外周血细胞形态学检验及诊断技巧

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1、外周血细胞形态学检验及诊断技巧主讲：卫生部北京医院郑天林录制：卫星卫生科技教育网监制：卫生部科教司一.概述（一）血细胞形态学基本概念（二）血细胞形态学检查方法（三）血液学及血细胞形态学临床应用（四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题二．血细胞染色法（一）细胞染色机理（二）瑞氏染色（三）姬姆萨染色（四）瑞氏-姬姆萨染色液鉴定（五）瑞氏-姬姆萨混合染色三．形态学与血液检查与自身特性（一）血常规（二）白细胞分类（三）骨髓外周血细胞形态学及分类（四）血细胞涂片特性四．血细胞形态学采样、制片与检查

2、程序（一）采样、制片、染色工序至关重要（二）染色五．外周血细胞形态学检验技巧（一）WBC形态学（二）红细胞形态学（三）出现有核（内/巨幼）红/幼粒细胞意义（四）血小板巨核细胞六．外周血细胞形态学检查步骤、注意事项及检查报告书写内容（一）注意事项（二）外周血涂片检查步骤（三）外周血涂片报告内容一、概述（一）．血细胞形态学基本概念（二）血细胞形态学检查方法（三）血液学及血细胞形态学临床应用（四）临床/形态学诊断与血液学检验及专业人员素质问题一．概述血细胞形态学是血液病基础诊断与血液学检验的重要项目●正常

3、人的血液及造血器官中，各种血细胞的数量有一定的正常范围，不同血细胞及细胞发育的不同阶段有一定形态结构特点。●观察血细胞形态和数量及其比例的变化来研究造血器官的结构和功能是血液学的重要组成部分，是诊断造血系统疾病最基本、被临床普遍应用的最简便实用的检查方法。●在造血系统疾病发生造血功能紊乱，引起血细胞形态学的量和质的改变。在临床各科某些原发性疾病患者出现继发性血液学形态学的病理改变，籍以了解患者机体状况如感染（细菌、病毒、寄生虫、药物）等反应。●血细胞形态学检查是为临产提供诊断依据，应备有患者的临床表

4、现基础检查初步诊断的病历摘要，才能进行形态学检查。必要时还要做骨髓活检（切片、活检材料滚片、活检穿刺针残液图片）细胞化学染色,免疫学表型等检查的必备程序。●血细胞形态学检查应包括外周血和骨髓两部分组成，必须平行进行检查。外周血细胞改变往往反映骨髓病变的重要信息，有利于诊断。●疑似血液病和血液学检查异常情况不能只依赖使用分析仪做血常规检查而废弃镜下血涂片细胞形态学检查的错误倾向。二）细胞形态学检查方法1．光镜细胞形态学；细胞形态学的基本内容和常用的检查方法，广泛用于临床方法。2．细胞化学染色：是细胞和

5、化学两者相结合的形态学方法，保持细胞完整组织结构显示化学结构成分-定性/半定量，主要用于白血病分型鉴别诊断3．相差镜检查：用于观察活细胞的内部结构及活动，细胞生长成熟衰亡过程及对各种刺激的反应4．荧光显微镜检查用荧光染色血细胞，常用于DNA、RNA的检查。近年来由于流式细胞仪的应用而逐渐被替代。5．电镜（透射/扫描）观察细胞超微结构改变了不少光镜细胞结构概念，在形态学上是对光镜的一个重要扩展和补充。6．骨髓组织病理学检查是对骨髓涂片检查的一个重要补充，相互补遗提高诊断水平。（三）血液学及血细胞形态学

6、临床应用：●是临床血液病诊断与治疗及临床医学检验学的基础工作。●血细胞形态学适用于临床血液病诊断的基础诊断快速简捷的要求。●近年来由于血细胞学及超微结构、细胞化学、造血干细胞及其细胞因子、骨髓造血微环境、基质细胞、树突状细胞、淋巴系细胞发生及其疾病表现，细胞增殖动力学与细胞凋亡以及骨髓组织病理学免疫学、细胞遗传学、融合基因、分子生物学的血液分析仪、流式细胞仪的应用，推动了血液病与血液学的新知识迅猛发展。●当前血液病不能单凭临床与形态学作出诊断，必须以临床和血细胞形态学为基础，将免疫学、细胞遗传学及分

7、子生物学新知识、新技术应用到血液学中，构成现代临床血液学与分子生物学诊断技术，弥补形态学的经验性与主观性带来负面缺陷，才能提高血液病的诊断与治疗水平达到WHO新分类的分子生物学水平。进入90年代以来，国内外采用多学科联合技术综合诊断技术与方案：○FAB-AL（1976）、NCL（美国国家癌症研究所1990）对FAB-AL分型的补充建议、AL-MIC分（类）型及MICM分型（1985-1990）；○FAB-CL分型（1989）、中国CL分型（1997）；○FAB-MDS分型（1982）、MIC协作组对

8、FAB-MDS分型提出补充建议（1987）；○WHO对造血系统及髓系恶性疾病和淋巴系恶性肿瘤WHO分类（2000）血细胞形态学诊断技术正在进入显微图象软件时期：○创造出许多多功能软件，如血细胞形态学、细胞化学染色、血液病诊断与鉴别诊断、CL诊断与治疗及教学系统多媒体软件等。○将显微镜与微机相连，应用储存、分类、检索软件，编辑、打印诊断报告，并可附多幅细胞图象。（四）临床-形态学诊断与血液学检验及专业人员素质●普遍存在临床与实验室知识面分离现象：○临床医师缺乏实验室知识