子痫前期蜕膜组织差异蛋白的筛选与鉴定

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1、子痫前期蜕膜组织差异蛋白的筛选与鉴定【摘要】　　目的：应用蛋白质组学方法筛选子痫前期差异蛋白，探讨差异蛋白与子痫前期发生的可能关系.方法：收集５例正常足月妊娠妇女和５例足月子痫前期重度患者胎盘母面及宫壁上的蜕膜组织，提取总蛋白.双向凝胶电泳技术对总蛋白进行分离，考马斯亮兰染色，获得蛋白质图谱.用PDQuest软件进行图像分析，寻找差异蛋白，随机选取8个差异蛋白质点进行胶内酶解，用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDITOFMS）技术获得肽质量指纹谱，搜寻蛋白质数据库鉴定蛋白质并进行初步分析.结果：获得了正常妊娠及子痫前期重度患者蜕膜组织双向

2、电泳凝胶图谱，蛋白质点子痫前期组为（436±13）个点，正常妊娠组为（425±16）个点，图像分析结果显示表达丰度相差2倍以上的差异蛋白质点有14个，它们在子痫前期中均表现下调.随机选取的8个蛋白质点均成功得到鉴定，它们分别是膜联蛋白Ⅴ,血红蛋白β链,RhoGDP解离抑制剂1,氯离子细胞内通道蛋白1,原肌球蛋白4,平滑肌蛋白22α2,α1抗胰蛋白酶和纤维蛋白原β链.结论：子痫前期重度患者蜕膜组织中存在差异蛋白，这些蛋白质在子痫前期的发病过程可能起重要作用.【关键词】先兆子痫；蜕膜；蛋白质组学；电泳，凝胶，双向【Abstract】　AIM:Tos

3、creenthedifferentialproteinsindeciduasofpreeclampsiaandtostudytheirrolesinpreeclampsia.METHODS:Thedeciduasfrom5normalenoffulltermpregnancyand5preeclampsiapatientsthe2groupsunderensionalpolyacrylamidegelelectrophoresis(2DPAGE)andCoomassiebrilliantbluestainedgelimagingageana

4、lysissoftassfingerprinting(PMF)atrixassistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry(MALDITOFMS).Theresulteddataadeaccordingly.RESULTS:2DEpatternsofthedeciduasofnormalfulltermpregnancygroupandpreeclampsiagroup,(436±13)proteinspotspsiagroupand(425±16)innormal

5、pregnancygroup.Fourteendifferentialspotspsiagroupamongthemand8differentialspotsoglobinβchain,RhoGDPdissociationinhibitor1,chlorideintracellularchannelprotein1,Tropomyosinα4chain,Transgelin22α2,α1antitrypsinandFibrinogenβchain,respectively.CONCLUSION:Differentialproteinsfound

6、indeciduasfrompatientspsiamightplayanimportantroleinthepathogenicprocessofpreeclampsia.【Keypsia;decidua;proteomics;electrophoresis,gel,tensional　　0引言　子痫前期（preeclampsia,PE）是一种人类妊娠期间特有的原因不明的多系统疾病，严重危害母婴健康［1］.蛋白质组学是近年来兴起的一门新学科，因具有高通量的特点而广泛应用于临床.子痫前期的蛋白质组学研究主要集中在寻找早期特异性蛋白质标志物和发病机制的

7、探讨［2-3］，并运用蛋白质组学技术对子痫前期患者的外周血、脑脊液、羊水和胎盘滋养细胞等进行了各种研究［4］.但目前子痫前期仍然没有理想的标志物，具体的发病机制仍未阐明.本实验利用蛋白质组学技术，通过比较子痫前期重度患者和正常妊娠妇女蜕膜的蛋白表达差异，探讨引起子痫前期发生的可能因素，为研究子痫前期的病因和寻找特异性标志蛋白提供依据.1对象和方法1．1对象选择200609/200704在中南大学湘雅第三附属医院产科住院的足月子痫前期重度患者５例（诊断及分类参照全国统编教材《妇产科学》第６版）为子痫前期组；正常足月妊娠患者５例（无内外科合并症，因臀

8、位和头盆不称）为正常妊娠组.子痫前期组与正常妊娠组年龄分别为23～34（30.56±3.26）岁和24～31