猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望

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880生物工程学报顾金燕等/猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望ChineseJournalofBiotechnologyhttp://journals.im.ac.cn/cjbcnJune25,2015,31(6):880−891DOI:10.13345/j.cjb.150124©2015ChinJBiotech,Allrightsreserved回顾与展望周继勇教授，博士生导师，现任南京农业大学动物医学院院长。“万人计划”首批入选专家，长江学者特聘教授，国家杰出青年科学基金获得者，国家创新人才推进计划重点领域创新团队负责人。获国家技术发明二等奖1项、国家自然科学二等奖1项、国家新兽药注册证书2个、国家发明专利授权14个。发表SCI论文50多篇。猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望顾金燕，邢刚，雷静，刘斐，周继勇南京农业大学动物医学院，江苏南京210095顾金燕,邢刚,雷静,等.猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望.生物工程学报,2015,31(6):880–891.GuJY,XingG,LeiJ,etal.Porcinecircovirustype2andPCV2-systemicdisease-areview.ChinJBiotech,2015,31(6):880–891.摘要:猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2，PCV2)引起猪的免疫抑制，是猪圆环病毒相关性系统疾病(PCV2-systemicdisease,PCV2-SD)的主要病原，给养猪业带来了巨大的经济损失。文中从PCV2的进化历程、编码蛋白、对免疫系统的影响及技术防控四方面入手，对PCV2及PCV2-SD进行了全面回顾与展望。关键词:PCV2，PCV2-SD，进化历程，编码蛋白，免疫Received:March23,2015;Accepted:June1,2015Supportedby:NationalNaturalScienceFoundationofChina(Nos.30230072,31402198),KeyProjectsintheNationalScience&TechnologyPillarProgramduringtheTwelfthFive-yearPlanPeriod(No.2015BAD12B01).Correspondingauthor:JiyongZhou.Tel/Fax:+86-25-84395605;E-mail:jyzhou@njau.edu.cn国家自然科学基金项目(Nos.30230072,31402198)，“十二五”国家科技支撑计划(No.2015BAD12B01)资助。网络出版时间：2015-06-12网络出版地址：http://www.cnki.net/kcms/detail/11.1998.Q.20150612.1455.001.html 顾金燕等/猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望881Porcinecircovirustype2andPCV2-systemicdisease-areviewJinyanGu,GangXing,JingLei,FeiLiu,andJiyongZhouCollegeofVeterinaryMedicine,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095,Jiangsu,ChinaAbstract:Porcinecircovirustype2(PCV2)cancauseimmunosuppressiononherds.PCV2,asanessentialpathogenofPCV2-systemicdisease(PCV2-SD),hascausedconsiderableeconomiclossesinpigindustryworldwide.Herewereviewandaddresstheevolution,viralproteinandimmunolesionofPCV2andpreventivetechniquesofPCV2-SD.Keywords:PCV2,PCV2-SD,evolution,viralprotein,immunolesion猪圆环病毒2型(Porcinecircovirustype2，逐渐受到人们关注，并从PCV2-SD患猪中分离PCV2)是目前已知的最小的哺乳动物病毒，直到一种新的PCV，这种PCV能致病，且抗原性径为12–23nm，是猪圆环病毒相关性系统疾病和核苷酸序列与之前分离到的无致病性的PCV(PCV2-systemicdisease，PCV2-SD)的主要病存在差异，为了区分两者，将不致病的PCV命原。PCV2能损伤猪的免疫系统，以淋巴结肿大、名为PCV1，能致PCV2-SD的PCV命名为淋巴细胞减少等为特征，导致严重的免疫抑制，PCV2。2009年，德国科学家利用原位杂交和给世界养猪业带来巨大的损失。近几年疫苗的PCR技术在一份保存于1962年的猪脾和肺脏组使用使PCV2-SD得到了一定的控制[1]。[6]织中检测到了PCV2，说明PCV2可能在猪群中存在已长达50年以上，在这50多年间，PCV1PCV2的进化历程逐渐从一种对猪群无害的病毒演变为能对猪群1974年，德国学者Tischer首次描述了一种造成重大伤害的病毒。存在于猪肾细胞系PK15(ATCC-CCL33)的类PCV2主要有两种基因型：PCV2a和[2]似小核糖核酸病毒的细胞污染物。8年后，他PCV2b。两者基因组长分别为1767和1768个证明这种污染物是一种猪源的单链环状的DNA核苷酸[7]，还有一种PCV2c仅在丹麦有过报病毒，并命名为猪圆环病毒(Porcinecircovirus，道[8]。起初PCV2a的大流行导致大规模的亚临[3]PCV)。将PCV接种猪后，对猪不具有致病性。床感染与零星的发病，大约到20世纪90年代，1996年，加拿大学者首次描述了一种新的、从PCV2b逐渐成为优势毒株并导致了PCV2-SD的1991年开始偶发的猪病，该病主要侵犯5–12周大爆发，并且大多数在动物模型上成功诱导健[9]龄的猪群且涉及猪病的多个器官的损伤，称之康猪发病的基因亚型都为PCV2b。2010年，[4-5]为断奶后仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),Guo等测定了2004至2008年间分离自我国各现在国际上多称为PCV2相关性系统疾病地多株PCV2毒株的序列，并按照现行基因分[10](PCV2-SD)。随后，该病在全世界相继被报道，型原则进行分析，首次提出了PCV2d亚型。cjb@im.ac.cn 882ISSN1000-3061CN11-1998/QChinJBiotechJune25,2015Vol.31No.62011年，Jantafong等将在泰国分离到的一株新证明，其他阅读框所编码产物是否存在尚不清楚。[11]PCV2毒株命名为PCV2e，近两年，PCV2d2.1ORF1编码蛋白[12-13]和PCV2e在世界其他地区也偶见报道。但ORF1基因，亦称rep基因，是PCV2基因是Cortey等并不同意这种新的亚型命名方式，组中最大的ORF(945bp，nt51-995)，在其基因他们认为应该坚持将PCV2分为a、b、c三个启动子区存在一个干扰素刺激反应元件[14]亚型。我们实验室对在2009–2013年间从中(ISRE，nt1737-1751)，研究证明该ISRE在病国东部地区分离到的20株PCV2进行分析，发[24]毒的转录起始方面起着很重要的作用。rep基现两株PCV2虽然具有PCV2b标签序列，但在因编码两个复制必需蛋白Rep和Rep’，前者编进化分析中却组成一个独立分支，可能是一个码自rep基因的全长转录本，而后者则由rep基[15]新的基因型，并命名为PCV2new。除此之外，因剪接转录本翻译而得，虽然两者的N端是一我国还分离到一些基因缺失毒株、基因插入毒致的，但是由于Rep’剪接造成的移码，两者C株、重组毒株、类PCV毒株等圆环病毒的突变[25]端的氨基酸差异很大。[16]体。总之，不管用哪种分类方式，以上研究之前大量实验数据证明，Rep及Rep’蛋白都表明当前PCV2的变异速度加快，且临床上[26-27]主要定位于细胞核，这可能与Rep及Rep’存在多种PCV2亚型共感染，PCV2与其他多种蛋白N端存在的核定位信号相关。Rep及Rep’病毒(如猪瘟病毒、蓝耳病毒、细小病毒、伪狂蛋白的共同N端存在3个核定位信号区犬病毒等)共感染的现象，感染情况普遍且复(NLS1、2、3)，其中NLS1和NLS2是Rep及杂。