ybox结合蛋白1在胃癌组织中的表达及意义

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1、Ybox结合蛋白1在胃癌组织中的表达及意义作者：王国荣，车向明1，吴开杰，邱健，潘承恩，王晓强，何文宪【摘要】目的研究Ybox结合蛋白1(YB1)在胃癌的不同发展阶段中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学和原位杂交方法检测正常胃组织、肠化生组织、早期胃癌和进展期胃癌组织中YB1蛋白和mRNA的表达变化。结果在正常胃组织中YB1蛋白和mRNA无表达;在肠化生组织中可见YB1阳性染色于胃黏膜上皮细胞中，但表达较弱;在早期胃癌中YB1表达于全层胃黏膜上皮细胞中，染色较肠化生组织重，而在进展期胃癌中其表达较在早期胃癌中下降。结论YB1的升高可能在胃癌的早期发生和发展中起作用。【

2、关键词】胃癌;Ybox结合蛋白1;免疫组织化学;原位杂交　ABSTRACT:ObjectiveToinvestigatetheexpressionandsignificanceofYboxbindingprotein1(YB1)inpatientswithgastriccarcinomaofdifferentstages.MethodsExpressionsofYB1proteinandmRNAinspecimensofnormaltissues,intestinalmetaplasia,earlygastriccancerandadvancedgastriccancerwe

3、redetectedbyimmunohistochemistryandinsituhybridization.ResultsTherewasnopositivestainingofYB101proteinandmRNAinnormalgastrictissues.However,YB1wasexpressedinepithelialcellsofgastricmucosainintestinalmetaplasia.YB1wasexpressedinalllayersofgastricmucosaofepithelialcellsintheearlystageofgastriccan

4、cer,anditsexpressionwasweakerinadvancedgastriccancerthaninearlygastriccancer.ConclusionElevatedYB1mayberelatedtotheearlypathogenesisanddevelopmentofgastriccarcinoma.　　KEYWORDS:gastriccarcinoma;YB1;immunohistochemistry;insituhybridization　　胃癌为我国第2大恶性肿瘤[1]，且一旦确诊，大多已非早期，故手术和化疗的5年生存率均不高。Ybox结合蛋白1(

5、YB1)属于Ybox结合蛋白家族成员之一，其最初是在HLADRB的增强子序列中被鉴定出来的[2]。YB1包括一个高度保守的核酸结合区域，称为冷休克区域[3]。研究表明，冷休克区域有多种生物学功能，包括基因的转录翻译、DNA的修复、RNA的配对、耐药性及细胞对外源性刺激的反应等[4]。YB1可在很大程度上通过核内调节因子亚单位NFYA和NFYB来影响MHCⅡ类基因的转录[5]。研究表明，YB1可被丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶Akt磷酸化，该磷酸化使得YB1的mRNA5末端的结合力加强，从而使其易位活性增强，这也可能与细胞的增殖和转化相关[6]。10　　以上研究均表明，YB1

6、在肿瘤细胞的增殖及肿瘤的发生、进展和预后中均发挥其生物学作用，但其在胃癌中的研究尚未见报道。因此，我们采用免疫组织化学和原位杂交的方法检测了YB1在胃癌组织中的表达情况，以探讨其可能的作用机制。　　1材料与方法　　1.1标本采集收集病理确诊手术切除的胃腺癌标本63例，其中早期胃癌25例，进展期胃癌38例;肠黏膜化生组织23例。以上患者无其他系统性疾病，在术前均未接受放射和化学治疗。21例正常组织来自胃镜活检组织。其中男12例，女9例;35～50岁者12例，51～72岁者9例。胃癌组与正常组的一般情况比较无显著差异性。　　1.2主要试剂YB1多克隆抗体(5μg/mL)为日本学者赠送;原位

7、杂交试剂盒购自武汉博士德生物公司;YB1的探针序列为：5′>GCCGCTGCCCGTAG　　TGCCGGGCTTGGTGTC<3′，地高辛标记，与人类其他基因无同源性。　　1.3方法10　　1.3.1YB1的免疫组化定位新鲜胃癌组织于100mL/L的甲醛溶液中固定48h，石蜡包埋;切片经脱蜡、水化后，用30mL/L双氧水孵育10min，以去除组织内固有的过氧化物酶。枸橼酸缓冲液修复抗原：92℃水浴15m