龙骨风水提物镇痛抗炎及免疫抑制作用研究

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1、龙骨风水提物镇痛抗炎及免疫抑制作用研究【关键词】龙骨风水［Abstract］ObjectiveToobservetheanalgesic，anti-inflammatoryandimmunosuppressiveactionsofaqueousextractofLonggufeng（LGF）soastoprovidesomeevidenceforitsclinicalapplicationinrheumatoidarthritis.MethodsAseriesofexperimentsedtostudytheacti

2、onsofLGF，includinghotplateexperiment，micetmationcausedbydimethylbenzeneinmice，delayedtypehypersensitivityinducedbypicrylchloride（PC-DTH）inmice，andproliferationofspleenlymphocytesinvitroinmice.ResultsLGF208.8mg/kgsignificantlyraisedhotplatepainthresholdofmiceint

3、hetinistrationLGF104.4mg/kgremarkablydecreasedtescausedbyaceticacidinmice.LGF52.2mg/kgmarkedlyinhibitedearsethylbenzeneinmice.LGF208.8mg/kgremarkablysuppressedtheinductionphaseofPC-DTHinmice，andtheinhibitionratioarkableanalgesicandanti-inflammatoryandimmunosupp

4、ressiveactions.［Keymatory；immunosuppression龙骨风学名桫椤，为桫椤科Alsophilaspinuiosa植物，是广西瑶族常用的一味传统药物［1］。在瑶医理论中，龙骨风根据其形态，性味功能及临床应用特点被归纳为“七十二风”中的一种，在临床上常用来治疗类风湿性关节炎并有良好的疗效［2］，关于其药理作用研究则未见报道，本文依据祛风湿中药的常用实验方法初步研究了龙骨风的镇痛、抗炎及免疫抑制作用，为其临床应用提供一定药理学依据。1实验材料1.1药品与试剂龙骨风原药材，由中国药科大学中药

5、复方研究室提供。龙骨风水提物制备：称取龙骨风原药材100g，10倍量水浸泡45min，煎煮40min后过滤，再用8倍量水煎煮40min，合并滤液，水浴浓缩至干，再于真空干燥箱中烘干，得干粉末，称重计算得率为17.4%，实验剂量以粉末计。体外实验以无菌PBS配制浓度为5mg/ml溶液，0.22μm微孔滤膜过滤除菌，-20℃保存备用，临用前稀释至所需浓度。醋酸泼尼松片（TAB.PrednisoniAcetatis，Pred），南京第二制药厂，批号：980601；2，4，6-三硝基氯苯（picrylchloride，PC）

6、，日本东京化成工业株式会社；罗痛定，湖南洞庭药业股份有限公司，批号：010108；醋酸（Aceticacid），南京化学试剂一厂，批号：021010807；无水乙醇，南京化学试剂一厂，批号：D30410302；二甲苯，南京化学试剂一厂，批号：990305；橄榄油，中国医药集团上海化学试剂公司，批号：F20020819；阿司匹林肠溶片，南京白敬宇制药厂，批号：20030109；元胡止痛片，南通中诚制药有限公司，批号：020501。PRMI1640培养基，GIBCO公司；新生牛血清，杭州四季青生物工程材料有限公司；刀豆球

7、蛋白A（ConA），Sigma公司，批号：11028-71-0；噻唑蓝（MTT），上海伯奥生物科技公司分装，批号：970408。1.2动物昆明种小鼠18～22g，25～28g，雌性或雄性，由中国药科大学新中新药研究中心动物房提供。1.3仪器GJ-8402型热板测痛仪，宁海白石电子医药仪器厂；PB303-N型精密天平，梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司；细胞培养箱（德国Heraeus）；Sunrise酶标仪（奥地利TecanGmbH）；洁净工作台（苏净集团安泰公司）；离心机（上海安亭科学仪器厂制造80-2B），磁力加热

8、搅拌器（GUOHUA79-1），恒温水浴锅（常州国华电器有限公司），XSZ-D2倒置显微镜（重庆光学仪器厂）。2方法与结果2.1龙骨风水提物对热板法所致小鼠疼痛反应的影响［3］雌性昆明种小鼠，体重18～22g，禁食12～14h后，测定给药前小鼠对热板刺激的反应时间，作为给药前阈值，筛选合格小鼠50只，潜伏期5～30s，随机分成5组，分别为阴性对