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1、分光光度法测定市售孜然粉中总黄酮含量(1.新疆医科大学中医学院实验中心;2.新疆医科大学第四附属中医医院药剂科,新疆,乌鲁木齐,830000)【摘要】用分光光度法测定了市售孜然粉中的黄酮类成分,并对其结果进行了分析从而对本品质量进行控制。结果表明,采用分光光度法测定孜然粉中黄酮类成分含量,在波长为510±2nm时,浓度与吸光度呈良好线性关系;该法简便易行、快速准确,可作为市售孜然粉中的黄酮类成分含量的测定。【关键词】分光光度法;孜然;总黄酮【中图分类号】R285.5【文献标识码】A【文章编号】1007-8517(2009
2、)02-0001-01DeterminationofTotalFlavonoidsinCuminpowderbySpectrometricMethod�LIUHongbing��1WUHaodong��2(XinjiangMedicalUniversity,Urumqi,Xinjiang,830000)�【Abstract】Cuminpowderweredeterminedbyspectrophotometryandthequalitycanbecontroled.Theultravioletwavelengthwasa
3、t5102nm,therewasalinearrelationshipbetweenconcentrationand5absorbance.Themethodissimple,quickandaccurateforthedeterminationoftheflavonoidsintheCuminpowder.【Keywords】spectrophotometry;CuminumcyminumL;totalflavonoids孜然(CuminumcyminumL.)为伞形科一年生本草植物,英文名Cumin,中文音译名称为枯
4、茗,又名孜然芹、野茴香、安息茴香等[1]。原产于地中海、中东地区以及印度、前苏联等地,中国盛产于新疆、甘肃。孜然的成熟干燥果实呈黄褐色、扁平弧形,有强烈芳香。适宜肉类烹调,理气开胃,并可驱风止痛。同时也是新疆维吾尔族的重要民族药[1~3]。近年研究表明孜然种子中含有黄酮类成分[4]。本文采用分光光度法在510nm处测定市售孜然中总黄酮的含量。本法灵敏度高,操作简便,结果可靠。1材料与试剂1.1仪器与试剂甲醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、石油醚(沸点30~60℃)均为分析纯,芦丁对照品(中国药品生物制品检定所)。BS110
5、S分析天平天平(德国Sartorius公司),Spectrumlab54紫外分光光度计(上海棱光技术有限公司),CS101型电热鼓风干燥箱(重庆实验设备厂)。51.2样品来源及处理市售孜然(王守义孜然粉不同批号)购自新疆乌鲁木齐好家乡超市。市售孜然粉过40目称取30g加100ml石油醚,用索氏提取器脱脂6h挥干,待用。2方法2.1标准溶液的配制精密称取120℃干燥恒重的芦丁对照品20mg,置100ml容量瓶中,用95%乙醇50ml使溶解,定溶于100ml量瓶中,然后加50%乙醇稀释至刻度,配成0.2mg/ml的芦丁标准溶
6、液。2.2供试品溶液制备精密称取80℃恒温干燥的脱脂孜然粉末1.001g。分别置索氏提取器中,加入75%乙醇80ml,回流提取1.5h。将提取液定量转移至100ml容量瓶中,补加蒸馏水至刻度,摇匀,作为供试品溶液。2.3标准曲线绘制精密量取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml,分别置于10ml容量瓶中,各加50%乙醇溶液使成5ml,精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml,摇匀,放置6分钟,加入10%硝酸铝溶液0.3ml,摇匀,再放置6分钟,加入1%氢氧化钠溶液4ml,分别用50%乙醇稀释至刻度,摇匀,
7、放置15分钟。以第一瓶作空白,用紫外分光光度计在510nm处测其吸收度,作A-C标准曲线,求得回归方程:Y=1.9071X+0.0435,R=0.9997。2.4精密度试验精密吸取对照品溶液5ml,共6份,分别置于25ml容量瓶中,按上述方法操作,分别测定吸收度。结果RSD=1.48%,表明本方法精密度良好。52.5稳定性试验精密吸取供试品(批号20061226)溶液2ml,按测定波长选择方法操作,分别于显色10,20,30,40,50,60min时在510nm波长处测定吸收度。结果表明显色后60min内吸收度基本稳定。
8、2.6回收率的测定精密称取脱脂孜然样品(批号20061226)0.5g共6份,分别精密加入对照品(0.2mg/ml)储备液5.0ml.按2.3项下操作测定吸光度数据见表2。3结果与分析3.1样品含量测定精密吸取三个不同批号待测样品2.0ml置于25ml量瓶中照2.3项下操作,连续测五次取平均值计算,代入回归方程计算市