中草药抗结核分枝杆菌的实验室研究

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1、中草药抗结核分枝杆菌的实验室研究【摘要】目的：在实验条件下观测部分中草药在单味和复方组合下，对结核分枝菌的抗菌活性。方法：采用琼脂绝对浓度法，加入不同浓度的单味或复方中草药，接种结核分枝杆菌（HV37株），在37℃下培养一个月。结果：大蒜液1∶10；百部液1∶5；夏枯草液1∶5有抑制结核菌生长作用；而大蒜百部混合液1∶20；夏枯草大蒜混合液1∶20；夏枯草百部混合液1∶10；大蒜夏枯草百部混合液1：40均有抑制结核分枝杆菌生长的作用。结论：三种中草药在实验条件下均有抗结核分枝菌的作用，联合药效比单药的作用强。【关键词】中草药结核分枝杆菌药物敏感性试验AbstractObjective：T

2、oobservetheeffectofsomeSingleorpoundMixtureTraditionalChineseMedicineontheactivityofmycobacteriumtuberculosis.Methods:HV37cells(mycobacteriumtuberculosis)ixturetraditionalChinesemedicinesinvariousconcentrationsforonemonthat37℃byAgarabsoluteconcentration.Results:Garlicliquidonaeliquidultiplication

3、ofmycobacteriumtuberculosis.Furthermore,garlicandstemonaemixtureixtureonaeandbrunellaespicamixtureattersmixtureonaeorbrunellaespicacoulddepressthemycobacteriumtuberculosis’sgroixturesarebetterthanthatofsingle.Keytuberculosis；Medicamenttendemesstest结核病近30年来，无论在发达国家还是发展中国家，无论是在经济发展的地区还是经济落后的地区，都呈上升

4、的趋势，其主要的原因是结核分枝杆菌形成了对目前所用的抗结核病的药物的抗药性，使得原有的抗痨方案和抗结核病的治疗规程失去了应有的作用，使得结核病卷土重来，直接影响着人们的健康水平和经济发展，控制结核病的发展是摆在我们面前的重要任务。目前在这个领域中有两个重大的课题需要人们进行研究和探讨，其一是研究其耐药性产生的机制，并寻找其耐药性检测的方法；其二是寻找敏感高效的抗痨药物，重新制定新的抗痨规程与方案，使其治疗更加有效，从而控制结核病的蔓延。近年来我们实验室在这些方面做了许多工作，如结核分枝菌的快速培养法，结核分枝菌耐药性的尿素酶检测法等。同时对多种中草药抗结核分枝杆菌的作用在实验条件下进行研

5、究，现将部分中草药抗结核分枝菌的结果发表如下。1材料与方法1.1材料1.1.1菌种：菌株购自中国生物药物鉴定所细菌室（菌株编号H37RV）。1.1.2培养基：绝对浓度法采用豆浸液改良罗氏培养基。1.1.3中草药：大蒜，百部，夏枯草均购自长治医学院附属医院中药房。1.1.4链霉素：购自华北制药有限公司，硫酸链霉素纯品。1.2方法1.2.1结核分枝杆菌培养基的制备［１］：成分：天门冬素3.6g,枸橼酸镁0.6g,kH2pO42.4g,MgSO·7H2O0.24g，马铃薯淀粉30g，甘油12mL,豆浸液600mL；（新鲜全鸡蛋1000mL，2%孔雀绿20mL）。制备方法：将上述各成分加入600

6、mL豆浸液中，加温溶解，待冷却后，加入全鸡蛋1000mL（鸡蛋壳要充分消毒鸡蛋液要充分打匀），再加入2%孔雀绿20mL，待用。1.2.2琼脂绝对浓度法培养基的制备与药物的浓度：绝对浓度法严格按照中国防痨协会，结核病诊断细菌学检验规程的方法操作。1.2.3中草药的配制［２］：取大蒜，百部，夏枯草各10g，加100mL蒸馏水，煮沸30min，去药渣，补充水分到100mL，在蒸沸皿中蒸沸浓缩到10mL，冰箱保存备用。1.2.4含单味中草药结核菌培养基的制备：将上述制备好的结核培养基8mL放入中粗试管中，加浓缩好的中药原液2mL，使其中药的浓度为1∶5，然后进行对倍稀释至第5管，即1∶80，将制

7、备好的含药培养基，置血清凝固器中，间隙灭菌三次，冰箱保存，备用。1.2.5含两种以上中草药结核培养基的制备［3～5］：按两种药1∶1或三种药1∶1∶1的比例，配置中药复合组，然后按单味中药结核分支杆菌培养基的制备方法，制备含复方中药的结核分支杆菌培养基。1.2.6试验菌液的配制：接种于豆浸液结核分枝杆菌培养基培养20d，待生长至培养基斜面的1/3以上时，用硫酸钡比浊管比浊，用生理盐水配成105/mL～106/mＬ菌悬液，待用。1.2