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时间:2018-07-07
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1、古方黄芪散降糖作用的实验研究论文陈艳芬,王春怡,李卫民,高英,吴清和,叶雪兰【摘要】目的研究古方黄芪散对血糖的影响。方法采用链脲佐菌素(STZ)诱发的糖尿病和肾上腺素导致的高血糖小鼠模型,观察黄芪散对血糖小鼠模型和糖耐量的影响,并观察黄芪散对正常小鼠血糖和糖耐量的影响。结果黄芪散中剂量能降低STZ糖尿病小鼠的空腹血糖.freelice.MethodsDiabeticmiceinducedbystreptozotocin(STZ),hyperglycemiamicecausedbyadrenalinandnormalmicealstate.ResultsThemo
2、deratedoseofHuangqisandecreasedfastedbloodglucose,highdoseandmoderatedoseimprovedglucosetoleranceinSTZinduceddiabeticmice;highandmoderatedosesalsoloiamice;hoalmiceafteradministrationforthreeiceffectsinthestudy,providingexperimentalbasisfortheclinicalutilizationinthetreatmentofdiabet
3、esanditsplications.Keyouse;pharmacologicaleffects古方黄芪散源自北宋《圣济总录》,全方由葛根、黄芪、桑白皮三味中药组成,据原文记载主治“三消渴疾,肌肤瘦弱,饮水不休,小便不止”。在明代《普济方》的“消渴门-渴利”附论中也转录了本方。文献考察和临床研究发现葛根、黄芪、桑白皮三药单用或配伍应用对糖尿病及其并发症均有良好的疗效1,2,但关于该方整方的实验研究未见报道。因此,为了考察黄芪散是否具有降血糖作用,以便进一步的深入研究,本研究应用了STZ糖尿病小鼠、肾上腺素高血糖小鼠模型,考察黄芪散对血糖和糖耐量的影响。1实验材
4、料1.1药物与试剂黄芪散浸膏由广州中医药大学科技园制备,每1g相当于生药1.71g,密度1.22(50℃);盐酸罗格列酮,规格:4mg/片,贵州圣济堂制药有限公司,批号:20070502;优降糖(格列本脲),规格:4mg/片,扬子江药业生产,批号07030401。链脲佐菌素,美国Sigma公司,临用前由柠檬酸缓冲盐配制,pH值为4.4;肾上腺素注射液,西安京西双鹤药业有限公司,临用前用生理盐水配制;葡萄糖试剂盒,上海科欣生物技术研究所,批号:20071201。1.2仪器Model680酶标仪,美国BIORAD公司;TGL16GA低温离心机,上海安亭科学仪器
5、厂。1.3动物昆明种小鼠,雄性,体质量(20±2)g,SPF级,合格证号2007A006,由广东省医学实验动物中心提供,正常饲养2d后供试。饲养条件为恒温(24±2)℃,相对湿度50%~70%,饲养环境符合学实验动物环境设施要求。1.4统计方法所有数据均用SPSS13.0统计软件进行统计,两组间比较采用方差分析(oneg/kg,正常组腹腔注射柠檬酸盐缓冲液,72h后,小鼠禁食12h,眼底静脉丛取血,测定空腹血糖,选择空腹血糖≥11.1mmol/L的小鼠为糖尿病小鼠50只,将动物随机分为5组:模型组,黄芪散高、中、低剂量组,罗格列酮组,每组各10只。各组动物灌胃
6、给药,每天1次,连续15d,末次给药后,小鼠禁食12h,检测葡萄糖耐量(OGTT)。OGTT检测方法:分别于小鼠灌胃葡萄糖溶液(1g/kg)后0min、30min、60min、120min,眼底静脉丛取血,离心取上清,测定各时间点的血糖值,并计算血糖曲线下面积(AUC)。AUC计算方法:AUC(mmol/L·h-1)=(A+B)×0.5÷2+(B+C)×0.5÷2+(C+D)×1÷2(A、B、C、D分别为0、30、60、120min血糖值)。结果见表1和图1。结果显示,除正常组之外,各组小鼠空腹血糖均大于11.1mmol/L,且腹腔注射葡萄糖后,所有小鼠血糖均先
7、升高,后逐步下降,呈现葡萄糖吸收代谢的过程,各组与正常组比较,各时间点血糖值差异均具有极显著性(P0.01),表明STZ糖尿病小鼠造模成功。其中,罗格列酮组、黄芪散中剂量组与模型组的空腹血糖相比,差异均具有显著性(P0.01),提示两药均可以降低糖尿病小鼠的血糖。给糖负荷后30min和60min时,黄芪散高、中剂量组、罗格列酮血糖值明显低于模型组(P0.05或P0.01);给糖负荷后120min时,黄芪散各剂量组血糖值与模型组相比,差异均无显著性,而罗格列酮组仍明显低于模型组(P0.05)。通过计算各组AUC,发现罗格列酮组、黄芪散高、中剂量组AUC值明显低于模
8、型组(P0.01)。2.
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