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时间:2018-10-24
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1、PDCD5和Livin蛋白在鼻腔-鼻窦鳞状细胞癌中的表达及其临床意义1.承德医学院附属医院耳鼻咽喉科河北承德067000;2.承德医学院附属医院麻醉科河北承德067000摘要:R的:研究PDCD5及Livin蛋白在鼻腔、鼻窦鱗状细胞癌(SNSCC)屮的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法及Westernblot技术分别检测54例SNSCC,30例鼻息肉(NP组)以及25例正常鼻腔粘膜(正常组)中PDCD5和Livin蛋白的表达情况。结果:PDCD5蛋0在SNSCC组织屮的表达明显下调,而Livin蛋白的表达明显上调(P<0.05)。结论:PDCD5蛋白的失活和Li
2、vin蛋白的诱导可能与鼻腔、鼻窦鱗状细胞癌组织的发生、发展密切相关,PDCD5蛋白有望为鼻腔、鼻窦鱗状细胞癌的诊疗提供新的靶点。关键词:鼻腔;鼻窦鱗状细胞癌;PDCD5蛋白;Livin蛋白;免疫组织化学;AbstractObjective:ToexploretheexpressionandsignificanceofProgrammedCellDeath5(PDCD5)proteinandLivinproteininsinonasalsquamouscellcarcinoma(SNSCC).Methods:ImmunohistochemicalmethodandWester
3、nBlotmethodwasusedtodeterminetheexpressionofPDCD5andLivininspecimenofsinonasalsquamouscellcarcinoma(SNSCC)infifty-fourcases,nasalpolyps(NP)inthirtycases,andnormalnasalmucosaintwenty-fivecases.Results:TheexpressionofPDCD5proteininSNSCCsignificantlydecreased.ButtheexpressionofLivinproteininS
4、NSCCup-regulatedobviously(P<0.05).Conclusion:TheinactivationofPDCD5proteinandtheactivationofLivinproteinmayplayanimportantroleinthedevelopmentofSNSCC,andthereareapositivecorrelationbetweenPDCD5andLivinproteininSNSCC,whichmaybeidentifiedasanewtherapeutictarget.Keywords:Sinonasalsquamouscell
5、carcinoma;ProgrammedCellDeath5;Livin;Immunohistochemicalmethod本实验通过检测PDCD5和Livin蛋白SNSCC组织中的表达,来研究二者在SNSCC发生、发展中的作用。1.资料与方法1.1—般资料研宄对象为2007年12月〜2014年3月我院收治的54例原发SNSCC患者肿瘤组织。男34例,女20例,平均59.8岁,均为单一肿瘤无并发肝肾疾患。高分化5例,中分化29例,低分化20例。取中鼻甲部分切除术患者的中鼻甲黏膜组织(正常组)25例,以及鼻息肉(NP组)30例设为对照组。1.2主要试剂鼠抗人PDCD5单克隆抗
6、体,购自北京博奥森生物技术有限公司。兔抗人Livin多克隆抗体购自武汉博士德生物工程奋限公司。HRP标记的羊抗兔IgG二抗及ECL发光试剂盒购自北京博奥森生物技术有限公司。1.3检测方法1.3.1免疫组织化学染色采用S-P法对石蜡标本进行切片、烤片,二甲苯脱蜡、梯度酒精脱水,3%过氧化氢火活内源性过氧化物酶,PH6.0柠檬酸缓冲液煮沸行抗原修复。SP法免疫组化染色,一•抗的稀释浓度为1:100,DAB溶液显色,苏木素复染,脱水、透明,中性树胶封片。设阳性和阴性对照。PDCD5及Livin表达采用相同判定标准[1]:PDCD5蛋白主要在细胞浆内或者细胞膜上出现棕黄色颗粒的细胞
7、为阳性细胞。Livin蛋白表达主要定位在细胞质,光学显微镜下细胞质被染成淡黄至棕黄色的粗细不等的颗粒者为阳性表达。按照染色强度进行评分,0分无染色;1分轻微染色;2分中度染色;3分强染色。按照染色面积评分,0分无染色;1分细胞染色面积少于25%;2分面积为25%〜50%;3分面积人于50%。综合两种标准结果,采用两种判定结果的乘积,参考标准:0分为(一);1〜2分为(+);3〜4分为(++);5〜6分为(+++)o1.3.2Westernblot取适量组织标本,加lml含多种蛋白酶抑制剂的总蛋白抽提试剂,提取总蛋白
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