另有研究发现，PCV2现已不仅在猪群中流Rep’蛋白核定位所必需的，NLS3在蛋白核转运行，在人类、牛、啮齿动物、苍蝇、蚊子、贝过程中起促进作用。但是我们实验室证实Rep类等动物种群以及水、人用疫苗、空气中也分蛋白仅在病毒感染早期定位于核质，随着时间[17-21]别检测或分离到了PCV2，为PCV2-SD的[28]推移慢慢向细胞核周围移动并进入细胞质。防控带来新的挑战。Finsterbusch等通过细菌双杂交系统发现了2PCV2编码蛋白syncoilin蛋白和转录调节蛋白c-myc与Rep蛋白互作，随后有人用酵母双杂交系统又鉴定出PCV2基因组很小，Hamel等通过软件分析了宿主细胞中能与Rep蛋白互作的锌指蛋白认为其基因组结构存在11个潜在的开放阅读框265(ZNF265)、胸腺嘧啶糖苷酶(TDG)和血管(Openreadingframe，ORF)。PCV2充分利用了生成因子VG5Q。有趣的是Rep’只能与VG5Q其在宿主细胞内形成的复制中间体及阅读框间[22]及TDG发生反应，这可能是因为Rep蛋白与相互重叠的方式传达了大量的遗传信息，其[29]ZNF265作用的位点位于两者差异很大的C端。中ORF1、5、7和10位于病毒正链DNA上并顺时针转录，而ORF2、3、4、6、8、9、11则2.2ORF2编码蛋白[23]位于病毒负链DNA上并逆时针转录，到目前位于负链的ORF2基因编码一个大小为为止，ORF1、2、3、4的编码产物已经被分别27.8kDa的衣壳蛋白Cap，Cap蛋白是PCV2的http://journals.im.ac.cn/cjbcn 顾金燕等/猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望883结构蛋白。随着Cap单体蛋白晶体结构的解析，PCV1和PCV2嵌合病毒鉴定出了由aa47-63、人们终于解开了其组装方式的神秘面纱，在这aa165-200和C末端的最后4个氨基酸共同构成[35]个模型中，60个Cap蛋白亚基即可形成了一个的至少3个构象表位。2009年，我们利用单对称的二十面体，独立构成完整的PCV2衣壳。抗及合成肽精细地定位了Cap蛋白的分子流行病学显示cap基因比其他ORF基aa156-162、aa175-192、aa195-202和aa231-233因更容易发生变异，而且cap基因的多态性与四个线性表位,其中aa231-233既是线性表位又PCV2的毒力和复制能力相关。研究发现，Cap能形成构象表位，并确认其是潜在的PCV2感[32]蛋白110位的脯氨酸变成丙氨酸(P110A)、191染的血清学标志。2011年，Guo等在Cap蛋位的精氨酸变成丝氨酸(R191S)后，PCV2在白的核定位信号区鉴定出了一个新的抗原表位[30]体外的生长能力增强但在体内的毒力衰减。aa26-36，对Cap蛋白的核定位和功能研究有重[36]有学者在比较PCV2a和PCV2b差异序列时发要意义。2013年，Ge等利用噬菌体展示技术现，Cap蛋白的190-191-206-210四个保守氨基又发现了aa86-93和aa102-107两个抗原表位。酸残基与病毒蛋白的分布模式相关，PCV2b的aa86-93是Cap蛋白中PCV2a和PCV2b两个基这4个氨基酸残基AGIE比PCV2a的SRKD更因型间差异最明显的氨基酸序列，可能是区别有利于Cap和Rep蛋白在细胞核中的定位，从PCV2两种基因型的靶标片段及特异性表位。[31]而促进了病毒的复制。我们实验室分离到的aa102-107与PCV2细胞受体硫酸乙酰肝素潜在长度为1766bp的PCV2毒株与1767bp毒株的结合位点末端序列aa98-103部分重叠，而相比，其cap基因中1059处碱基缺失，导致体PCV2是通过Cap蛋白与受体硫酸乙酰肝素和硫[32]外复制能力增强。为了解PCV2新的潜在单酸软骨素B的糖胺聚糖结合而完成入胞过程[37]核苷酸缺失可行性，本实验室选择Cap蛋白抗的，所以针对此表位的单抗可能可以影响[38]原表位外不影响ORF2内其他编码框翻译的PCV2的吸附及入胞。1376、1377、1378和1379位点的碱基进行单在PCV感染的早期，Cap蛋白定位于核仁，核苷酸缺失感染性克隆构建，结果显示，1376而后进入核质，说明Cap蛋白可在细胞不同区位点不是PCV2形成病毒粒子所必需的，但是域之间穿梭，这与只定位于核质的Rep蛋白不[26]它的缺失能增强病毒复制能力，促进IL-6的表同。