婴儿肝炎综合征的病毒病因学分析论文

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1、婴儿肝炎综合征的病毒病因学分析论文孙雪荣纪静宋宝刚罗兵【摘要】目的探讨婴儿肝炎综合征（IHS）的病毒病因学及其临床特点。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA），检测47例IHS病儿血清肝炎病毒系列指标（包括抗HAV抗体，抗HCV抗体和乙型肝炎五项）以及HSVIgM、HCMVIgM和EBVVCAIgM；留取晨尿标本用于CMV基因定量检测；PCRSouthern检测病儿外周血和咽分泌物EBVDNA。结果47例IHS病儿HCMVDNA阳性率为68.1%（32/47），HCMVIgM阳性率为44.7%（21/47）；血标本EBVDNA阳性率为19.1%（9/47），咽分泌物EB

2、VDNA阳性率为34.0%（16/47）；EBVVCAIgM阳性率为14.9%（7/47）；HBsAg阳性1例，HBsAg和HBeAg阳性1例，感染率为4.3%；HSVIgM、抗HAV、抗HCV检测均为阴性。47例中治愈18例，好转25例.freele(HIS).MethodsAntiHAVIgM,antiHCVIgM,antiHBVIgM,HCMVIgMandEBVVCAIgMelinkedimmunosorbentassay(ELISA)in47infantsorningurinesamplespleproved,tainreasonofIHS,andEBV

3、infectionhasintimatecorrelationanmeaslesvirushavenoobviousconnectione;Cytomegalovirus;Herpesvirus4,Human;HepatitisBvirus婴儿肝炎综合征（IHS）是一组由多种病因引起的病理及临床表现基本相似的临床症候群，其临床主要表现为婴儿黄疸、肝脾大及肝功能异常，以肝内病变为主，多数病儿经积极治疗后恢复较好，少数可致死亡或留有严重的神经系统后遗症1。IHS病因复杂，主要致病因素为病毒感染。为探讨其与病毒感染的关系，本研究对47例IHS病儿常见病毒感染情况进行检测并结合临床综合分析

4、，现报告如下。1对象与方法1.1研究对象1.1.1实验组47例，为2006年2月～2007年1月青岛市儿童医院收治的IHS病儿47例，其中男22例，女25例；年龄20d～1岁，平均（3.0±1.3）个月。47例病儿均具有黄疸、肝脾大等症状及体征，符合IHS的诊断标准2。1.1.2对照组40例，为2006年4～8月在我院儿保科健康查体的儿童，其中男20例，女20例；年龄1月～1岁，平均（4.0±1.2）个月。两组婴儿性别、年龄间差异无显著性。1.2方法1.2.1肝功能及肝炎病毒检测抽取病儿入院当天空腹静脉血2mL，分离血清用于肝功能检测，指标包括ALT、AST、总胆红素、直接胆红素、

5、间接胆红素、总蛋白、清蛋白、球蛋白以及总胆汁酸等，用DadeBehring公司生产的自动生化分析仪检测。肝炎全套包括抗HAV抗体、抗HCV抗体以及乙型肝炎五项，应用试剂盒进行检测。抗HAV抗体检测试剂盒购自英科新创科技有限公司，抗HCV抗体检测试剂盒购自上海科华生物技术有限公司，乙型肝炎五项检测试剂盒购自艾康生物技术有限公司。1.2.2病毒特异性IgM抗体的检测采集受检者外周血，分离血清，采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测人巨细胞病毒（HCMV）、单纯疱疹病毒（HSV）以及EB病毒衣壳抗原（VCA）特异性IgM抗体，诊断试剂盒购自德国NOVATEC公司。HSV抗体检测试剂

6、盒不分型别，具体操作参照试剂盒说明进行，对阳性标本进行重复实验。1.2.3HCMVDNA检测收集晨尿标本，采用HCMVPCR荧光检测试剂盒(深圳市匹基生物工程股份有限公司)检测，严格按照操作说明书进行。结果判定以低于最低检出限为阴性。1.2.4EBVDNA检测采用PCR方法。采集受检者外周血EDTA抗凝，分离外周血单个核细胞（PMBC），酚氯仿异戊醇法常规提取细胞DNA。咽分泌物标本DNA的提取参照文献3进行。参照文献4选用扩增EBVBamHⅠgCl21.5mmol/L，dNTP0.2mmol/L，上下游引物各0.5μmol/L，TaqDNA聚合酶1.0U，DNA模板3μL。

7、同时设立阳性对照和阴性对照，阳性对照为EBV阳性的B958细胞，阴性对照为EBV阴性细胞系Ramos细胞。扩增条件为：94℃预变性5min；然后94℃30s，55℃30s，72℃45s，扩增35个循环；最后72℃延伸5min。取扩增产物10μL以20g/L琼脂糖凝胶电泳后转印到尼龙膜上，与地高辛标记的寡核苷酸探针进行杂交反应，经碱性磷酸酶标记的抗地高辛抗体作用后，加酶的发光底物CSPD作用5min，自显影检测杂交信号。1.3统计学分析数据间比较采用四格表χ2检验和四