DB34T1137-2010草霉脱毒种苗繁育技术规程.pdf

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1、ICS65.020.20B31DB34安徽省地方标准DB34/T1137—2010草莓脱毒种苗繁育技术规程TechnicalProceduresofStrawberryVirus-freePlantletsPropagation文稿版次选择2010-04-12发布2010-05-12实施安徽省质量技术监督局发布DB34/T1137—2010前言本部分按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由安徽省农业科学院园艺研究所提出，安徽省农业委员会归口。本标准由安徽省农业科学院园艺研究所、长丰县农业技术推广中心起草。本标准主要起草人：董玲、贺雷风、廖华俊、江芹、冯宗友、

2、李必芝。本标准为首次发布。I标准分享网www.bzfxw.com免费下载DB34/T1137—2010草莓脱毒种苗繁育技术规程1范围本规程规定了草莓脱毒种苗繁育技术的术语和定义、草莓脱毒原原种苗的生产、草莓脱毒原种苗的繁育、草莓脱毒生产种苗的繁育和病虫害防治的要求。本规程适于安徽省草莓脱毒种苗的繁育，其它同类草莓产区亦可参考。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T8321农药合理使用准则NY/T406脱毒草莓种苗病毒检测技术规程

3、NY/T496肥料合理使用准则通则NY5104无公害食品草莓产地环境条件NY5105无公害食品草莓生产技术规程www.bzfxw.com3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1外植体指由活植物体上切取下来用于组织培养的组织或器官。3.2脱毒原原种苗利用组织培养等途径获得的试管苗，经检测确认不携带规定检测病毒且移栽成活后的植株。用于繁育原种苗。3.3脱毒原种苗指用脱毒原原种苗，在隔离网条件下繁殖出的第一代苗。此过程也可以省去，用脱毒原原种苗直接在自然隔离的条件下生产脱毒生产种苗。3.41DB34/T1137—2010脱毒生产种苗指用脱毒原种（或原原种）苗，在自然隔离

4、条件下繁殖出的直接用于大田生产的种苗。4草莓脱毒原原种苗的生产4.1品种选择根据当地栽培方式和市场需求选择品种。促成或半促成早熟栽培选择休眠浅的品种，露地栽培选择休眠深的品种。4.2草莓脱毒方法主要采用匍匐茎茎尖组织培养与物理方法相结合进行。4.2.1茎尖组织培养4.2.1.1培养基配置灭菌使用MS基本培养基配方附加不同种类和数量的激素，pH值5.8～6.0。将制备好的培养基溶液分装于培养瓶，每瓶10ml～15ml，用硫酸纸、铝箔或耐高温塑膜扎紧，在1.2kgf/cm高压锅中消毒15min～20min，冷却后备用。4.2.1.2采集外植体采样最佳时间为3月～5月份晴天的

5、上午，选择无病虫、品种纯正的健壮植株，切取带生长点的匍匐www.bzfxw.com茎段2cm～3cm，流水冲洗1h～2h。4.2.1.3剥取茎尖组织将表面清洗过的外植体置于超净工作台上，用70%乙醇表面消毒数秒后，用1.0%次氯酸钠消毒10min～30min或0.1%升汞消毒8min～10min分钟，之后用无菌水冲洗3～5次后接种。在无菌接种箱中的解剖镜下用解剖刀挑取0.2mm～0.3mm的茎尖，接种于茎尖诱导培养基（MS+6-BA0.5～1.0mg/L+NAA0.1mg/L）中进行培养，每瓶接种一个茎尖。4.2.1.4培养条件温度23℃～25℃，光照强度2000lx～

6、3000lx，每天照光14h～16h。4.2.2病毒检测4.2.2.1检测病毒种类主要四种病毒：草莓斑驳病毒（SMOV）、草莓轻型黄边病毒（SMYEV）、草莓镶脉病毒(SVBV)、草莓皱缩病毒（SCV）。4.2.2.2病毒检测方法病毒检测有指示植物小叶嫁接检测法、电子显微镜检测法、血清免疫检测法。在生产中建议使用指示植物小叶嫁接检测法。4.2.2.3指示植物小叶嫁接检测法2标准分享网www.bzfxw.com免费下载DB34/T1137—2010指示植物选用草莓EMC、UC5、UC10等，具体检测方法按NY/T406执行。4.2.3去除带病毒株系检测前先对茎尖脱毒组织培

7、养试管苗进行株系标记，再进行病毒检测，根据检测结果确定无病毒株系和病毒株系，再根据标记淘汰病毒株系试管苗，保留无病毒株系进入继代培养和试管苗扩繁。4.2.4继代培养在无菌条件下，对确认的无病毒株系进行继代增殖培养，培养基为MS+6-BA（0.3～0.5）mg/L+IBA0.1mgmg/L,培养条件同4.2.1.4。增殖培养每20d～30d继代一次，繁殖系数3～5倍。4.2.5生根培养选2cm～3cm高的小苗转入1/2MS生根培养基进行生根培养，培养条件同4.2.1.4。生根培养4片叶以上，苗高4cm～6cm，根长3.0cm，5条根以上，可