氯化三乙基锡对体外培养大鼠c6脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响论文

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1、氯化三乙基锡对体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响论文【摘要】目的探讨氯化三乙基锡(TETC)对体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT法检测0.5，1.0和2.0μmol/LTETC对体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞作用24h和48h后细胞增殖的影响、HE染色细胞形态学观察0.5，1.0和2.0μmol/LTETC对体外培养大鼠C6脑胶质瘤细胞作用48h后细胞增殖和形态学变化。采用透射电镜观察0.5，1.0和2.0μmol/LTETC作用C6细胞48h后的超微形态学变化

2、。采用荧光原位末端标记方法检测细胞凋亡。结果MTT法及HE染色细胞形态学观察均显示0.5，1.0和2.0μmol/LTETC在体外均可抑制C6细胞增殖，C6细胞增殖率存在着剂量依赖性和时间依赖性降低趋势;HE染色和透射电镜可观察到C6细胞凋亡的形态学变化。荧光原位末端标记方法检测到细胞凋亡率存在剂量依赖性上升趋势。结论TETC可抑制体外培养大鼠C6胶质瘤细胞增殖，其机制可能主要与C6细胞凋亡有关。【关键词】三乙基锡化合物;MTT法;C6脑胶质瘤;增殖;凋亡【Abstract】ObjectiveT

3、ostudytheeffectsoftriethyltinchloride(TETC)ontheproliferationandapoptosisofculturedratC6gliomacells.MethodsMTTassayedtoevaluatetheeffectsof0.5,1.0and2.0μmol/LTETContheproliferationofratC6gliomacellsfor24and48h.HEstainingandelectronmicroscopeployedres

4、pectivelyfordeterminingtheproliferationeffectanddetectingtheapoptosisofC6gliomacellstreatedby0.5,1.0and2.0μmol/LTETCfor48h.FluorescentTUNELassayeasurethepercentageofapoptosisinC6gliomacellstreatedby0.5,1.0and2.0μmol/LTETCfor48h.Results0.5,1.0and2.0μm

5、ol/LTETCcouldinhibittheproliferationofculturedC6gliomacellsinvitroperformedbybothMTTassayandHEstaining,andtheproliferationrateedependentmanner.ApoptoticchangesacellsstainedicroscopeorinpartofTETCtreatedC6gliomacellsobservedbyelectronmicroscope.Theap

6、optosisrate,measuredbyfluorescentTUNELassay,annerinTETCtreatedC6gliomacells.ConclusionsTETCinhibitstheproliferationofC6gliomacellsinvitro,themechanismofaybemainlyinvolvedinapoptosisofC6gliomacells.【Keya;Proliferation;Apoptosis寻找易透过血脑屏障且有效的抗胶质瘤药物是亟待解决

7、的问题。氯化三乙基锡(TETC)是中枢神经系统毒物，具有脂溶性.freela)，二甲基亚砜DMSO(Sigma)，IMDM细胞培养基(Gibco)，胎牛血清(中国医学科学院生物工程研究所)ApoAlertTMDNAFragmentation检测试剂盒(BDbioscience)。1.2方法1.2.1细胞培养C6胶质瘤细胞株(购自上海细胞所)，为贴壁细胞。C6胶质瘤细胞在含有10%胎牛血清的IMDM培养基中，置于37℃，5%CO2培养箱培养。用0.25%胰酶(PBS配)消化传代，传代浓度为5×10

8、5/ml，传至3代后用于实验。1.2.2MTT比色法测定TETC对C6细胞增殖的影响将细胞以每孔1×104个细胞铺96孔培养板，细胞贴壁后12h弃去培养液，分组加入含不同终浓度TETC并含10%胎牛血清的IMDM培养液，TETC终浓度分为0(生理盐水对照组)，0.5，1.0及2.0μmol/L(实验组)，对照组设在第一孔，每一浓度设4个平行孔，每孔100μl培养液。加药后送回培养箱。培养24h、48h后，每孔加入MTT(5g/L)20μl,继续培养4h后，弃去培养液，每孔加入DMSO150μl，