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1、丙型肝炎临床检验技术发展现状与展望【关键词】HCV抗原检测核心抗原核酸检测技术(NAT)同时检测丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)感染引起的一种重要的世界性传染病[1],这种病毒主要经由血液传播，也可能存在其他传播途径如母婴传播、性传播和家庭内接触传播。约有近半数的HCV感染传播途径不明确。丙型肝炎的流行呈全球性，是欧美及日本等国家终末期肝病的最主要原因。根据P)以及基因芯片技术[11,12],由于LAMP技术操作简单,且无需特殊仪器,具有广阔的应用前景。3HCV抗原的检测目前报道有两类HCV抗原包括非结构抗原和核心抗原的检测可作为HCV感染的指标。血清中HCV抗原的检测有利
2、于HCV感染患者的早期发现,特别是某些免疫功能紊乱、免疫功能低下的患者和某些不产生抗体的携带者。HCV核心抗原与HCVRNA的动力学变化密切相关,可以作为HCV复制的标志[13]。近年来对HCV抗原的检测方法的研究不断取得进展,关键点在于单克隆抗体的研制以及抗原抗体复合物解离剂的研究。近期美国Ortho公司已推出了用双抗体夹心法定性或定量检测血清样品中总的或游离的HCV核心抗原ELISA试剂盒,与RT-PCR方法相比，具有操作简单、耗时短、对实验环境要求较低以及假阳性率低等特点,在临床上可用于HCV血清学转换前的早期急性丙型肝炎诊断、抗-HCV阳性感染者的病毒血症分析以及HC
3、V感染者治疗前后病毒血症追踪分析等[14]。HCV核心抗原存在的时间较短(约27～70d),所以HCV核心抗原的检测还要结合抗-HCV的结果。同时HCV核心区基因的变异也可能影响了HCV核心抗原的检测,比如HCV核心区49位氨基酸的突变就降低了抗原测定的敏感性[15]。改进现行试剂盒的主要途径是提高单克隆抗体对于天然抗原的构象表位的亲和力。对于非结构蛋白的检测主要为NS3、NS4和NS5位点的蛋白[16],由于这部分蛋白出现变异的概率较大,目前仅见报道。4同时检测抗-HCV和HCV核心抗原联合检测抗原抗体的思路是HCV筛查试剂盒和血清学检测的发展方向。目前主要把HCV核心抗原
4、和外周蛋白抗体及部分核心抗体相结合的检测试剂盒[17]。HCV核心抗原是HCV感染者体内出现的早期感染指标，几乎与HCVRNA同时出现，核心抗原和HCVRNA的动力学变化密切相关。HCV核心抗原检测用双抗体夹心法定性或定量检测血清样品中的HCV核心抗原。该方法不受被检测样品中抗-HCV的干扰,检测结果准确可靠。可用于HCV早期急性丙型肝炎诊断，抗-HCV阳性感染者的病毒血症分析以及HCV感染者治疗前后病毒血症追踪分析[18]。目前已有两家商品化的试剂盒面世,但是这两种试剂盒都使用两步检测,而且检测时间都较长（超过2h）,不利于快速的筛查和POCT工作。另外这两种试剂盒都不能区
5、分阳性样本中抗原和抗体的存在情况,不利于进一步分析病情。参考文献[1]张贺秋．丙型肝炎病毒核心抗原检测技术国内外临床研究应用情况[J]．丙型肝炎病毒核心抗原检测技术研究与应用论文汇编，1-8．[2]买制刚．丙型肝炎临床检验技术现状与发展[J]．中国卫生检验杂志，2008．18(1)：190-191.[3]张贺秋,王国华,陈坤,等.Ⅰ丙型肝炎病毒抗体双抗原夹心法酶联免疫试剂的初步临床评价[J].临床输血与检验,2006,8(1):12-13.[4]王福生．ELISA和PCR法筛查无偿献血者结果的分析[J]．细胞与免疫学杂志.2010,26(4)：398.[5]谢立，吴晓东．丙型
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