荧光分析在临床实验诊断中的应用

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1、荧光分析在临床实验诊断中的应用【关键词】荧光分析实验诊断临床应用临床实验诊断主要是运用物理、化学和生物学等实验技术和方法，通过试剂反应、仪器分析等手段，对病人的血液、体液以及组织细胞等标本进行定量测定，以获得反映机体功能状态、病理变化及病因等重要数据。荧光分析法具有灵敏度高、取样量少、样品可进行无损分析等特点，现已广泛用于氨基酸、蛋白质、酶、核酸、微量元素、维生素等的分析测定。本文就近年来荧光分析法在临床实验诊断中的应用作一简要综述。1癌症患者体内卟啉类物质的荧光分析癌症是严重威胁人类生命健康的

2、常见病和多发病。据统计，全球每年约有500万人死于癌症，我国每年的癌症死亡人数已超过百万［1］。在目前癌症尚无十分有效治疗措施的情况下，癌症的早期诊断和治疗非常重要。荧光诊断恶性肿瘤的方法，是把光谱学技术引入到临床实验诊断领域，把在细胞水平上识别恶性肿瘤的方法提高到了分子水平。是目前国内外对恶性肿瘤早期诊断的极大进步。卟啉类物质因其具有光敏活性，并与癌症细胞具有特殊的亲和力，在临床诊断中可作为荧光检测的光敏剂［2］。陈丽娜等［3］采用光致发光的荧光光谱技术，对中晚期胃癌患者体内的卟啉类物质进行了

3、检测。结果显示106例中晚期胃癌患者，锌卟啉、原卟啉均有明显升高，与对照组进行阳性率的t检验，差异具有显著性（P＜0.01）。证实胃癌时，体内原卟啉升高具有普遍意义。另外，实验中还发现8例食道癌患者体内血卟啉也明显增加。有作者用CSF1血型荧光癌症诊断仪对271例包括呼吸系统、消化系统、淋巴系统、泌尿生殖系统和神经系统在内的恶性肿瘤患者体内的血卟啉衍生物进行了定量检测，结果显示，呈阳性反应者为93.5%［4］。Dolphin报道［5］，内镜紫外诱导自体荧光用于早期食道癌诊断，以390nm处与4

4、50nm处的荧光比值作为组织特征的标记，肿瘤组织相对正常组织有下降，此判定标准的灵敏度为97%。林孟戈等［6］采用光致发光的荧光光谱技术，测定了67例恶性肿瘤、28例良性肿瘤和38例正常对照者血清在505nm波长的可见光激发下的荧光发射光谱。结果提示，恶性肿瘤患者血清在635nm处出现一特征性荧光发射峰，阳性率为83.6%，显著高于良性肿瘤组（P＜0.01）和正常对照组（P＜0.01）。孟继武等［7］通过对血清中与癌症相关分子标志物的荧光光谱进行研究，从而在分子、电子水平上建立了对恶性肿瘤的筛选

5、方法。实验采取肘静脉血并制备血清，采用光致发光的方法研究血清的发光中心，由于血清中的主要发光分子是类胡萝卜素、卟啉等，观察到癌症患者的卟啉、类胡萝卜素等出现代谢异常。在早期阶段随着肿瘤的发展癌患者血液中的卟啉水平升高；在进展期随着肿瘤的发展癌患者血液中卟啉水平逐渐下降而类胡萝卜素代谢升高。采用I=IA/IB-1的经验公式开展了恶性肿瘤的临床检测，其诊断符合率达90%。恶性肿瘤时，可发生肿瘤部位卟啉类物质的聚积或血卟啉含量升高。有人认为与癌症组织周围毛细血管的增殖有关。癌细胞发展过程中，释放出“肿

6、瘤血管生长因子”，刺激周围毛细血管内皮细胞，长出新的毛细血管使癌症组织内血流量增多，导致血红蛋白分泌产物——卟啉在癌症组织中聚积。当然肿瘤细胞分化异常，增殖速度加快，竞争性地利用卟啉作为能量来源载体，也能引起血中卟啉类物质的增加［8］。2微量元素失衡患者体内的荧光分析微量元素是人体重要的组成部分，它们在人体中的含量虽少，但对人类生命却有着重要的作用。微量元素的生理功能通常是通过由它们参与形成的生物大分子来实现的，这些生物大分子表达、组成、结构方面的异常才是相关疾病发生发展的真正原因［9］。因此，

7、对微量元素的检测是临床实验诊断的一个重要指标。微量元素定量检测常用的方法有：分光光度法、原子吸收法、电感耦合高频等离子体原子发射光谱法等。荧光分析法因其具有灵敏度高、取样量少、样品可进行无损分析、可进行多种元素的同时测定等特点而倍受关注。邓勇军等［10］用X射线荧光分析法测定了30例复发性口腔溃疡患者体内的Zn、Fe、Cu的含量，结果显示口腔溃疡患者头发中Zn、Fe的含量低于健康对照（P＜0.01），而Cu则无显著性差异(P＞0.05)。陆文栋等［11］用X射线荧光分析法对乳腺癌患者头发中的钙及

8、其它微量元素进行了检测，结果提示：与健康对照组相比，乳腺癌患者组中的Ca、Sr、Zn、Cu、Mn均较对照组下降，并具有显著意义（P＜0.01）。这与早期报道胃癌患者头发中Sr、Zn、Cu含量有明显下降的结果相符。由于乳腺疾病多为激素依赖性，并与内分泌功能紊乱有关，且乳腺肿瘤细胞本身分泌降钙素，故引起钙的下降；同时，Cu的下降使血液中胆固醇和类胆固醇含量升高，致使血液中雌二醇升高，促使乳腺肿瘤细胞进一步“增生”，乳腺细胞因此释放出更多的降钙素，使人体内钙含量进一步下降［12］。郑树等［13］用X射