在PCV2与宿主细胞相互作用的研究过[33]达，再次说明Cap蛋白与PCV2的复制能力程中，研究人员迄今发现了11个能与Cap蛋白相关。互作的宿主细胞蛋白，包括补体因子C1qB、细作为主要的免疫原性蛋白，Cap蛋白的抗原胞粘附分子P-selectin、makorin环指蛋白1表位逐渐被解析，2000年，Mahé等利用(MKRN1)、受体蛋白补充组件的球状头部C1qPEPSCAN技术鉴定出了Cap蛋白的4个线性表(gC1qR)、核小体组装蛋白1(NAP1)、前列腺凋位，分别为aa65-87、aa117-131、aa157-183和亡反应蛋白4(Par-4)、核仁磷酸蛋白1(NPM1)、[34]aa193-207；2004年，Lekcharoensuk等利用热休克蛋白40(Hsp40)、细胞骨架蛋白cjb@im.ac.cn 884ISSN1000-3061CN11-1998/QChinJBiotechJune25,2015Vol.31No.6[29,39-40]α-tubulin、热休克蛋白70(Hsp70)和我们能够诱发感染细胞更高水平的caspase-3、8、9[41]实验室最近发现的胞质动力蛋白IC1亚基。活性，提示ORF4蛋白与凋亡抑制相关，是PCV2[52]另有研究表明，Cap蛋白在体外能与Rep蛋白致病性的负调控基因。随后，Gao等用RACE[42][53]互作，甚至Cap蛋白之间也能发生互作，我技术确定了ORF4的全长mRNA为355bp，们实验室最近研究发现Rep蛋白和ORF3蛋白并验证了ORF4编码蛋白不是PCV2复制所必需具有干扰Cap蛋白诱导小鼠产生保护性免疫反的，但却在感染的早期阶段抑制病毒的复制，[43]应的能力。ORF4编码蛋白通过抑制ORF3的转录来抑制细[54]胞凋亡作用。2.3ORF3编码蛋白ORF3叠加于ORF1中，但转录方向相反。3PCV2对免疫系统的影响PCV1和PCV2的ORF3序列大小不一样，在PCV1中为621bp，在PCV2中只有315bp。2005PCV2是PCV2-SD的主要诱因，PCV2-SD年，Liu等首次通过实验证明ORF3编码蛋白是患猪的最主要特征是淋巴结损耗。研究表明，PCV2复制非必需的，但是它能通过活化淋巴结损耗会影响B细胞、T细胞和NK细[44]胞[55-57]，且PCV2-SD患猪的外周血中性粒细胞caspase-8和caspase-3通路来诱导细胞凋亡。随后的研究表明，ORF3蛋白能与pPirh2特异性和淋巴细胞的相对比例与健康猪是相反的，说[45-46]明PCV2的感染会对宿主免疫系统产生巨大的结合并导致p53聚集从而诱发细胞调亡。[47-48][58]动物试验表明ORF3与PCV2的致病性相关，影响。[49]且ORF3能提高病毒在体内外的散播。但是，PCV2很容易侵犯宿主先天免疫系统的单我们实验室构建的ORF3缺失PCV2感染性克隆核/巨噬细胞系统和树突状细胞，但是PCV2在未能在细胞上拯救出病毒，ORF3是否在PCV2巨噬细胞中复制非常缓慢，在树突状细胞中基[50]的复制中发挥作用有待进一步实验。最近，本不复制，PCV2与这些细胞共存，不被降解，Choi等研究发现在PCV2感染的早期阶段，不被递呈，也不引起细胞凋亡，极有可能PCV2ORF3蛋白能促进蛋白酶体降解RGS16并促使仅是利用这些细胞作为自己在宿主体内散播的猪上皮细胞分泌IL-6、IL-8等细胞因子，这提载体，这可能与PCV2的免疫逃避机制相示ORF3蛋白可能与PCV2引起的慢性炎症反应关[27,59]。PCV2感染巨噬细胞后虽然不会引起细[51]有关。胞凋亡，但是会降低其杀微生物的能力。除此2.4ORF4编码蛋白之外，感染PCV2的肺泡巨噬细胞会产生高水ORF4基因完全叠加在ORF3基因中，且转平TNF-α和IL-8，同时上调中性粒细胞趋化因录方向与ORF3一致，我们实验室分别从蛋白子Ⅱ、粒细胞集落刺激因子和单核细胞趋化蛋[60]和转录本水平验证了PCV2ORF4基因的转录和白1的水平。表达，其转录本为180bp，并证明ORF4不是研究表明，PCV2感染能提高宿主淋巴组织[61]PCV2在体内外复制所必需的，ORF4缺失PCV2和外周血单核细胞中IL-10的表达水平，http://journals.im.ac.cn/cjbcn 顾金燕等/猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望885IL-10能够抑制活化的T细胞产生细胞因子，抑象说明PCV2能利用天然免疫系统促进自身的制NK细胞活性，干扰NK细胞和巨噬细胞产生增殖，但同时它又破坏宿主免疫系统，影响关细胞因子。