六君子汤对环磷酰胺的增效减毒作用研究

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1、六君子汤对环磷酰胺的增效减毒作用研究：刘智勤，朱惠学，陈鹊汀蒋玉凤，孙宏丽，黄启福【摘要】　　目的探讨六君子汤对环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）的增效减毒作用。方法建立S180荷瘤小鼠模型后，随机分为4组，即荷瘤对照组、CTX组、六君子汤高剂量+CTX组、六君子汤低剂量+CTX组，每组10只。造模次日开始给药，共10d，停药次日处死，观察荷瘤小鼠肿瘤生长情况及对小鼠免疫系统和抗氧化酶的影响。结果六君子汤可提高CTX的抑瘤率及血清SOD、GSHpx活性，降低MDA含量，同时还能增强化疗荷瘤小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力和自然杀伤细胞(NK)

2、活性(P<0.05)。结论六君子汤对化疗药物CTX具有增效减毒的作用，其作用可能是通过提高免疫系统功能和抗氧化功能实现的。【关键词】六君子汤环磷酰胺增效减毒肿瘤化疗　　Abstract：ObjectiveToobservethesynergyandattenuationofcyclophosphamidum(CTX)activitiesbyLiuJunZiDecoction.MethodsS180tumorbearingmicemodelslyintofourgroups，includingcontrolgroupor，CTXgroup，LiuJu

3、nZiDecoction(highandloice.After10daysoftreatment，themiceinthefourgroupsormunefunctionandantioxidativeenzymeeasuredrespectively.ResultsLiuJunZiDecoctioncouldpromotespleenlymthocyteproliferation，NKactivityandincreasetumor-proveimmunefunctionandanti-oxidativecapacity.　　Keyide；Synerg

4、yandAttenuation；TumorChemotherapy　　肿瘤是目前严重危害人类生命健康的常见病。当前对肿瘤的治疗仍是以手术为主的综合治疗，其中术后化疗是预防转移和复发的重要治疗手段，然而化疗常引起如脏器损害和免疫力低下等毒副反应，使患者难以坚持治疗。近年来的研究显示，中医药在支持患者完成化疗疗程、增强疗效、防止毒副反应上有着重要的作用，临床运用广泛。六君子汤源自《妇人良方》，主治脾胃气虚兼有痰湿，症见恶心呕吐、胸脘痞闷、四肢无力等症状，其所治疗诸症恰恰为化疗中常见，但六君子汤在肿瘤化疗中的增效减毒作用报道较少，且缺乏系统性和规范性。本研究通

5、过建立S180荷瘤小鼠模型，探讨六君子汤联合化疗药物环磷酰胺（cyclophosphamide，CTX）治疗肿瘤是否具有减毒增效作用，以期为该方的临床应用提供一定实验依据。　　1材料与仪器　　1.1动物和瘤株清洁级昆明小鼠40只，8~10周龄，雌雄各半，体重18~22g，由河北医科大学实验动物中心提供，合格证编号704113。动物在实验前适应性驯养1周。饲料和垫料由河北医科大学实验动物中心提供。实验期间自由采食饮水。腹水型S180瘤株由河北医科大学实验动物中心提供，L929细胞株由北京市中医研究所提供。　　1.2药物六君子汤主要由人参、白术、茯苓、甘草、

6、陈皮、半夏等药物组成，由河北大学附属医院中药房提供，所有药品均经中药专家鉴定。取上述中药自来水浸泡1h后，分别加8，6，4倍量的水煎煮3次，时间分别为药液熬开后40，30，20min，将3次煎煮的药液混合，离心，取上清，80℃水浴浓缩至每毫升含生药0.8g，高温消毒后置4℃冰箱保存备用。化疗药物为注射用环磷酰胺（江苏恒瑞医药股份有限公司，批号06112021)。　　1.3试剂RpMI1640完全培养基(Amresco公司产品)，四氮甲唑蓝(MTT，Amresco公司产品)，DMSO(Amresco公司产品)，刀豆蛋白A(ConA，Sigma公司产品)。

7、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)测试盒(南京建成生物工程研究所)。　　1.4仪器酶标分析仪（北京普朗新技术有限公司产品），CO2培养箱（上海福玛实验设备有限公司产品），超净工作台(苏净集团，苏州安泰空气技术有限公司产品)，倒置显微镜（南京江南永新光学有限公司产品）。AE240电子天平（梅特勒-托利多仪器有限公司产品）。22pC分光光度计（上海棱光技术有限公司产品）。　　2方法　　2.1动物模型的建立［1］无菌条件下抽取传代第8天的S180小鼠的腹水，按1:3比例用生理盐水稀释，反复冲打、充分混匀，在显微镜下计

8、数，用生理盐水调整细胞浓度为1×107/ml，取0.2ml于每鼠右侧腋窝下碘酊消