绵羊胚胎移植技术规程

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1、ICS65.020.30B40NY中华人民共和国农业行业标准NY/T826－2004绵羊胚胎移植技术规程Regulationforsheepembryotranstfer中华人民共和国农业部发布ICS65.020.30B40NY中华人民共和国农业行业标准NY/T826－20042004-08-25发布2004-09-01实施中华人民共和国农业部发布ICS65.020.30B40NY中华人民共和国农业行业标准NY/T826－2004前言本标准的附录A、附录B、附录C、附录D为规范性附录。本标准由国家农业部农垦局提出并归口。本标准起草单位：新疆农垦科学院

2、畜牧兽医所。本标准主要起草人：石国庆、杨永林、倪建宏、皮文辉、陈静波、周平、万鹏程。中华人民共和国农业部发布NY/T826－2004绵羊胚胎移植核技术规程1范围本标准规定了绵羊胚胎移植技术操作的基本原则、要求和方法。本标准适用于绵羊胚胎移植技术推广应用的规范化操作。山羊胚胎移植操作也可参照本规程。2术语和定义下列术语和定义适用于本标准。2．1卵ovum母畜在性成熟时卵巢所排出的具有繁殖能力的细胞。2．2胚胎embryo卵经精子授精后称之为胚胎。2．3超数排卵superovlation指在母畜发情周期的适当时间，注射外源促性腺激素，使卵巢中比在自然情况

3、下，在较多的卵泡发育并排卵的一项技术。3术语和定义3．1供体羊的选择a)供体羊应符合品种标准；b)供体羊健康、无疾病且繁殖机能正常。3．2超数排卯时间a)应在每年绵羊最佳繁殖季节进行；b)在自然发情或诱导发情的第12d～13d进行。3．3超数排卵处理3．3．1促卵泡素(FSH)递减处理法在自然发情或诱导发情的12d～13d开始肌肉注射FSH，早、晚各一次，间隔12h，分3d递减注射(表1)。使用国产FSH总剂量为200IU～：300IU。山羊的超数排卵可在发情周期的第17天开始，国产促卵泡素用150IU～250IU，或用PMSG1OOO～2OOOIU

4、，其他操作与绵羊相同。表1超数排卵方法示意图时间：dod13d14d15d0d2d～3d7d发情FSHFSHFSH发情输卵管采卵子宫采卵剂量：IV75×250×225×2人工输精每日2次每日2次每日2次14NY/T826－20043．3．2孕马血清促性腺激素(IDMSG)和抗孕马血清促性腺激素(aPMSG)处理法在自然发情或诱导发情的第12d～13d，一次肌肉注射PMSG1500IU～2500IU，发情后18h～24h肌肉注射等量的aPMSG。3．4人工授精动物母畜均表现发情，于当日上、下午各人工授精一次，因母畜为超排处理，有多个卵子排出，因而需加大

5、输精量，用原精的0．2mL(含4亿个精子)做，直至发情结束。4胚胎采集4．1采卵时间以发情日为0d，在6d～7．5d或2d～3d内用手术法分别从子宫和输卵管回收胚胎。4．2手术室设置及要求采卵及胚胎移植需在专门的手术室内进行。4．3器械、冲卯液等物品的准备4．3．1手术用的金属器械放在含0．5％亚硫酸钠(作为防诱剂)的0．1％新洁尔灭液中浸泡30min或在来苏儿液中浸泡1h。4．3．2玻璃器皿、敷料和创巾等物品消毒按此规程附录B执行。4．3．3经灭菌的冲卵液置于37℃水浴加温，玻璃器皿置于38℃培养箱内待用。4．3．4麻醉药、消毒药和抗生素等药物，以

6、及酒精棉、碘酒棉等物品备齐。4．4供体羊准备供体羊手术前应禁食24h～48h，可供给适量饮水。4．4．1供体羊的保定和麻醉供体羊仰卧在手术架上，固定四肢。肌肉注射2％静松灵0．5mL，局部用0．5％盐酸普鲁卡因麻醉。4．4．2手术部位及其消毒手术部位一般选择乳房前腹中线部(在两条乳静脉之间)或后肢股内侧腹股沟部。剪毛消毒。4．5术者的准备术者需穿无菌手术服，戴工作帽和口罩，手臂要消毒4．6手术操作的基本要求手术操作要求细心、谨慎、熟练。4．6．1手术分离4．6．1．1做切口注意要点：避开较大血管和神经。4．6．1．2切开皮肤。4．6．1．3切开皮下组

7、织。4．6．1．4切开肌肉。4．6．1．5切开腹膜。4．6．2止血4．6．2．1毛细管止血。4．6．2．2小血管止血。4．6．2．3较大血管止血。4．7采卵方法14NY/T826－20044．7．1输卵管法供体羊发情后2d～3d采卵，用输卵管法。将冲卵管一端由输卵管伞部的喇叭口插人，约2cm～3cm深(打活结或用钝圆的夹子固定)，另一端接集卵皿。用注射器吸取37℃的冲卵液5mL～10mL，在子宫角靠近输卵管的部位，将针头朝输卵管方向扎入，一人操作，一只手的手指在针头方向后捏紧子宫角，另一只手推注射器，冲卵液由宫管结合部流入输卵管，经输卵管流至集卵皿。

8、4．7．2子宫法供体羊发情后6d～7．5d采卵用这种方法。术者将子宫暴露于创口表面后，用套有胶管的肠钳夹在子