据报道病毒的持续感染或慢性感染键天然免疫细胞的功能，造成免疫抑制。PCV2会导致IL-10的高水平表达，IL-10表达水平的究竟如何导致PCV2-SD的发生？哪些因子在这提高导致IL-12等细胞因子分泌减少从而诱导个过程中起着作用？淋巴系统的损伤又是如何[62]免疫抑制，阻碍病毒清除。PCV2感染中IL-10造成的？解决这些问题并不容易，仍然需要科高水平的表达提示IL-10诱导的免疫抑制在学家们进一步探索。[63]PCV2的致病和持续性感染中扮演重要角色。4技术防控Crisci等发现在PCV2-SD患猪的脾脏中，IL-10表达上调都位于T细胞富集区，而很少位于B4.1诊断与检测技术细胞或巨噬细胞富集区，这有利于IL-10对TPCV2单独感染时常呈现亚临床感染状态，[64]细胞的调节，诱导下游免疫抑制。有趣的是，混合感染时又与其他共感染病原导致的临床症在感染PCV2的细胞中并没有检测到高水平的状及器官病变十分相似，仅依靠临床和病理学IL-10，而在感染细胞周围的细胞中IL-10的表诊断很难准确检测该病。国内外学者对PCV2[63]达水平非常高，这可能是旁分泌作用导致的。的诊断与检测技术投入了大量的研究，并取得除了IL-10以外，PCV2还能诱导IL-1β和IL-8了很大的进步，这些技术大致可以分为病原学的产生，但是对IL-2、IL-4和IFN-γ的表达具检测技术和血清学检测技术。有抑制作用，说明PCV2的感染影响了患猪的PCV2病原学检测技术主要有PCR技术、[61,65]免疫功能。原位杂交技术和核酸探针技术。PCR技术具有在PCV2感染猪体实验中，中和抗体一般快速、简便、特异性强的优点，是实验室最常[66]在接种后4周产生，中和抗体的水平与PCV2用的检测PCV2病原的方法。随着分子生物学的复制相关。Meerts等发现，在中和抗体和的发展，常规PCR和基于此的多重PCR、竞争IFN-γ水平很高的猪体中，PCV2的病毒载量很PCR、荧光定量PCR等检测PCV2的PCR检测低；而在中和抗体和IFN-γ水平很低的猪体中，技术被不断建立。1999年，Larochelle等应用建PCV2的病毒载量很高，提示中和抗体在清除宿立多重PCR方法检测了加拿大地区1994–1998[67]主病毒中起着很重要的作用。在PCV2-SD患年间的42份病料，此法成功鉴别了每份样品中[69]猪体内往往不能产生特异性中和抗体或抗体水PCV的型。2000年，Liu等建立了检测感染[68]平很低，这可能导致病毒在体内大量积聚，仔猪样品中PCV基因的竞争PCR方法，此法不总之，体液免疫受损，特别是中和抗体反应的仅能够区分PCV1和PCV2，还能确定病毒的拷[70]失能可能是导致PCV2-SD的重要原因。贝数量。Mcintosh等建立了绿色荧光实时淋巴细胞的活化是PCV2在体内增殖所必PCR方法来检测PCV2，运用该方法成功地从血需的，免疫刺激能促进PCV2的增殖，这些现清、粪便、肠系膜淋巴结、心肌层、肝脏、肾cjb@im.ac.cn 886ISSN1000-3061CN11-1998/QChinJBiotechJune25,2015Vol.31No.6[71]脏中检测出PCV2。除此之外，基于PCR技培养PCV2作为抗原，以PCV2单抗作为竞争抗术的环介导等温扩增技术(LAMP)操作简便，非体成功建立了检测PCV2抗体的竞争ELISA方常适合基层操作，我们实验室Qiu等建立的法，结果显示此法比IFA更敏感，具备大规模[80]LAMP方法能准确鉴别PCV2a和PCV2b，具有检测PCV2抗体的条件。2002年，Nawagitgul[72]很好的特异性、灵敏性和稳定性。2007年，等建立了分别基于PCV2病毒粒子和Cap蛋白Pérez-Martín等建立了检测病料中PCV2的原位为抗原的间接ELISA方法检测PCV2抗体，结[73][81]杂交方法，同年，国内姚鑫等利用原位杂交果显示两者的敏感性、特异性和准确性相似。技术分析了PCV2在人工感染仔猪主要组织中我们实验室Shang等用大肠杆菌表达的核定位的分布，此法具有良好的敏感型与特异性，可信号缺失Cap蛋白作为包被抗原建立了间接用于PCV2的实验室诊断和感染靶细胞的定ELISA方法检测PCV2抗体，研制出了我国第[74]位。核酸探针技术是一种快速、可靠、敏感一个获得国家批准生产的商品化PCV2ELISA[82]度高的检测PCV2的方法，姜永厚等结合PCR抗体检测试剂盒。除了以上这些传统的PCV2方法和DNA-DNA杂交技术建立的PCV2检测检测技术，最近Hu等应用表面等离子共振技术[83]与分型寡核苷酸芯片可以准确鉴别PCV病毒基检测液体样本中的PCV2含量的方法。