人和大鼠颈动脉生物力学特性的对比研究

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1、人和大鼠颈动脉生物力学特性的对比研究:管玉龙,董培青,万彩红,杨璟,何美玲【摘要】目的测定不同种属包括大鼠、人体主动脉血管的生物力学特性,从而探讨心脏外科心肌保护基础实验与临床结果差异显著的原因。方法分别制备新鲜ETHODSCarotidarteriesanesthetizedgSO4(7H2O)1.2,NaHCO325.0,Glucose11.0,pH7.4;68mmol/LK+溶液:KCl68mmol,其他同K-H液;M199培养液:在无菌条件下配制M199溶液(购自GIBCOBRL公司),放置于4℃冰箱中备用。  1.3.2标本的制备g/kg腹腔

2、注射麻醉。取双侧颈总动脉血管,用眼科剪将血管条剪成3mm长的血管环。取自人尸体的颈总动脉血管备用(n=10),用眼科剪将血管条剪成3mm长的血管环。  1.3.3颈总动脉血管电-机械耦联反应测定将制备好的大鼠、人颈总动脉血管分别悬挂于Pomol/LK+溶液,连续记录血管张力,观测动脉血管对高钾的反应性,直至最大张力达平衡。使用K-H液进行换液,使得血管张力降至基础水平。重复上述刺激3次。  1.3.4颈总动脉血管α受体介导的血管收缩及非内皮依赖性舒张反应测定血管平衡1h后,大鼠血管使用68mmol/LK+溶液进行预处理3次,人颈总动脉血管无须预处理,分

3、别在器官室内加入10-5mol/L的去甲肾上腺素。血管张力达平台期后加入10-5mol/L的硝普钠。  1.4统计学处理应用SPSS13.0统计软件进行统计分析,记录两组不同血管材料在不同刺激条件下张力随时间的变化值。两组数据进行t检验,用±标准差(±s)表示。P<0.05为差异有统计学意义。  2结果  2.1颈总动脉血管电-机械耦联反应结果加入电-机械耦联收缩刺激剂68mmol/LK+溶液后,大鼠颈总动脉血管张力缓慢上升,并在1h内达峰值。以K-H液冲洗3次后,血管张力迅速下降,并在30min内恢复至原有基础张力水平(1.52±0.03)g,

4、与基础张力(1.52±0.02)g相比,P>0.05。再次加入68mmol/LK+溶液,血管张力再次上升。电-机械耦联反应刺激具有可重复性,见图1。而人颈总动脉血管张力缓慢上升,并在1h内达峰值。以K-H液冲洗3次后,血管张力无改变(7.51±0.19)g,与基础张力(2.52±0.04)g相比,P<0.01,见图2。  2.2颈总动脉血管α受体介导的血管收缩及非内皮依赖性舒张反应结果受到10-5mol/L的去甲肾上腺素刺激后,大鼠颈总动脉血管张力急速上升,20min内即基本达峰值,之后缓慢上升,连续性观测1h血管张力无衰减。加入硝普钠后,

5、血管张力急速下降,在20min左右即达基础张力水平(1.43±0.13)g,与基础张力(1.53±0.05)g相比,P>0.05,见图3。人颈总动脉在去甲肾上腺素作用下血管张力缓慢上升,30min内达峰值。加入硝普钠后,血管张力缓慢下降,在30min达基础张力水平(3.21±0.28)g,与基础张力(3.06±0.13)g相比,P>0.05,见图4。  本研究选择大鼠和人类动脉血管作为实验材料,从血管生物力学角度研究可能造成心肌保护基础实验与临床观察差异的可能原因。本组实验由于采用了Pomol/L不等,68mmol/LK+溶液是比较常用的一

6、种。据报道,68mmol/LK+溶液可以在不同动物的不同血管产生强烈的收缩效应,并且没有脱敏现象。去甲肾上腺素作用于α肾上腺素能受体,受体分布广泛,因此是药理机械耦联反应实验中最常用的试剂之一,因此,选用这两种试剂作为生物力学实验的刺激剂。加入硝普钠观察血管的非内皮依赖性舒张反应。在电机械耦联实验中发现,大鼠对高钾有较强的耐受和调节能力,大鼠血管张力在去除刺激因素后迅速下降,说明细胞内存在快速的钙通道调节机制,从而降低细胞内钙离子浓度,引起血管张力下降。但其具体机制尚需要进一步的实验证实。在药理机械耦联反应实验中,人体血管与大鼠具有相似的α受体介导收缩

7、反应和非内皮依赖性舒张曲线。但是人体血管上升(收缩)和下降(舒张)曲线更为平缓,说明收缩和舒张强度低于大鼠。这可能提示人体对药物具有一定的抵抗和适应能力。  尽管动物实验中经常采用高钾进行反复刺激,进行血管生物力学的检测。但是检测也显示,暴露于20mmol/L的高钾溶液,冠状动脉内皮细胞一氧化氮的释放并未受到影响,但是内皮细胞衍生的超级化因子(EDHF)介导的舒张作用减弱[12]。本组实验则通过生物力学的角度直接证实了高钾的这种不利影响。人颈总动脉受到68mmol/LK+溶液刺激后,血管张力持续增高,改变细胞外K+浓度并不能使张力降低。这说明高钾对人体

8、血管的不良影响较大鼠更为明显,人与动物血管调节钾代谢的机制存在明显差异。这种现象在临床上将会明

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