千斤拔对吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩作用的研究

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1、千斤拔对吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩作用的研究作者：祁晓晨王航邱晟王彩云【摘要】观察千斤拔（大叶）水煎液对纳络酮引起的吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩的作用，及它对乙酰胆碱引起的正常离体豚鼠回肠平滑肌收缩的影响。［方法］通过制作豚鼠离体回肠正常组标本和培养吗啡依赖离体回肠组标本，观察千斤拔水煎液对加入纳络酮（Nal）1min前后对吗啡组戒断性收缩的影响；及千斤拔水煎液对加入Ach1min前后对正常组回肠收缩的影响。［结果］大叶千斤拔水煎液对乙酰胆碱引起的正常豚鼠回肠收缩和纳络酮引起的吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩均有抑制作用，并且它的作用呈剂量依

2、赖趋势。［结论］大叶千斤拔水煎液能够抑制吗啡依赖离体回肠平滑肌的戒断性收缩。【关键词】千斤拔；吗啡；纳络酮；乙酰胆碱；豚鼠回肠千斤拔为蝶形花科植物蔓性千斤拔Flemingia8philipinensis的根，本品性甘、微涩、平，补肝肾，有祛风利湿、疏筋活络、强筋壮骨、消瘀解毒的功效。本次实验研究大叶千斤拔水煎液对纳络酮引起的吗啡依赖离体豚鼠回肠戒断性收缩及对乙酰胆碱引起豚鼠离体回肠收缩的影响，以期对新的戒毒药物的筛选和研究探讨戒毒的机理提供线索。　　1材料和方法　　1.1实验动物　　豚鼠20只，雄性，体重299.5±23.5g，实验前禁食12h。

3、由南方医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK（粤）2006-0015。　　1.2药品与试剂　　吗啡，乙酰胆碱，注射用盐酸纳络酮（制药厂：成都诺迪康生物制药有限公司，产品批号：080102），千斤拔煎剂：蝶形花科植物大叶千斤拔F·madrophylla，煎煮前除去杂质，然后用清水浸泡半小时，再煎煮40～50min，将药液水浴70～90℃浓缩至浓度为（50g生药/70ml）0.714g/ml，稀释得到三种水煎液浓度分别为（A）3.57×10-3、（B）1.79×10-3、（C）8.95×10-4g/ml（为加入浴管后的终浓度）。现配Kreb’s

4、液，硫酸阿托品注射液（制药厂：无锡市第七制药有限公司，批号：03081713）。　　1.3仪器8　　HW-400S恒温平滑肌水槽和JZ100型张力换能器（成都泰盟科技有限公司），PCLAB—UE生物医学信号采集处理系统（北京威信斯达科技发展有限责任公司）。　　1.4方法　　1.4.1回肠标本制备及分组　　取已禁食12h的豚鼠（n=20），击头处死，立即剪开腹腔取出回肠，弃去近盲肠部约5cm，迅速置于盛有Kreb’s液的培养皿中并洗净冲去肠腔内容物，每只分别剪取4cm的回肠标本。其中10只豚鼠回肠分别剪取6段，随机分到以下6组中，观察药物对乙酰胆碱

5、（2μg/L）引起的正常组回肠平滑肌收缩的作用：正常回肠空白对照组、乙酰胆碱（2μg/L）对照组、千斤拔（A、B、C）系列剂量组、阿托品（6.25×10-5mg/ml）对照组；另10只豚鼠回肠分别剪取5段，随机分配到以下5组中，观察药物对纳络酮（1μmol/L）引起的吗啡依赖模型组回肠戒断性收缩的影响：吗啡依赖空白对照组、纳络酮（1μmol/L）戒断组、千斤拔（A、B、C）系列治疗组。吗啡依赖模型制备方法：将回肠悬挂于50ml含3μmol/L吗啡的Kreb’s液中，通入稳定的空气，于恒温平滑肌浴管中在37℃下孵育4h，每15min更换一次Kreb

6、’s液，形成吗啡依赖回肠标本。　　1.4.28豚鼠回肠平滑肌张力测定　　将各段回肠标本悬挂于37℃恒温平滑肌水槽内含20mlKreb’s液的浴管中，通气管持续通入稳定的空气，回肠下端挂于恒温浴管底部钩上，上端挂于张力换能器金属片上，回肠平滑肌的收缩活动及张力变化通过张力换能器连接计算机并采用PCLAB—UE生物医学信号采集系统记录回肠张力的变化。用PCLAB实时记录回肠平滑肌张力变化，选择参数：低通滤波10HZ，50HZ陷波关闭，时间常数直流，输入范围50mv。实验中所用的药物浓度是浴管中的终浓度。实验前将回肠标本在初始静止张力为2g下平衡15m

7、in，待回肠平滑肌活动稳定后开始记录曲线。分别记录用药前后回肠平滑肌张力的峰值，并比较。将正常组回肠置于含20mlKreb’s液的37℃恒温浴管中，首先记录静止张力下回肠平滑肌收缩曲线，然后记录加入乙酰胆碱2μg/L引起回肠收缩张力变化，并观察在加入乙酰胆碱2μg/L前后1min分别加入各浓度千斤拔（A、B、C/ml）水煎液或6.25×10-5mg/ml阿托品对乙酰胆碱收缩的作用。将孵育4h的吗啡依赖模型组回肠悬挂于含3μmol/L吗啡的20mlKreb’s液的恒温浴管中，水浴温度为37℃，通过张力换能器记录吗啡依赖回肠静止张力下的回肠收缩曲线和

8、加入纳络酮1μmol/L后引起的吗啡依赖模型回肠组戒断性收缩曲线，观察加入纳络酮1μ8mol/L前后1min分别加入各浓度千斤拔（A、B