Yang[75]因型，其灵敏度是凝胶电泳的5倍。肖驰等等进行了将PCV2特异性的单域抗体融合于碱[84]根据PRRSV、CSFV、PCV2的序列制成相应探性磷酸酶作为新型的检测试剂的探索。针并构建的DNA芯片具有特异性高、灵敏度高4.2免疫预防和可重复利用的优点，能够同时检测PRRSV、[76]控制病毒性疾病最好的方法是使用安全有CSFV和PCV-2感染。效的疫苗。自2004年第一个PCV2疫苗在法国血清学检测技术主要有间接免疫荧光和德国生产使用以来，商品化的圆环病毒疫苗(Indirectimmunofluorescenceassay，IFA)、免疫已在世界各地猪场广泛使用。亚单位疫苗、过氧化物酶单层细胞试验(ImmunoperoxidasePCV1-2嵌合灭活苗和PCV2灭活苗等在欧洲、monolayerassay，IPMA)、酶联免疫吸附试验北美、韩国等地区都取得了很好的防疫效果。(Enzymelinkedimmunosorbentassay，ELISA)近年来，中国政府和养殖企业对PCV2-SD逐渐和胶体金诊断方法等。1998年，Allan等建立了IFA方法用于PCV2感染猪的检测[77]。1998年，关注，我国浙江大学、华中农业大学、南京农Ellis等建立了用于检测PCV2感染猪的IPMA业大学、哈尔滨兽医研究所等单位已成功开发方法[78]。2007年，刘长明等建立了用于检测出5种全病毒灭活疫苗，这些疫苗为控制我国PCV2血清抗体的IPMA[79]。ELISA检测方法具的PCV2-SD作出了重要贡献。与此同时，基于有快速、简单、敏感性高、特异性强又易于标大肠杆菌、杆状病毒、伪狂犬病毒及腺病毒等准的优点，为最常用的血清学检测技术，用于载体的PCV2疫苗研究都取得了重要进展。Yin检测抗体的ELISA有间接ELISA、竞争ELISA等在大肠杆菌表达系统获得了Cap蛋白组装的[85-86]和阻断ELISA3种。2000年，Walker等用细胞病毒样颗粒；Fan等在昆虫细胞中获得了http://journals.im.ac.cn/cjbcn 顾金燕等/猪圆环病毒2型与猪圆环病毒相关性系统疾病的回顾及展望887Cap蛋白组装的病毒样颗粒，动物实验证明其能infectionandassociatedentitiesinNorthernGermany.[87-88]VetMicrobiol,2009,138(1/2):27–33.在小鼠体内诱导产生较好的免疫反应。最[7]CheungAK,LagerKM,KohutyukOI,etal.Detection新研究显示将poIFN-γ与cap基因在杆状病毒载oftwoporcinecircovirustype2genotypicgroupsin体串联表达也能诱导小鼠体产生良好的免疫保UnitedStatesswineherds.ArchVirol,2007,152(5):1035–1044.[89]护作用。最近，武汉中博股份有限公司利用[8]SegalesJ,OlveraA,Grau-RomaL,etal.PCV-2杆状病毒载体研发的PCV2灭活疫苗取得了国genotypedefinitionandnomenclature.VetRec,2008,162(26):867–868.家新兽药证书。除此以外，以伪狂犬病毒、腺[9]TomásA,FernandesLT,ValeroO,etal.A病毒为载体的PCV2疫苗试验也在不同的实验meta-analysisonexperimentalinfectionswithporcine[90-94]circovirustype2(PCV2).VetMicrobiol,2008,室进行，这些研究为PCV2基因工程疫苗132(3/4):260–273.的发展奠定了基础。[10]GuoLJ,LuYH,WeiYW,etal.Porcinecircovirustype2(PCV2):geneticvariationandnewlyemerging总之，虽然使用疫苗使PCV2-SD得到了一genotypesinChina.VirolJ,2010,7:273.定程度的遏制，但由于PCV2许多基本特性和[11]JantafongT,BoonsoongnernA,PoolpermP,etal.致病机理不清，加上临床上PCV2变异速度的Geneticcharacterizationofporcinecircovirustype2inpigletsfromPMWS-affectedand-negativefarmsin加快、共感染问题愈加严重，未来PCV2-SD的Thailand.VirolJ,2011,8:88.