秦艽提取物抗病毒的药效学实验研究

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1、秦艽提取物抗病毒的药效学实验研究【关键词】秦艽；抗病毒；乙型流感病毒；肺炎；药效学　　Abstract：ObjectiveTostudytheprotectiveeffectofGentianamacrophyllaPallagainstfluvirusinmice．MethodsThepneumoniamiceacrophyllaPallonthemiceinfectedinfluenzeBvirusacrophyllaPallextractobviouslyprolongedsurvivaldaysandsurvi

2、valrateofthemiceinfectedinfluenzeBvirus,andprotectedlungindexandlungmorphologyofthemiceinfectedinfluenzeBvirus.ThereacrophyllaPallhastheeffectagainstinfectedinfluenzeBvirus.　　KeyacrophyllaPall;Anti-viral;InfluenzeBvirus;Pneumonia;Pharmacodynamics　　秦艽Gentianamacr

3、ophyllaPall是龙胆科龙胆属多年生草本植物，是我国历代常用的中药材，具有很高的药用价值，中医以根入药，藏医以全草入药，有祛风湿、止痹痛、退虚热、清湿热等功效。秦艽中含有龙胆苦苷、当药苦苷、龙胆次碱、挥发油及多糖等成分。现代药理研究发现秦艽具有抗炎、镇痛、调节免疫、保护肝损伤、抗菌、降血压、利尿消肿等作用［1～3］，被广泛用于心脑血管疾病，呼吸道疾病，肝胆疾病，风湿、类风湿性关节炎等疾病的治疗［4，5］，秦艽及其复方临床常用于病毒性疾病的治疗［6～8］，但没有相关的实验研究报道。前期的研究发现秦艽具有抗甲型流感病

4、毒的作用［9］，本文通过动物实验研究秦艽抗乙型流感病毒的药效作用。　　1材料与仪器　　1.1病毒株　　乙型流感病毒B/京防98-76，由中国预防医学科学院病毒所提供。　　1.2动物ICR小鼠，体质量12～15g，雌雄各半，由南京青龙山动物繁殖厂提供，合格批号：（苏）SCXK2002-0018。给药前后，实验小鼠分笼饲养全价颗粒饲料,由江苏协同医药生物技术有限公司提供，合格证号：苏A饲生字2002(009),批号：051218。自由饮水，室温（20±2）℃，湿度55%～65%。；鸡胚(9日龄)，南京中牧股份药械厂提供。　

5、　1.3仪器FA1004电子天平（上海天平厂）；超净工作台（苏州净化设备厂）；恒温孵箱（上海分析仪器厂）；CO2培养箱（德国贺利氏公司）；PYX-DHS隔水式电热恒温培养箱（上海跃进医疗器械厂）；YXQ-280电热式压力蒸汽消毒器（上海医疗器械厂）；SB2000超声波清洗器（上海中能超声有限公司）。　　1.4试剂乙醚（南京试剂厂批号050113）；苦味酸（上海化学试剂公司供应站，批号000122）；鸡红细胞（新鲜公鸡血，用生理盐水洗涤3次备用）。　　1.5药品　　秦艽采自青海省果洛州青海大学医学院秦艽种植基地，药材经青

6、海大学医学院中药教研室魏全嘉教授鉴定为麻花秦艽G.straminea.Maxim。所有秦艽水提物和醇提物均在青海大学医学院中藏药研究中心自提，最后配制成浓度为1g生药/ml的溶液，4℃冰箱保存。利巴韦林（四川美大康药业股份有限公司批号050723）；氯化钠（江苏太仓化工厂，批号040416）。　　2方法　　2.1血凝试验取24孔微孔板1个，除第1孔加入生理盐水0.9ml外,其余每孔加入生理盐水0.5ml。将增毒3次的病毒尿囊液0.1ml加入第1孔内混匀后加入第2孔0.5ml，稀释至第8孔，第9孔不加病毒尿囊液，作空白对

7、照。每孔加入0.5%鸡红细胞0.25ml,轻轻摇匀后于室温放置2h观察结果，记录结果2，5，7，10，12，16，17号血凝试验(HA)为640以上，可用于乙型流感病毒感染小鼠半数致死量(LD50)滴定。　　2.2乙型流感病毒感染小鼠半数致死量(LD50)滴定取ICR小鼠56只，体质量12～15g，雌雄各半，随机分7组，每组8只，取增毒3次的病毒尿囊液，以10倍稀释，每组滴1个病毒浓度，各组小鼠在乙醚浅麻醉下以血凝滴度为640病毒尿囊液30μl滴鼻感染小鼠，观察14d内死亡数，按Reed-Muench法计算，乙型流感病

8、毒感染小鼠半数致死量(LD50)滴定结果为LD50为10-1.60。　　2.3秦艽对乙型流感病毒感染小鼠的保护作用取ICR小鼠100只，体质量12～15g，雌雄各半，随机分5组，每组20只：①正常对照组：等量NS；②模型对照组：等量NS；③利巴韦林组：0.1g·kg-1；④秦艽水提取物组（简称秦艽水提组）：10ml·kg-1；⑤秦