SNT2657-2010国境口岸组织胞浆菌检验方法.pdf

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1、版权所有·禁止翻制、电子发售中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２６５７—２０１０国境口岸组织胞浆菌检验方法犈狓犪犿犻狀犪狋犻狅狀犳狅狉犎犻狊狋狅狆犾犪狊犿犪犪狋犳狉狅狀狋犻犲狉狆狅狉狋２０１０１１０１发布２０１１０５０１实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局犛犖／犜２６５７—２０１０版权所有·禁止翻制、电子发售前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广西出入境检验检疫局。本标准主要起草人：吴文旺、谭勇、胡慧宁、陆建新、潘光合、方晋。Ⅰ犛犖／犜２６５７—２０１０版权所有·禁止

2、翻制、电子发售国境口岸组织胞浆菌检验方法１范围本标准规定了国境口岸组织胞浆菌的检验对象、方法、结果报告及阳性结果的处置。本标准适用于国境口岸组织胞浆菌的实验室检验。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ１９４８９实验室生物安全通用要求Ｄｏｃ９２８４ＡＮ／９０５危险物品安全航空运输技术细则（２００７年～２００８年）３术语和定义下列术语和定义适用于本文件。３．１组织胞浆菌犎犻狊狋狅狆犾犪狊犿犪组织胞浆菌属真菌界半知菌亚门丝孢菌纲丝孢菌目从梗孢科，

3、为双相型真菌，在２５℃条件下培养为霉菌相，在３５℃培养及组织内为酵母相。对人类具有病原性的有荚膜组织胞浆菌和组织胞浆菌杜波变种。３．２组织胞浆菌病犺犻狊狋狅狆犾犪狊犿狅狊犻狊组织胞浆菌引起的感染性真菌病。通常经呼吸道传染，侵犯肺部引起急慢性肺部损害，临床主要表现为发热、咳嗽、咯血、胸痛、呼吸困难、盗汗、消瘦，严重者可引起全身播散，主要累及单核巨噬细胞系统，如肝、脾、骨髓、淋巴结等；也可侵犯肾上腺、皮肤、胃肠道等。该病遍及全球，主要流行于温带地区。４对象４．１来自流行区的出入境人员。４．２国境口岸可疑组织胞浆菌病病人。４．３申请检验的其他人员。５准备５．１器材与试剂实验室检验常用器材参见附

4、录Ａ，培养基和试剂参见附录Ｂ。５．２实验室生物安全实验室生物安全符合ＧＢ１９４８９的规定。大量活菌操作，在生物安全三级（ＢＳＬ３）实验室进行；动１犛犖／犜２６５７—２０１０版权所有·禁止翻制、电子发售物感染实验，在动物生物安全三级（ＡＢＳＬ３）实验室进行。标本检测，包括样本的病原菌分离纯化、药物敏感性试验、生化鉴定、免疫学实验、涂片、显微观察等初步检测活动，在生物安全二级（ＢＳＬ２）实验室进行。标本或活菌培养物运输应符合国际民用航空组织Ｄｏｃ９２８４ＡＮ／９０５中Ａ类传染性物质的要求。６标本采集和处理６．１血液标本静脉采血１５ｍＬ，其中１０ｍＬ置含适量肝素抗凝剂的无菌管中，用离心

5、力１５００犵～２０００犵离心１５ｍｉｎ，取中间层进行真菌培养和涂片检查；另５ｍＬ分离血清进行血清学检查。６．２骨髓标本采集０．５ｍＬ～２ｍＬ抽吸标本置含肝素的灭菌容器中待检。６．３下呼吸道标本推荐每天一次连续三次痰标本送检和培养，或者收集支气管肺泡灌洗液检查。６．４肝、脾、淋巴结穿刺液进行直接涂片和培养。６．５皮肤及粘膜损害渗出物进行直接涂片和培养。６．６组织标本取肝、脾组织制成涂片或进行组织病理检查。６．７标识所采集的标本应进行标识，标识应具有唯一性。７实验室检验７．１检验程序检验程序参见附录Ｃ。７．２病原学检验直接涂片检查、分离培养、生化反应、动物接种方法参见附录Ｄ。７．３血清学检验

6、双向免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）参见附录Ｅ。８结果报告８．１直接涂片检查阳性，报告“涂片检查找到真菌孢子”，并注明细胞内或细胞外；直接涂片检查阴性，２犛犖／犜２６５７—２０１０版权所有·禁止翻制、电子发售报告“涂片检查未找到真菌孢子”。８．２分离培养阳性，且尿素酶试验阳性，明胶液化试验阴性，报告“检出荚膜组织胞浆菌”。８．３分离培养阳性，且尿素酶试验阴性，明胶液化试验阳性，报告“检出组织胞浆菌杜波变种”。８．４分离培养阴性，报告“培养八周末见菌落生长”。８．５双向免疫扩散试验、酶联免疫吸附试验阳性，报告“组织胞浆菌抗体呈阳性反应”，并注明检验方法；反之报告阴性，也注明检验

7、方法。９阳性结果的处置对分离培养出的组织胞浆菌菌株应送上一级实验室做复检或鉴定。阳性结果应按规定向上级主管部门报告。３犛犖／犜２６５７—２０１０版权所有·禁止翻制、电子发售附录犃（资料性附录）实验室检验常用器材犃．１病原学检验常用器材犃．１．１霉菌培养箱（２５℃和３５℃）。犃．１．２显微镜。犃．１．３高压灭菌器。犃．１．４普通冰箱。犃．１．５离心机。犃．１．６生物安全柜。犃．１．７水浴锅。犃．１．８玻璃器皿、解剖用具、接种工具。犃．