鹿衔草黄酮苷对大鼠离体胸主动脉的作用及机制探讨论文

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1、鹿衔草黄酮苷对大鼠离体胸主动脉的作用及机制探讨论文何秀权，叶明磊，顾袁琴，邵雪岩,陈曦，侯云龙，乔国芬【摘要】目的探讨鹿衔草黄酮苷对大鼠离体胸主动脉的作用及其可能的作用机制。方法采用离体血管实验方法，经生物信号采集与分析系统测定血管环张力的变化;激光扫描共聚焦显微镜技术检测血管平滑肌细胞内钙浓度。结果鹿衔草黄酮苷(20mg·L-1)能够浓度依赖性的降低大鼠离体胸主动脉血管环张力。分别能减小苯肾上腺素(PE)(10-6mmol·L-1)和KCl(60mmol/L)对血管环的收缩幅度，最大舒张幅度分别为(102.7±1.6)%(P﹤0.01)和(39.6±1.6)%(P﹤0.01

2、)。此舒张作用不能被一氧化氮合酶抑制剂左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME300mmol·L-1)、鸟苷酸环化酶抑制剂亚甲蓝(MB10-5mmol·L-1)、环氧酶抑制剂吲哚美辛(Indo10-5mmol·L-1)、ATP依赖性钾通道阻断剂格列苯脲(Gli10-6mmol·L-1)、Ca2+依赖性钾通道阻断剂四乙基铵(TEA10-6mmol·L-1)所阻断。但可以被瞬时外向钾电流阻断剂氯化钡(BaCl210-6mmol·L-1)和钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-AP1mmol·L-1)阻断。在无钙灌流液中.freelg·ml-1)孵育10min可使CaCl2的量效曲线下移且使PE的

3、最大收缩幅度降低(P﹤0.01)。激光扫描共聚焦检测细胞内钙的结果表明，鹿衔草黄酮苷浓度依赖性(1，2g·L-1)地抑制了静息状态平滑肌细胞胞浆内钙浓度的升高。结论鹿衔草黄酮苷能够浓度依赖性舒张大鼠胸主动脉，其作用机制可能是开放瞬时外向钾通道，抑制细胞内钙离子释放和细胞外钙离子内流，但并不影响一氧化氮的释放和前列环素的生成。【关键词】鹿衔草黄酮苷;胸主动脉环;激光扫描共聚焦显微镜鹿衔草Herbapyrolae又名鹿蹄草，为鹿蹄草科植物鹿蹄草或普通鹿蹄草的干燥全草，主产于西藏、云南、贵州等地。鹿衔草具有祛风湿、强筋骨、止血的功效，用于风湿痹痛、腰膝无力、月经过多、久咳劳嗽等证。

4、化学研究发现1:鹿衔草含有的化学成分主要为黄酮苷类化合物，包括金丝桃苷、槲皮素、2''-o-没食子酰基金丝桃苷等2。有药理实验表明：鹿衔草黄酮苷(HerbaPyrolaeFlavonoidglycoside,HPFG)对大鼠急性心肌缺血有保护作用，其机制与抗脂质过氧化有关3。其有效单体2''-o-没食子酰基金丝桃苷对大鼠实验性心肌缺血再灌注损伤有保护作用4，同时对豚鼠右心室缺氧再给氧的心肌电活动也有影响5，但HPFG对大鼠离体血管的作用及其相关机制未见报道。因此，本实验采用离体大鼠胸主动脉环张力测定和激光共聚焦细胞内钙检测的方法来观察鹿衔草黄酮苷对大鼠离体胸主动脉血管的作用，

5、并对其作用机制进行了探讨。1材料与仪器1.1药品与试剂鹿衔草，黑龙江省药材批发市场购得,经本校生药学教研室鉴定;L-N-硝基精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine-methylester,L-NAME)，4-氨基吡啶(4-aminopyrimide,4-AP)，四乙基铵(tetrathylamonium，TEA),苯肾上腺素(phenylephrine,PE)，卡巴胆碱(Carbacholine,CCH)，格列苯脲(glybenclamide)，亚甲蓝(methyleneblue,MB)，吲哚美辛(indomethacine,Indo)及乙二醇四醋酸(ethyle

6、neglycoltetraaceticacid,EGTA)购自Sigma公司，其它试剂为国产分析纯。1.2动物健康gSO41.2mmol·L-1，NaHCO325.0mmol·L-1，Glucose11.1mmol·L-1，pH7.20～7.40)中，持续通95%O2+5%CO2的混合气体。去除血管壁周围的结缔组织和管腔内的残留血液.将血管剪成3～4mm的主动脉环，将主动脉环移至盛有5mlK-H液，恒温37℃，持续通混合气体的浴槽中，用两支L钩穿过血管环，一端固定在浴槽内的挂钩上，另一端与肌力传感器相连，用BL-420E生物机能系统记录血管环的张力。血管环预先给基础张力0.5

7、g，平衡40min，然后将张力调节至1.5g，再平衡40min,在平衡间不断调整张力，使之维持基础状态，每隔20min更换营养液1次。以PE或KCl刺激血管环,测试血管活性，达到最大幅度后冲洗至刺激前的状态。利用卡巴胆碱检验血管内皮活性。待血管环稳定后，换液1次，浴槽中加入10-6mmol/L的PE，收缩达峰值15min之后，加入4.5μmol·L-1卡巴胆碱(CCH)检验血管内皮活性，若加入卡巴胆碱后使PE预收缩的血管舒张60%～90%，可认为内皮完整，反之，则可认为内皮破坏。以PE(10-6mmol