snt 2799-2011 进出口蜂王浆中磺胺类药物残留量测定方法 放射受体分析法

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1、中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２７９９—２０１１进出口蜂王浆中磺胺类药物残留量测定方法放射受体分析法犇犲狋犲狉犿犻狀犪狋犻狅狀狅犳狊狌犾犳狅狀犪犿犻犱犲狊狉犲狊犻犱狌犲狊犻狀狉狅狔犪犾犼犲犾犾狔犳狅狉犻犿狆狅狉狋犪狀犱犲狓狆狅狉狋—犚犪犱犻狅狉犲犮犲狆狋狅狉犪狊狊犪狔犿犲狋犺狅犱２０１１０２２５发布２０１１０７０１实施中华人民共和国发布国家质量监督检验检疫总局犛犖／犜２７９９—２０１１前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。本标准主要

2、起草人：张晓峰、陈笑梅、施伟良、朱振江、帅江兵。Ⅰ犛犖／犜２７９９—２０１１进出口蜂王浆中磺胺类药物残留量测定方法放射受体分析法１范围本标准规定了蜂王浆磺胺类药物残留的放射受体分析（ＣｈａｒｍⅡ）方法。本标准适用于蜂王浆中磺胺甲基嘧啶、磺胺二甲基嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺对二甲氧嘧啶、磺胺邻二甲氧嘧啶、磺胺喹啉、磺胺噻唑、磺胺吡啶、磺胺异唑、磺胺二甲基异唑、磺胺嘧啶、磺胺甲氧哒嗪、磺胺氯哒嗪、磺胺苯吡唑和磺胺甲噻二唑等磺胺类药物残留总量的测定。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引

3、用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法３方法提要放射受体分析（ＣｈａｒｍⅡ）方法的基础是药物功能团与微生物受体位点的结合反应，这些位点与某一类药物的共有功能团相关。应用受体的这种特异性可以实现对某一类药物的多残留分析。本方法中，样品中残留的磺胺类药物经提取、稀释后与［３Ｈ］标记的药物共同竞争结合特异的受体位点。在一定温度下反应后，离心分离，清除未结合的磺胺类药物，最后加入闪烁液，测定［３Ｈ］衰变发出的β粒子放射性量值，计数ｃｐｍ（ｃｏｕｎｔｐｅｒｍｉｎｕｔｅ），测得的ｃｐｍ值与样品中磺胺类药物残留量成反比。４试

4、剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为ＧＢ／Ｔ６６８２规定的一级水。１）。４．１磺胺类检测试剂盒４．１．１组织阴性对照浓缩干粉：组织阴性对照浓缩干粉贮存于２℃～６℃。４．１．２ＭＳＵ多抗标准品浓缩干粉：浓缩干粉贮存于２℃～６℃。４．１．３组织萃取缓冲溶液（ＭＳＵ萃取缓冲溶液）干粉：贮存于２℃～６℃。４．１．４Ｍ２缓冲溶液干粉：用于调节ｐＨ值，贮存于２℃～６℃。４．１．５磺胺类受体药片：白色，－１５℃以下的条件保存。４．１．６磺胺类氚标记药片：粉红色，－１５℃以下的条件保存。４．２组织阴性对照溶液：使用时取组织阴性对照浓缩干粉（４．１．１）按试剂盒说明书配制成阴

5、性对照溶液。配制好的溶液可在２℃～６℃冰箱或冰浴中保存４８ｈ。如长时间不用，可将溶液保存于－１５℃以下的冰箱中，使用时将其解冻。再解冻的溶液在２℃～６℃温度下可保存２４ｈ。１）给出该信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对某一产品的认可。如果其他产品具有相同的效果，需经实验评估后使用这些等效产品。１犛犖／犜２７９９—２０１１４．３ＭＳＵ多抗标准溶液：使用时取浓缩干粉（４．１．２）按试剂盒说明书配制成多抗生素标准溶液。溶液的保存方法同４．２。多抗标准品中含磺胺二甲嘧啶１０００ｎｇ／ｍＬ。４．４组织萃取缓冲溶液（ＭＳＵ萃取缓冲溶液）：使用时取浓缩干粉（４．１．３）按试剂盒

6、说明书配制成组织萃取缓冲液。可在２℃～６℃下保存２个月。４．５Ｍ２缓冲溶液：使用时取浓缩干粉（４．１．４）按试剂盒说明书配制成Ｍ２缓冲液。可在２℃～６℃下保存２个月。Ｒ闪烁液。４．６Ｏｐｔｉｆｌｕｏｒ４．７阴性对照液：取２ｍＬ组织阴性对照溶液（４．２），加至６ｍＬ组织萃取缓冲溶液（４．４）中制成阴性对照液，在室温下混匀，该对照液可在室温下保持６ｈ以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。４．８阳性对照液：取０．３ｍＬ多抗生素标准溶液（４．３），加至１５ｍＬ组织阴性对照溶液中（４．２），混匀；然后从中取２ｍＬ混合溶液加入到６ｍＬＭＳＵ萃取缓冲溶液（４．４）中制成阳性对照

7、液（磺胺二甲嘧啶浓度１．２５ｎｇ／ｍＬ）；在室温下混合均匀。该对照液可在室温下保持６ｈ以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。４．９１ｍｏｌ／Ｌ盐酸：取８３ｍＬ分析纯浓盐酸加蒸馏水定容至１０００ｍＬ。４．１０３０％氢氧化钠溶液：称取３０ｇ氢氧化钠溶于水中，定容至１００ｍＬ。４．１１甲醇：分析纯。４．１２ｐＨ试纸：范围５～１０。４．１３Ｃ１８固相萃取柱：３ｍＬ、６０ｍｇ。４．１４空白基样：选取确认不含有磺胺类药物的蜂王浆，作为空白基样，用于测定当次批次试剂盒的控制点使用。５仪器５．１ＣｈａｒｍⅡ７６００分析仪或相当者。５．２孵育器。５．３高速冷冻离心