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时间:2018-07-06
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1、子宫内膜样腺癌组织MMP9和CD147表达及意义论文公莉戴淑真田甜王宁车艳辞【摘要】目的探讨基质金属蛋白酶9(MMP9)和细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(CD147)在子宫内膜样腺癌组织表达及其与临床病理参数之间的关系。方法采用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)技术检测40例子宫内膜样腺癌和12例正常子宫内膜组织中MMP9和CD147基因的表达水平,并分析其与子宫内膜样腺癌临床分期、组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移等病理参数的关系。结果子宫内膜样腺癌组织中MMP9和CD147的表达均明显高于正常子宫内膜(t=9.46、7.86,P0.05)。MMP9在子宫内膜样腺癌中的表
2、达水平与其临床分期、组织学分级、肌层浸润深度及淋巴结转移有关(t=3.27~16.20,P0.05);CD147在子宫内膜样腺癌中的表达水平与其临床分期、组织学分级及淋巴结转移有关(t=2.50~6.20,P0.05),与肌层浸润深度无关(t=1.91,P0.05)。子宫内膜样腺癌中CD147和MMP9的表达呈正相关(r=0.443,P0.01)。结论MMP9和CD147的高表达可能在子宫内膜样腺癌的发生发展中起重要作用,二者相互协同可能是促进子宫内膜样腺癌发生、浸润和转移的重要因素。【关键词】子宫内膜肿瘤基质金属蛋白酶9逆转录聚合酶链反应[ABSTRACT]ObjectiveTo
3、investigatetheexpressionofmatrixmetalloproteinase9(MMP9)andextracelluarmatrixmetalloproteinaseinducer(CD147)inendometrioidadenocarcinomaanditsrelationshiperasechainreaction(RTPCR)etrialtissueof40patientsaand12normalendometrialtissue.Therelationshipbetaltissue(t=9.46,7.86;P0.05).Expressionleve
4、lsofbothMMP9andCD147inthecancerphnodemetastasis(t=3.27-16.20,P0.05;t=2.50-6.20,P0.05);thedifferencebetyometrialinvasion.Apositivecorrelationbetayplayanimportantroleinthepathogenesisofendometrioidadenocarcinomaandtheirsynergisticeffectmayactasimportantfactorsinpromotingtheinvasionandmetastasisof
5、thiscancer.[KEYatrixmetalloproteinase9;Reversetranscriptionpolymerasechainreaction子宫内膜癌是女性生殖系统常见的三大恶性肿瘤之一,约占妇科肿瘤的20%~30%,近年来发病率和病死率均有上升趋势1,2,其侵袭和转移是造成子宫内膜癌病人死亡的主要原因。多项研究发现.freeler5.0引物设计软件合成。MMP9上游引物5′GGATGGGAAGTACTGGCGATTC3′,下游引物5′CACTTGGTCCACCTGGTTCAAC3′,扩增片段长为478bp。CD147上游引物5′TTGAATGA
6、CAGCGCCACAGA3′,下游引物5′TGATCTTGTACCCCAGTC3′,扩增片段长为301bp,GAPDH碱基对长度为226bp,上游引物5′GAAGGTGAAGGTCGGAGTC3′,下游引物5′GAAGGAAGGAAGATGGTGATGGGATTTC3′。所用引物均由上海生工生物工程有限公司合成。1.2.3RTPCR采用RTPCR一步法,操作严格按德国QIAGEN试剂盒说明书进行。反应体系为25μL,包括5×RTPCRBuffer5μL,dNTPMix1μL,5×QSoluition5μL,引物2.5μL,EnzymeMix1.0μL,RNA0.
7、25μg,去离子水补至25μL,混匀后离心。反应条件如下:50℃逆转录30min,94℃预变性15min,进入循环;94℃变性1min,60℃退火1min,72℃延伸40s,MMP9,CD147和GAPDH的循环数分别是28、26、24;最后72℃延伸10min。1.2.4RTPCR产物的检测及半定量在20g/L的琼脂糖凝胶中电泳(100V,30min)后,凝胶扫描仪测定有无目的条带及条带吸光度值,以MMP9或CD147条带的吸光度值与G
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