液质联用法测定粮食作物中黄曲霉毒素研究毕业论文

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1、液质联用法测定粮食作物中黄曲霉毒素研究毕业论文目录1引言11.1　背景介绍11.1.1　黄曲霉毒素的来源和种类11.1.2　黄曲霉毒素的危害11.1.3黄曲霉毒素的结构和理化性质11.1.4　黄曲霉毒素的分布31.1.5　黄曲霉毒素的防治31.2　不同种类的粮食作物中黄曲霉毒素成份的介绍31.2.1　大豆31.2.2　花生41.2.3　小麦41.2.4　玉米41.3　黄曲霉毒素检测方法51.3.1　薄层色谱法(TLC)51.3.2　高效液相色谱法(HPLC)61.3.3　亲和柱高效液相色谱法(IAG-HPLC)61.3.4　酶联免疫吸附测定法(ELISA)71.3.5　液相色谱—质谱联用技术(

2、LC—MS)71.4　色谱条件的选择81.4.1　流动相的选择81.4.2　容量因子的选择81.5　本课题研究的意义82实验92.1　实验仪器92.2试剂与溶液92.3实验方法102.3.1　样品前处理102.3.2色谱条件102.3.3质谱条件103结果与讨论10233.1提取液的选择103.2色谱条件的优化113.2.1流动相的选择113.2.2流速的选择113.2.3进样量的选择123.2.4色谱柱及柱温的选择123.2.5方法的灵敏度123.3　黄曲霉毒素B1的标准曲线133.4重复性与检出限143.5　样品测定143.6　根据质谱图分析黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M217

3、结论21致谢22参考文献23231引言1.1　背景介绍黄曲霉毒素(aflatoxin,AF)是对人类和动物危害大的真菌毒素之一。黄曲霉毒素污染食品比较严重，尤其是对花生、核桃、玉米及其制品的污染最为严重和普遍。此外，在大豆、稻谷、通心粉、牛奶及其制品、食用油等食品中也经常发现黄曲霉毒素[1]。1.1.1　黄曲霉毒素的来源和种类黄曲霉毒素(aflatoxin,AF)主要是由黄曲霉和寄生曲霉等真菌产生的一类有毒次生代谢物[2]。AF是一类结构和理化性质相似的真菌次级代谢物，目前已发现有20种之多，已确定结构的有AFB1、AFB2、AFM1等18种，它们的基本结构中都含有二呋喃环和氧杂萘邻酮，前者为

4、其毒性结构，后者可能与其致癌有关[3]。1.1.2　黄曲霉毒素的危害黄曲霉毒素的毒性极强，是目前已发现霉菌毒素中毒性最大的一种。目前发现的18种黄曲霉菌毒素中，黄曲霉菌毒素B1毒性最强，黄曲霉菌毒素B1的毒性比氰化钾大10倍，是砒霜的68倍，诱发肝癌的能力比二甲基亚硝胺大75倍。其毒性因动物的种类、年龄、性别和体况以及营养状况的不同有差异，年幼动物、雄性动物较敏感。黄曲霉毒素主要危害动物的肝脏器官，有诱导突变、抑制免疫和致癌的作用，可引起人和动物的急性中毒、慢性中毒和引起癌症。慢性中毒者早期症状表现为食欲不佳、体重减轻、生产性能降低、胴体和蛋壳品质下降，后期出现黄疸、脂肪肝、肝损伤及抑制动物免

5、疫机能和致癌作用[4]。1.1.3黄曲霉毒素的结构和理化性质黄曲霉毒素均为二氢呋喃香豆素的衍生物，都含有双呋喃环和氧杂奈邻酮，前者为基本毒性结构，后者与致癌有关。迄今为止，已发现黄曲霉毒素至少包含有黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q、H1、GM及毒醇等2023种左右结构相似化合物，黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2、M1及M2是粮食和食品中黄曲霉毒素主要存在形式,其中黄曲霉毒素B1的毒性和致癌性最强,相对分子质量分别为B1：312、B2：314、G1：328、G2：330、M1：328、M2：330，分子式：B1：C17H12O6、B2：C17H14O6、G1：C17H12O

6、7、G2：C17H14O7、M1：C17H12O7、M2：C17H14O7，黄曲霉毒素的化学结构式如下图所示：AFB2AFB1AFG1AFG2AFM1AFM2黄曲霉毒素难溶于水、己烷、乙醚和石油醚，易溶于甲醇、乙醇、氯仿、乙腈和二甲基甲酰胺等有机溶剂，分子量为312～346，熔点为200～300℃。黄曲霉毒素对光、热和酸稳定，耐高温，通常加热处理对其破坏很小，只有在熔点温度下才发生分解。黄曲霉毒素遇碱能迅速分解，pH为9～10时迅速分解成几乎无毒的盐，但此反应可逆，即在酸性条件下有复原。5%的次氯酸钠溶液、Cl2、NH3、H2O2及SO2等均可与黄曲霉毒素起化学反应破坏其毒性。在自然条件下，食

7、品中污染的黄曲霉毒素稳定性很强。231.1.4　黄曲霉毒素的分布黄曲霉毒素存在于土壤、动植物、各种坚果、特别是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、调味品、牛奶及奶制品、食用油等制品中也经常发现黄曲霉毒素。一般在热带和亚热带地区，食品中黄曲霉毒素的检出率比较高，在我国，产生黄曲霉毒素的产毒菌种主要为黄曲霉。1980年从17个省粮食中分离了黄曲霉1660株，广西地区的产毒黄曲霉最多，检出率为58