t-dna标签技术及其在水稻基因克隆中的应用

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1、T-DNA标签技术及其在水稻基因克隆中的应用维普资讯一22一江苏农业科学2007年第5期T―DNA标签技术及其在水稻基因克隆中的应用马玉银，潘存红，左示敏，张亚芳，陈宗祥，潘学彪1．扬州大学／教育部植物功能基因组学重点实验室／江苏省作物遗传生理重点实验室，江苏扬州2250092．扬州教育学院，江苏扬州225002摘要：T―DNA标签技术是一种高通量的分离和克隆植物功能基因的方法。本文介绍了T―DNA标签方法的基本原理和操作步骤，概述了该法的优缺点和在水稻基因克隆研究中的应用。关键词：T―DNA；水稻；基因克隆中图分类号：$511．035．3文献标

2、识码：A文章编号：1002―1302200705―0022―05水稻基因组在禾本科植物中最小，约为3891T―DNA标签法的概述Mb，已经绘制出精细的遗传图谱和物理图谱，1996年被确定为禾谷类作物的模式植物。随着水稻全基T―DNATransferDNA是位于根癌农杆菌因组测序工作的完成¨J，挖掘新基因和认识基因AgrobacteriumtumefaciensTitumorinducing质粒的功能成为功能基因组学研究的最为紧迫的任务。上的一段DNA，它可以从农杆菌中被转移并稳定整利用T―DNA-61插入突变的方式开展突变体库构合到植物核基因组中

3、。一般而言，改造的T―DNA建和功能基因组研究，在拟南芥Arabidopsis等植载体被除去了致瘤基因，使农杆菌失去了原致病作物上已经取得了巨大的成绩。在水稻上，T―DNA用。T―DNA具备以下优点：可装载大到50kb的外标签法也正在成为功能基因研究的重要方法。源DNA；能完整和高频地进行转移；其整合不引起植物基因组大的重排；不需要植物染色体提供特异序列，可随机地整合且在表达活跃区域的整合几收稿日期：2007―03～20率较高；对特定的基因类别没有明显的插入偏向基金项目：国家重大科技专项“功能基因组和生物芯片”项目。性J，因此，在植物基因工程和基

4、因克隆中被广泛作者简介：马玉银1963一，男，江苏靖江人，博士研究生，副教授研究方向为水稻遗传育种。Tel：051487972136；E―mail引用。这里介绍用T―DNA作为标签，快速克隆功shuidao@yzu．edu．cn。能基因的基本方法。T―DNA标签法可以定义为：以人工构建好的上接第21页[19]吴殿星，舒庆尧，夏英武．RVA分析辅助选择食用优质早籼稻[13]孙艳丽，沈鹏，金正勋，等．氮素营养对稻米理化特性及淀粉的研究[J]．作物学报，2001，272：165―172．谱特性的影响[Jj．东北农业大学学报，2002，332：134―[

5、2O]隋炯明，李欣，严松，等．稻米淀粉RVA谱特征与品质性状138．相关性研究[J]．中国农业科学，2005，384：657―663．[14]金军，徐大勇，蔡一霞，等．施氮量对水稻主要米质性状及[21]OkamotoM．PasteviscosityoffleevarietiesinrelationtonitrogenRVA谱特征参数的影响[J]．作物学报，2004，302：154一contentsandM／Koftheirbrownrice[J]．JapanJBreed，1992，42：595―603．l58．[15]万靓军，霍中洋，龚振恺，等．

6、氮肥运筹对杂交稻主要品质性状[22]LimSJ，KimDU，SohnJK．Varietalvariationofamylogramprop―及淀粉RVA谱特征的影响[J]．作物学报，2006，3210：1491ertiesanditsrelationshipwithothereatingqualitycharacteristicsin―1497．rice『J1．KoreanJBreed，1995，273：268―273．[16]叶全宝，张洪程，李华，等．施氮水平和栽插密度对粳稻淀粉[23]吴殿星，舒庆尧，夏英武．胚乳外观标记与RVA谱理化指标相R

7、VA谱特性的影响[J]．作物学报，2005，311：124―130．结合辅助改良早籼稻食用品质[J]．中国水稻科学，2002，16[17]邹江石，吕川根，王才林，等．两系杂交稻“两优培九”的选育及1：80―82．[24]程方民，钟连进，舒庆尧，等．早籼水稻垩白部位淀粉的蒸煮食其栽培特性[J]．中国农业科学，2003，368：869―872．[18]舒庆尧，吴殿星，夏英武，等．稻米淀粉RVA谱特征与食用品质味品质特征[J]．作物学报，2002，283：363―368．的关系[J]．中国农业科学，1998，313：25―29．维普资讯马玉银等：T―D

8、NA标签技术及其在水稻基因克隆中的应用一23一T―DNA作为标签，通过农杆菌转化植物，构建突变变株的分离比为3：1；表型正常的T代阴性株