龙牙百合核型分析

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1、龙牙百合核型分析摘要：采用染色体常规压片方法对龙牙百合根尖细胞进行了染色体核型分析，结果表明，龙牙百合的染色体数目为２ｎ＝２４，染色体核型公式为２ｎ＝２ｘ＝２４＝４ｍ（ｓａｔ）＋２ｓｍ＋１０ｓｔ（２ｓａｔ）＋８ｔ，核型分类属于３ｂ类型，核型不对称系数ａｓ．ｋ为７６．８０％，染色体相对长度系数ｉ．ｒ．ｌ＝６ｌ＋４ｍ２＋１０ｍ１＋４ｓ。关键词：龙牙百合；核型分析；染色体ｔｈｅｋａｒｙｏｔｙｐｅａｎａｌｙｓｉｓｏｆｌｉｌｉｕｍｂｒｏｗｎｉｉｖａｒ．ｖｉｒｉｄｕｌｕｍｌｉｙｉ－ｆｅｎｇ，ｐｉｊｕｎ，ｚｈｕｍｉｎ（ｈｕｎａｎｂｉｏｌｏｇｉｃａｌan

2、dｅｌｅｃｔｒｏｍｅｃｈａｎｉｃａｌｐｏｌｙｔｅｃｈｎｉｃ，ｃｈａｎｇｓｈａ４１０１２７，ｃｈｉｎａ）ａｂｓｔｒａｃｔ：thekaryotypeofliliumbrowniif.e.brownvar.viridulumbakerwasanalyzedbyconventionalpresseddiscmethod.theresultsindicatedthatthechromosomenumberswere2n=24andthekaryotypeformulaeｗａｓ２ｎ＝２ｘ＝２４＝４ｍ（ｓａｔ）＋２ｓｍ＋１０ｓｔ（２ｓａｔ）＋８ｔ，ｔｈ

3、ｅｔｙｐｅｏｆｔｈｅkaryotypeｂｅｌｏｎｇｅｄｔｏ３ｂ．ａｓ．ｋwas７６．８０％，ｔｈｅｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｏｆｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｒｅｌａｔｉｖｅｌｅｎｇｔｈｉ．ｒ．ｌ＝６ｌ＋４ｍ２＋１０ｍ１＋４ｓ．ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｌｉｌｉｕｍｂｒｏｗｎｉｉｆ．ｅ．ｂｒｏｗｎｖａｒ．ｖｉｒｉｄｕｌｕｍｂａｋｅｒ；kａｒｙｏｔｙｐｅanalysis；cｈｒｏｍｏｓｏｍｅ目前，国内学者已对多种百合属（ｌｉｌｉｕｍｌ．）植物的染色体进行了核型分析［１－９］。龙牙百合（ｌ.ｂｒｏｗｎｉｉｆ．ｅ．ｂｒｏｗｎｖａｒ．ｖｉｒｉｄｕｌｕｍｂａｋｅｒ）为百

4、合科（ｌｉｌｉａｃｅａｅ）百合属多年生草本植物，是目前湖南省和江西省的主栽食用百合，因其干品瓣形肥大微弯、色泽洁白至宝黄、形似龙牙而得名。有关其细胞学的研究与应用不是很多，已经报道的只有刘选明等［１０］运用组织培养技术结合秋水仙碱诱变处理首次获得了四倍体龙牙百合，而其核型分析结果尚未见相关报道。试验以龙牙百合根尖为材料，对其染色体核型进行了研究，旨在为其遗传利用、细胞学分析提供参考。１材料与方法２０１０年８月，在龙牙百合国家地理标志产地湖南省隆回县和田乡玉坪村挖取当年种植的鲜百合鳞茎，从地里挖出后，清水洗净，晾干，装入干净纸袋带回实验室。

5、在实验室将龙牙百合鳞茎置低温保湿环境中，在２０１０年１０月上旬当鳞茎陆续长出幼嫩根尖后，于上午９∶００左右取长０．５ｃｍ左右的根尖组织，用０．０５％（质量分数）的秋水仙碱在４℃冰箱中处理２４ｈ，卡诺氏液（冰醋酸∶无水乙醇＝１∶３，体积比，下同）固定１２ｈ，用体积分数为７０％的乙醇保存备用。制片时，先将根尖用去离子水洗净，用１ｍｏｌ／ｌ盐酸于６０℃恒温水浴中解离８～１０ｍｉｎ，去离子水漂洗后用卡宝品红染色，植物染色体常规压片法压片、镜检，将中期染色体清晰且分散良好的分裂相用ｏｌｙｍｐｕｓ显微镜拍照。染色体计数观察统计３０个完整的中期分裂相视

6、野，核型分析统计５个不同个体的细胞染色体的测量数据，取平均值。核型分析比较按ｌｅｖａｎ等［１１］和李懋学等［１２］的方法，用ｐｈｏｔｏｓｈｏｐ软件进行处理［１３］；核型类型根据ｓｔｅｂｂｉｎｓ［１４］的分类标准划分；核型不对称系数（ａｓ．ｋ＝长臂总长／全组染色体总长×１００％）按ａｒａｎｏ［１５］的方法计算；染色体相对长度系数（ｉ．ｒ．ｌ＝染色体长度／全组染色体平均长度）按ｋｕｏ等［１６］的方法计算。２结果与分析龙牙百合的染色体核型参数见表１，中期染色体形态、核型图及核型模式图分别见图１、图２。由表1和测量数据可知，龙牙百合染色体的核型公

7、式为２ｎ＝２ｘ＝２４＝４ｍ（ｓａｔ）＋２ｓｍ＋１０ｓｔ（２ｓａｔ）＋８ｔ。最长染色体的长度为２６．２６μｍ，最短染色体长度为７．０９μｍ，最长与最短染色体比值为３．７１，臂比值大于２的染色体占全部染色体的比率为８３．３％，按ｓｔｅｂｂｉｎｓ的核型分类系统，属于３ｂ型。平均臂比为５．１８，核型不对称系数ａｓ．ｋ为７６．８０％，染色体相对长度变化范围在３．３8％～１２．４8％，染色体相对长度系数ｉ．ｒ．ｌ＝６ｌ＋４ｍ２＋１０ｍ１＋４ｓ。从图１可见，龙牙百合第一对染色体的２条染色体臂上有次缢痕，且靠近着丝点，第二、第四对染色体的短臂上有随体及次

8、缢痕，但未见ｂ染色体。３讨论百合属植物的染色体为大型染色体，染色体基数ｘ＝１２，以二倍体（２ｎ＝２ｘ＝２４）最为常见。该属植物的核型也较稳定，一般由２对具中部（ｍ）或近中部（ｓｍ）着丝点的长染