六君子汤对环磷酰胺的增效减毒作用研究论文

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1、六君子汤对环磷酰胺的增效减毒作用研究论文刘智勤，朱惠学，陈鹊汀蒋玉凤，孙宏丽，黄启福【摘要】目的探讨六君子汤对环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）的增效减毒作用。方法建立S180荷瘤小鼠模型后，随机分为4组，即荷瘤对照组、CTX组、六君子汤高剂量+CTX组、六君子汤低剂量+CTX组.freelidum(CTX)activitiesbyLiuJunZiDecoction.MethodsS180tumorbearingmicemodelslyintofourgroups，includingcontrolg

2、roupor，CTXgroup，LiuJunZiDecoction(highandloice.After10daysoftreatment，themiceinthefourgroupsormunefunctionandantioxidativeenzymeeasuredrespectively.ResultsLiuJunZiDecoctioncouldpromotespleenlymthocyteproliferation，NKactivityandincreasetumor-proveimmunefunctiona

3、ndanti-oxidativecapacity.Keyide；SynergyandAttenuation；TumorChemotherapy肿瘤是目前严重危害人类生命健康的常见病。当前对肿瘤的治疗仍是以手术为主的综合治疗，其中术后化疗是预防转移和复发的重要治疗手段，然而化疗常引起如脏器损害和免疫力低下等毒副反应，使患者难以坚持治疗。近年来的研究显示，中医药在支持患者完成化疗疗程、增强疗效、防止毒副反应上有着重要的作用，临床运用广泛。六君子汤源自《妇人良方》，主治脾胃气虚兼有痰湿，症见恶心呕吐、胸脘痞闷、四肢无力等症

4、状，其所治疗诸症恰恰为化疗中常见，但六君子汤在肿瘤化疗中的增效减毒作用报道较少，且缺乏系统性和规范性。本研究通过建立S180荷瘤小鼠模型，探讨六君子汤联合化疗药物环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）治疗肿瘤是否具有减毒增效作用，以期为该方的临床应用提供一定实验依据。1材料与仪器1.1动物和瘤株清洁级昆明小鼠40只，8~10周龄，雌雄各半，体重18~22g，由河北医科大学实验动物中心提供，合格证编号704113。动物在实验前适应性驯养1周。饲料和垫料由河北医科大学实验动物中心提供。实验期间自由采食饮水。

5、腹水型S180瘤株由河北医科大学实验动物中心提供，L929细胞株由北京市中医研究所提供。1.2药物六君子汤主要由人参、白术、茯苓、甘草、陈皮、半夏等药物组成，由河北大学附属医院中药房提供，所有药品均经中药专家鉴定。取上述中药自来水浸泡1h后，分别加8，6，4倍量的水煎煮3次，时间分别为药液熬开后40，30，20min，将3次煎煮的药液混合，离心，取上清，80℃水浴浓缩至每毫升含生药0.8g，高温消毒后置4℃冰箱保存备用。化疗药物为注射用环磷酰胺（江苏恒瑞医药股份有限公司，批号06112021)。1.3试剂RpMI1

6、640完全培养基(Amresco公司产品)，四氮甲唑蓝(MTT，Amresco公司产品)，DMSO(Amresco公司产品)，刀豆蛋白A(ConA，Sigma公司产品)。超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)测试盒(南京建成生物工程研究所)。1.4仪器酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司产品），CO2培养箱（上海福玛实验设备有限公司产品），超净工作台(苏净集团，苏州安泰空气技术有限公司产品)，倒置显微镜（南京江南永新光学有限公司产品）。AE240电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公

7、司产品）。22pC分光光度计（上海棱光技术有限公司产品）。2方法2.1动物模型的建立［1］无菌条件下抽取传代第8天的S180小鼠的腹水，按1:3比例用生理盐水稀释，反复冲打、充分混匀，在显微镜下计数，用生理盐水调整细胞浓度为1×107/ml，取0.2ml于每鼠右侧腋窝下碘酊消毒后皮下接种。瘤株接种前，均用0.2%台盼蓝染色，计算活细胞数为95%~98%。从抽取腹水时开始，到移植完最后一只小鼠的总时间控制在60min内。2.2分组及给药小鼠接种24h后按体重和性别随机分成荷瘤对照组、CTX组、六君子汤（高、低剂量）+C

8、TX组。荷瘤对照组用生理盐水灌胃，CTX组腹腔注射CTX0.02g·kg-1·d-1，同时用生理盐水灌胃，六君子汤高、低剂量+CTX组的化疗药物剂量、给药途径及时间与CTX组相同，六君子汤高、低剂量分别给予16，4g·kg-1·d-1（按生药量计算，剂量由预实验得出）灌胃，各组灌胃容积均为0.2m1/10g，1次/d，连续10d。各组于瘤细胞接