防控面临着极大的挑战，因此，PCV2感染的研[12]ToplakI,LazićS,LupulovićD,etal.Studyofthegeneticvariabilityofporcinecircovirustype2究与PCV2-SD新型控制技术的开发任重道远。detectedinserbiaandslovenia.ActaVetHung,2012,60(3):409–420.REFERENCES[13]ZhaiSL,ChenSN,WeiZZ,etal.Co-existenceofmultiplestrainsofporcinecircovirustype2inthe[1]BeachNM,MengXJ.EfficacyandfutureprospectsofsamepigfromChina.VirolJ,2011,8:517.commerciallyavailableandexperimentalvaccines[14]CorteyM,OlveraA,Grau-RomaL,etal.Furtheragainstporcinecircovirustype2(PCV2).VirusRes,commentsonporcinecircovirustype2(PCV2)2012,164(1/2):33–42.genotypedefinitionandnomenclature.VetMicrobiol,[2]TischerI,RaschR,TochtermannG.Characterization2011,149(3/4):522–523.ofpapovavirus-andpicornavirus-likeparticlesin[15]QiuXH,LvP,XingG,etal.Molecularepidemiologypermanentpigkidneycelllines.ZentralblBakteriolofPCV2ineasternchinafrom2009toOrigA,1974,226(2):153–167.2013//LivestockEpidemiologyBranchofChina[3]TischerI,GelderblomH,VettermannW,etal.AveryAnimalHusbandryandVeterinaryInstitute.Beijing:smallporcineviruswithcircularsingle-strandedChineseAssociationofAnimalScienceandDNA.Nature,1982,295(5844):64–66.VeterinaryMedicine,2013(inChinese).[4]HardingJCS,ClarkEG.Recognizinganddiagnosing邱小伙,吕朋,邢刚,等.中国东部PCV2分子流行postweaningmultisystemicwastingsyndrome病学调查2009–2013//动物生态养殖、疫病防控、食(PMWS).SwineHealthProd,1997,5:201–203.品安全与人类健康——中国畜牧兽医学会家畜传染[5]HardingJCS,ClarkEG,StrokappeJH,etal.病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术Postweaningmultisystemicwastingsyndrome:研讨会论文集.北京:中国畜牧兽医学会.epidemiologyandclinicalpresentation.SwineHealth[16]ZhaiSL,ChenSN,XuZH,etal.PorcinecircovirusProd,1998,6:249–254.type2inChina:anupdateonandinsightstoits[6]JacobsenB,KruegerL,SeeligerF,etal.Retrospectiveprevalenceandcontrol.VirolJ,2014,11:88.studyontheoccurrenceofporcinecircovirus2[17]ZhaiSL,ChenRA,ChenSN,etal.Firstmolecularcjb@im.ac.cn 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