黄瓜香在急性炎症动物模型中抗炎效应的研究

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1、黄瓜香在急性炎症动物模型中抗炎效应的研究：李春艳，钟飞，李先辉，吕江明，贾薇【摘要】目的研究黄瓜香提取物的抗炎效应。方法采用4种急性炎症模型,包括角叉菜胶及蛋清诱导大鼠足趾肿胀、二甲苯致小鼠耳片肿胀、1%冰醋酸致小鼠腹腔渗出模型,观察黄瓜香提取物的抗炎作用。结果黄瓜香提取物组对二甲苯致小鼠耳片肿胀，对角叉菜胶和蛋清引起的大鼠足跖肿胀，对急性炎症导致的皮肤和腹腔毛细血管通透性均有不同程度抑制作用,其中黄瓜香提取物中、高剂量两个剂量组与模型组相比有显著性差异(P<0.05或P<0.01)。结

2、论黄瓜香提取物具有较强的抗炎效应。【关键词】黄瓜香;抗炎作用黄瓜香学名蔓茎堇菜，属堇菜科，堇菜属(VioladiffusaGing，VDG)多年生草本植物。性味酸寒无毒，具有清热解毒、散淤消肿、去腐生肌、清肺止咳、生肌接骨之效。民间使用历史悠久，主治肝炎、痈肿疮毒、风热咳嗽、眼睑炎，牙龈炎、烫伤、毒蛇咬伤等。已有文献报道黄瓜香具有多种药理活性[1]，但与黄瓜香“清热解毒，散淤消肿”功效密切相关的抗炎作用未见系统研究的报道。本文采用实验性急性炎症动物模型,观察黄瓜香抗炎效果,为其临床应用提供理论提供依

3、据。　　1材料与仪器　　1.1动物　清洁级昆明种小鼠,18～22g，♀♂各半,合格证号:001847;清洁级SD大鼠,180～250g，♀♂各半，合格证号：001847,由湖南长沙开福区东创实验动物服务部提供，许可证号：20060001。　　1.2药品及试剂黄瓜香水提物由吉首大学药理实验室提供,传统方法水提、浓缩,临用时用蒸馏水稀释成所需浓度(实验所用剂量均以生药计);吲哚美辛，山西临汾奇林药业有限公司生产,批号20070601。二甲苯,江苏徐州试剂二厂生产,批号050720;角叉菜胶,青岛海洋所提

4、供,用前1天以无菌生理盐水配制成10g·L-1,放置4℃冰箱过夜备用;甲醇、甲酰胺、冰醋酸、氢氧化钾为分析纯。　　1.3仪器uv-3100紫外分光光度计(上海美普达仪器有限公司),sp-723可见分光光度计(上海光谱仪器有限公司),FA/JA型电子天平(上海精密科学仪器有限公司),精度0.02mm的游标卡尺(上海量具刃具厂)，SHH.g·kg-1)，每组动物按0.1ml/10g连续灌胃给药5d,模型组给予相同体积的生理盐水。末次给药30min后,于小鼠右耳前后两面均匀涂抹二甲苯0.02ml/只,左耳

5、作对照,45min后脱颈处死小鼠,沿耳廓基线剪下两耳,用直径为9mm的打孔器沿左右耳片同一部位打下圆耳片,电子天平称重,计算肿胀度和抑制率。肿胀度以每鼠左右耳片重量之差来表示，抑制率(%)=[(模型组肿胀度-给药组肿胀度)/模型组肿胀度]×100%。　　2.2黄瓜香对小鼠毛细血管通透性的影响[2]接上实验，于涂抹二甲苯后，立即尾静脉注射0.5%伊文思兰溶液0.1ml/10g，同时腹腔注射1%冰醋酸10ml·kg-1,45min后脱颈椎处死动物,用5ml生理盐水冲洗腹腔,吸管收集腹腔液,离心取上清液于

6、590nm处可见分光光度计测定吸光度A值。按公式计算小鼠腹腔毛细血管通透性抑制率。腹腔毛细血管通透性抑制率(%)=[(模型对照组腹腔液A590-给药组腹腔液A590)/模型对照组腹腔液A590]×100%;待“2.1”项实验中耳片称毕,将致炎右耳片浸入1ml甲酰胺中,38℃水浴48h将染料渗出,离心取上清液于620nm处可见分光光度计测吸光度A值。按公式计算小鼠皮肤毛细血管通透性抑制率。皮肤毛细血管通透性抑制率(%)=[(模型对照组液A620-给药组液A620)/模型对照组液A620]×100%。　

7、　2.3黄瓜香对角叉菜胶诱导的大鼠足跖肿胀模型的影响[2，3]大鼠50只,♀♂各半,随机分为5组:模型组(生理盐水)、VDG(0.4，0.8，1.6g·kg-1)组、阳性药组(吲哚美辛,25mg·kg-1)，每组动物按2ml/100g连续灌胃给药5d,模型组给予相同体积的生理盐水。实验当天先用游标卡尺(精度0.02mm)测所有大鼠右后肢足跖厚度作为造模前的正常值,末次给药1h后,于每鼠右足趾皮下注射1%角叉菜胶0.1ml致炎,以造成急性足跖肿胀模型。分别测定注射角叉菜胶后30min，1h，2h，3h

8、，4h，5h大鼠致炎右后足跖的厚度,以肿胀度作为检测指标。肿胀度(mm)=致炎后足跖厚度-致炎前足跖厚度。　　2.4黄瓜香对蛋清诱导的大鼠足跖肿胀模型的影响[2，3]实验分组、给药、足跖厚度测定、肿胀度计算同“2.3”项方法，每鼠右足趾皮下注射鸡蛋清0.1ml致炎,以造成急性足跖肿胀模型。　　2.5数据统计分析　计量资料用±s表示,多组间差异用F检验进行统计分析，进一步用One-WayANOVA检验进行两组间比较,使用SPSS12.0软件进行统计分析。　　3.2黄瓜香