术前后不同时间大鼠疼痛反应阈值变化a.模型大鼠神经束(髓鞘染色10×20)可见部分神经纤维外周髓鞘脱失,呈空泡状(↑所示);b.模型大鼠半月节细胞(甲苯胺蓝染色10×40)可见细胞内尼氏小体浓染,与正常节细胞未见明显差异(↑所示)图1模型大鼠神经系统病理学检查结果2.3模型大鼠神经系统超微结构改变正常有髓纤维的轴突形态规则,髓鞘厚度基本一致,髓鞘的板层结构清晰、致密;雪旺细胞核结构清楚、胞浆均匀,完整包裹有髓和无髓纤维。正常节细胞内有大量密集排列的粗面内质网,其间充满核糖体;线粒体异常丰富是节细胞的另一特

5、点。模型大鼠神经系统超微结构主要表现为:髓鞘结构紊乱,轴突变细,处于偏心位置,髓鞘增厚、板层松解,髓鞘局灶性断裂、破坏,呈虫蚀状的局灶性脱髓鞘改变,见图2。三叉神经半月节细胞与正常相比未见明显异常改变。3讨论目前,国内外建立三叉神经痛的动物模型有3种:第1种为脑闩下蛛网膜下腔注射微量青霉素GK引起大鼠三叉神经痛样反应模型[4];第2种为猫去牙髓模型[5];第3种为慢性压迫性损伤大鼠眶下神经模型(CCIION)[3]。由于第3种模型的致痛机理与血管压迫学说较为接近,故选择CCIION模型动物进行实验。与有关文献[3

6、,56]报道结果一致,手术两周后CCIION大鼠的结扎侧及结扎对侧均表现为对疼痛反常的高度敏感性。如表1所示结扎侧与结扎对侧组疼痛反应阈值与正常组及对照组有显著性差异,说明模型建立是成功的。目前,大多数国内外学者已认为三叉神经根的脱髓鞘改变是三叉神经痛的病理基础。髓鞘的完整性起到绝缘作用,脱髓鞘使轴突裸露,传入传出纤维间产生“短路”,这种“短路”冲动累计到一定总和即发生了阵发性剧痛[7]。CCIION大鼠出现三叉神经痛的行为学症状后,于手术后10周取神经根作病理切片,结果显示与人类该病的神经病理表现大体相同。前面

7、提到过该模型的建立方法为慢性压迫损伤,从致痛机理上与普遍公认的血管压迫学说类似,这样,就从致痛机理和病理改变两方面模拟了人类疾病,从而为进一步了解和研究三叉神经痛的发病过程及治疗方法提供了依据。对于结扎对侧亦出现三叉神经痛样反应的机理目前尚不完全明确,主要学说有:(1)引起疼痛反应是一种“交叉兴奋”的结果[8]。(2)Vos等[9]认为模型大鼠之所以产生痛样反应,是与三叉神经中枢核团内与疼痛有关的P物质及抗氟化物的酸性磷酸酶免疫活性增加有关。(3)Benoist等[10]在1997年和1999年通过背侧丘脑和主要躯体感

8、觉皮脂的神经电生理测定,发现结扎对侧的刺激亦导致上述神经核团内有异常生物电改变,只是严重程度较结扎侧为轻,可能的解释为慢性压迫所导致的神经干病变亦引起高位神经中枢的病变。【参考文献】[1]HAMLYNP J,KINGTT.Neurovascularpressionintrigeminalneuralgia:aclinicaland

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