次最低抑菌浓度抗生素对双歧杆菌粘附的影响

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1、次最低抑菌浓度抗生素对双歧杆菌粘附的影响提要本文观察了八种杭生素在次最低抑菌浓度(Sub-MIC)下对双歧杆菌和体外培养肠上皮细胞间粘附的影响。结果表明，次最低抑菌浓度的抗生素均能显著地抑制双歧杆菌的粘附，青霉素和万古霉素对双吱杆菌耘附的抑制有剂贡及时间效应。提示杭生素抑制双吱杆菌的枯附可能是其引起肠道徽生态失衡的一条重要途径。关键词双吱杆菌粘附杭生素大量的研究证实，抗生素在低于最低抑菌浓度(MIC)时，能对细菌的形态，超微结构及生长速率造成影响。体外次最低抑菌浓度((Sub-MIC)的抗生素能够抑制大肠杆菌，酿脓链球菌及淋球菌

2、对宿主细胞的粘附，并以此作为应用小剂量抗生素预防感染的依据〔‘，’，”.由于机体正常菌群形成的生物屏障在抵御外来菌入侵方面起着至关重要的作用，所以探讨次最低抑菌浓度对正常菌群的影响，有着重要的意义。本文观察了八种常用抗生素在次最低抑菌浓度下对双歧杆菌粘附的影响。1材料与方法1.1细菌:双歧杆菌1027株为本所从健康婴儿粪便分离，经多次生化鉴定为青春型双歧杆菌.将细菌接种于硫乙醇酸盐液体培养基增菌，37℃厌氧培养48小时后，用耗尽培养液上清制成菌悬液，调整浓度为1X10，一1X108/mlo1.2抗生素敏感实验:实验用氯霉素、新霉

3、素、轻氨卞青霉素、灭滴灵、青霉素，万古霉素，卡那霉素和庆大霉素为市售。按试管稀释法进行药物敏感实验〔幻，求出各种抗生素的最低抑菌浓度(MIC)。1.3次最低抑菌浓度(Sub-MIC)抗生素对细菌粘附的影响:1.3.11/SMIC抗生素对细菌的处理:双歧杆菌悬液分别加入1/SMIC的各种抗生素，厌氧培养6小时后，进行粘附试验，用抗生素稀释液作对照。1.3.2不同浓度抗生素对细菌的处理:双歧杆菌悬液分别加入1/5,1/10,1/20,1/40MIC的青霉素及万古霉素，厌氧培养6小时后，进行粘附试验，用抗生素稀释液作对照。1.3.3对

4、细菌处理时间的影响:双歧杆菌悬液加入1/SMIC的青霉素及万古霉素，厌氧培养1/2,1,3,6小时后，分别进行粘附试验，用抗生素稀释液作对照。1.4细胞:肠上皮细胞系Lovo细胞引自本校病理教研究室。Lov。细胞按常规传代培养于含10%小牛血清RP-MI—1640培养液中，细胞接种于含盖玻片的培养皿中，待在盖玻片上形成中国徽生态学杂志1996年第8卷第5期单层细胞后，进行粘附试验。1.5粘附试验:取出细胞玻片，经pH7.4PBS清洗一次后，加入抗生素处理的细菌悬液。37℃湿盒温育2小时。pH7.4PBS漂洗6次，自然千燥，甲醇固

5、定，革兰氏染色，高倍镜下计数50个细胞粘附的细菌数，计算平均数及标准差。2结果八种抗生素对双歧杆菌的最低抑菌浓度(MIC)及1/5MIC抗生素对双歧杆菌和肠上皮细胞粘附抑制的结果见附表。可以看出，次最低抑菌浓度抗生素与双歧杆菌温育6小时后，均能显著地抑制双歧杆菌对体外培养肠上皮细胞的粘附。附表1/SMIC杭生素对>t}歧杆菌钻附的影响变产生了对抗生素的耐药性，或使得原来的耐药细菌大量增殖.这样造成肠道菌群失调及抗生素相关性肠炎。本研究发现八种常用抗生素在次最低抑菌浓度下均能显著地抑制双歧杆菌对肠上皮细胞的粘附，因为双歧杆菌是人体

6、肠道最主要的生理性细菌，它对宿主细胞的粘附及定植在维持肠道正常菌群的稳定与平衡中起主导作用。所以本结果说明，抗生素抑制双歧杆菌的粘附可能是其引起肠道微生态失衡的另外一条重要的途径。这在临床工作中也有实际意义，提示即使口服小剂量抗生素，也应及时补充生理性细菌。抗生素MIC抓每素新林素

7、歧杆菌粘附的影响12886.0士2.85.2士2.64.0士1.87.4士3.06.4士2.44.2士2.213.8士5.28.6士3.817.4士6.0‘细菌均数.与其它组比较，P

8、择作用，一些细菌通过突时间(分)图2抗生萦处理时间对双歧杆百枯附的影响分离株1027对氯霉素、新霉素、轻氨节青霉素、青霉素敏感、对万古霉素、卡那霉素和庆大霉素耐药。这一结果与蔡子微报道一致〔5，，符合革兰氏阳性菌的一般规律。与凌代文报道略有差异〔e}。s。中国微