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时间:2018-05-07
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1、人肾透明细胞癌中EGFRvⅢ的表达及意义:段小艺,王健生,张明鑫,夏鹏【摘要】目的检测表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)在肾透明细胞癌组织中的表达,探讨其与肾透明细胞癌发生、发展的关系。方法采用免疫组织化学染色和图像分析法检测80例肾透明细胞癌和24例正常肾组织中EGFRvⅢ的表达水平,进行统计学分析、比较。结果肾透明细胞癌组织和正常肾组织EGFRvⅢ的表达阳性率分别为46%、8%。通过半定量分析,二者EGFRvⅢ平均灰度值分别为148.49±13.05和155.65±14.86,其差异具有统计学意义(t=2.13,P=0.04);男、女患者EGFRvⅢ
2、的平均灰度值分别为149.01±13.70和147.40±11.76,二者无显著性差异(t=0.54,P=0.59);EGFRvⅢ表达与年龄无显著相关性(r=0.01,P=0.92)。结论EGFRvIII在肾透明细胞癌组织中存在高表达,与肾透明细胞癌的发生、发展有一定关系。【关键词】表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ);肾透明细胞癌;免疫组织化学;图像分析 ABSTRACT:ObjectiveTodetectexpressionofepidermalgroansuprarenalepitheliomatoexploreitsrelationentofsu
3、prarenalepithelioma.MethodsImmunohistochemistryandpathologicimageanalysisiquantitativelydetecttheexpressionofEGFRvⅢproteinineightyhumansuprarenalepitheliomatissuesandtalrenaltissues.ResultsPositiveexpressionrateofEGFRvⅢansuprarenalepitheliomatissuesand8%innormalrenaltissues.Theiraver
4、agegrayscalevaluesalesandfemales(149.01±13.70and147.40±11.76,t=0.54,P=0.59).NosignificantassociationansuprarenalepitheliomatissuesexpressEGFRvⅢ.EGFRvⅢmayplaycertainroleinthegenesisanddevelopmentofhumansuprarenalepithelioma. KEYalgroa;immunohistochemistry;imageanalysis 肾癌是目前泌尿外科中常见的
5、恶性肿瘤,而肾透明细胞癌占肾癌的70%-80%,它的发生与发展受到多种基因的调控。表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(epidermalgroalgroed公司产品,1∶100稀释后作为Ⅰ抗(抗体效价为2×102),生物素Ⅱ抗及DAB显色系统购自武汉博士德生物公司。采用免疫组织化学SABC法进行染色。利用LeicaQ570c真彩图像分析仪(德国)及NikonEclipseE1000采图摄像系统(日本)对染色组织进行图像分析。 1.3免疫组化染色及图像分析 免疫组化采用SABC法,石蜡切片常规脱蜡,梯度乙醇脱水,3%(体积分数)H2O2室温灭活30min,微波抗原修复
6、,正常山羊血清封闭30min,加入Ⅰ抗4℃过夜,滴加Ⅱ抗,DAB显色、脱水、透明、封片。用已知的阳性切片作为阳性对照,用PBS代替Ⅰ抗作为阴性对照。 1.4结果判定 显微镜下观察,以肿瘤细胞膜或胞质着色棕黄色或棕褐色者为阳性细胞。以每张切片中随机5个高倍镜(×40)视野阳性细胞数≥10%为阳性切片,<10%或未着色者为阴性。每例标本在光镜下随机选择3个高倍视野,采用病理图像分析系统测量每个视野灰度值,计算平均灰度值。灰度值越高表明相应蛋白表达越低,反之则表明相应蛋白表达越高。 1.5统计学分析 采用SPSS12.0统计软件中的t检验和Spearma
7、n相关分析对实验所得计数和计量结果进行分析,以P<0.05为差异有统计学意义。 利用图像分析系统检测肾透明细胞癌和正常肾组织中EGFRvⅢ表达的平均灰度值,通过方差分析和t检验显示肾透明细胞癌EGFRvⅢ的表达较高,差异有统计学意义(P<0.05)。此外,依据性别分组,男、女患者EGFRvⅢ表达水平差异无统计学意义(P>0.05,表2)。表2肾癌和正常肾组织EGFRvⅢ表达的灰度值的比较(略) 采用Spearman等级相关分析法分析肾透明细胞癌组织EGFRvⅢ表达水平与年龄的关系,结果显示二者无显著相关性(rs=0.01,P=0.92)。
8、 3讨论EGFR是表皮生
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