灵芝孢子粉对裸鼠移植性人肝肿瘤血管生成的抑制作用

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1、灵芝孢子粉对裸鼠移植性人肝肿瘤血管生成的抑制作用：王筱婧，徐江平，程玉芳【关键词】灵芝　　摘要:目的研究灵芝孢子粉对裸鼠移植性人肝肿瘤血管生成的影响，并初步探讨其抑瘤机制。方法建立裸鼠移植性人肝肿瘤模型，采用随机区组设计法随机分为空白对照组、阳性对照组及灵芝孢子粉组，观察裸鼠肿瘤生长。采用苏木精-伊红染色法、SP免疫组织化学法及病理ImageproPlus5.0彩色图像定量分析法检测裸鼠肿瘤组织中血管内皮生长因子（VEGF）和微血管密度（MVD）。结果灵芝孢子粉为2.1g.kg时，对裸鼠移植瘤的抑制率为57.0%，与空白对照组比较有显著差异（P<0.

2、01）。镜下观察，灵芝孢子粉组与空白对照组相比，肿瘤坏死组织较多，细胞异型性较小。灵芝孢子粉组VEGF、MVD表达水平较空白对照组有明显下降。结论高浓度及大剂量的灵芝孢子粉对肝肿瘤有明显抑制作用，并能抑制肿瘤新生血管生成，其机制可能与对VEGF表达的抑制有关。　　关键词:灵芝孢子粉;HepG2;裸鼠;血管生成　　Abstract:ObjectiveToevaluatetheinhibitoryeffectandantiangiogeiceffectofLucidGanodermaspore（LGS）onthegroanhepatocarcinomaHepG

3、2xenograftinathymicnudemice.MethodsThenudemicemodelsofhumanhepa-tocarcinomaHepG2lydividedintoaNSblankcontrolgroup，a5-FUpositivetreatmentcontrolgroupandaLGStreatmentgroup.H-Estaining，SPimmunohistochemistryandquantitativepathologicimageanalysissystemicrovesseldensity（MVD）andexpressi

4、onofvascularendothelialgroorti-ssue.ResultsTheinvivostudyrevealedthatLGSproducedquitecertaintherapeuticeffectonthegroacellstrain（dose:2g.kg，inhibitoryrate:57.0%，P<0.01）.Morphologicstudyshoorenecrosisandlessdegreeofatypia，decreasedMVDandVEGFexpressionintheLGSgroup，asparedortissu

5、eofhumanhepatocarcinomaHepG2innudemice.ItsmechanismsmayberelatedtothereductionofVEGFexpression.　　Keyaspore;hepatocarcinomacellstrainHepG2;nudemouse;angiogenesis　　大量的实验研究表明，肿瘤新生血管的形成与肿瘤的生长和转移扩散密切相关［1］，肿瘤的血管密度与实体瘤的预后有关。抑制新生血管的形成，则能抑制肿瘤的生长和转移，使肿瘤处于休眠状态［2］。灵芝是担子菌纲多孔科灵芝属真菌，其生长成熟后所散发出来的

6、孢子体即灵芝孢子粉。灵芝孢子粉富含三萜、多糖及微量元素等有效成分。临床报道孢子粉可改善机体的免疫功能，防治癌症，减轻患者对放疗、化疗的不良反应［3～5］。近来有报道显示，灵芝提取物对前列腺癌细胞的血管内皮生长因子（VEGF）和肿瘤生长因子β1（TGF-β1）有抑制作用［6］。为了进一步证实其客观疗效并研究其作用机制，本实验选用裸小鼠人肝癌HepG2移植瘤模型，观察该药对肿瘤的抑制作用，进一步检测肿瘤组织中VEGF及微血管密度（MVD），研究灵芝孢子粉对肿瘤血管生成的影响。　　1材料和方法　　1.1材料　　1.1.1肿瘤细胞株HepG2为人肝癌细胞株，由南方

7、医院肿瘤科生物治疗室提供，用DMEM培养基（含10%小牛血清，青霉素105U.L，链霉素100mg.L），37℃，5%CO2培养。　　1.1.2实验动物6～9周龄BALB.C裸鼠30只，体重22～30g，雌雄不拘，无特定病原体（SPF）条件下饲养。由南方医科大学实验动物中心提供，动物质量合格证号No.00736。　　1.1.3药品及试剂灵芝孢子粉，广州盈康科技有限公司提供。5-氟尿嘧啶（5-FU），江苏南通精华制药有限公司产品，批号050307。DMEM培养基，GIBCO公司产品。新生小牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司产品，批号040622，使用前热

8、灭活（55℃，30min）。胰酶，GIBICO公司产品，购于广州晶