分析探讨神经干复合动作电位

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时间:2018-05-02

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1、分析探讨神经干复合动作电位【摘要】目的:讨论分析蛙神经干动作电位,为电生理实验课教学提供一些创新思路。方法:制备蛙的坐骨神经标本,在原有教学实验设计的基础上,就记录距离、麻药阻滞对神经干复合动作电位的波形、幅度、潜伏期及时程的影响,传导速度的计算方法等问题进行深入分析。结果:增大两记录电极距离,在一定范围内第一相峰值逐渐升高,持续时间延长,第二相峰值逐渐减小,电位持续时间逐渐延长;记录两点间滴加麻药,动作电位的波形第一相峰值逐步加大,第二相逐渐变小,直至消失形成单相动作电位;利用顶点所测速度与起点法测量值不相等。结论:讨论分析该实验结果能更好地使学生理解神经干复合动作电位的原理,牢固掌握基本的

2、电生理知识。【关键词】神经干;动作电位“神经干动作电位的引导,兴奋传导速度及兴奋性的测定”是生理机能实验中一项常规经典实验。在操作过程中,学生往往按部就班,只是简单观测神经干的阈刺激、最适刺激、传导速度及不应期,忽视了对神经干复合动作电位的波形、幅度、潜伏期及时程的测定和深入分析。例如,与单细胞动作电位的比较认识神经干复合动作电位的形成原理,双相动作电位波形特点的分析,记录电极间的神经干长度与双相动作电位波形的关系,动作电位峰值测定传导速度是否准确,改变刺激电极的正负极和距离对神经干动作电位传导的影响,利用麻药阻滞引导单相动作电位传导的优越性等,我们经过实验对以上问题进行分析探讨,提出一些基本

3、观点和认识,供大家讨论。1材料和方法1.1实验对象和药品实验对象采用分离完好的蟾蜍坐骨神经标本。实验药品有任氏液、麻药(盐酸普鲁卡因注射液,产品批号07060002)。1.2实验仪器和连接自制屏蔽盒,有7根可移动电极(图1),分别是2根刺激电极、1根接地电极、两对可做双通道的引导(共用地线)的引导电极。记录采用RM6240系统。A和B为刺激电极;C为接地电极;D与E、F与G为两对引导电极自制屏蔽盒示意图图1自制屏蔽盒示意图1.3实验方法1.3.1设定实验条件记录正常波形调整刺激电极A、B间距离为0.5cm,接地电极C尽量靠近记录电极,两对引导电极D和E、F和G的间距均为1.0cm。调节刺激强度

4、,测出神经干的阈刺激为0.1V,最适刺激为1.0V。以此为基础进行实验。记录正常波形时,将双通道分别接两对引导电极进行记录。1.3.2记录距离对波形的影响放弃以往单通道记录的方法,改进为双通道记录分析记录距离对波形的影响。具体方法为:两个通道的负极都接于D点,一通道正极(记录电极1)接于E点,二通道正极(记录电极2)接于F点,移动F点改变记录距离,记录动作电位波形。分神经干粗端(记录电极1)到细端(记录电极2)记录和神经干细端(记录电极1)到粗端(记录电极2)记录两种方式。1.3.3麻药阻滞记录单相动作电位麻药阻滞法代替常规的夹伤神经干法,采用单通道记录。记录到正常对照波形后,保持其他条件不变

5、,在记录两点间滴加麻药(3﹪普鲁卡因注射液),观察波形变化。1.3.4传导速度的测定采用双通道记录,一通道接D、E,二通道接F、G。将双通道的两对记录电极与神经干密切接触,调节刺激强度为1.0V以产生最大双相动作电位。根据V=d/△t,(d为D、F两点间距离,设定为1cm)通过两通道动作电位起始点(第一相动作电位)的距离差测出△t1,算出传导速度V1;通过两通道动作电位第一相顶点(第一相峰值)的距离差测出△t2,算出传导速度V2;比较V1和V2。观察通过起点法和顶点法测量传导速度是否有差别。2结果2.1记录距离对波形的影响调节刺激强度为1V,一通道D、E间距离为1.5cm,二通道D、F间距离为

6、3.0cm,结果如图2;保持通道距离不变,反向放置神经干,即记录方向由细到粗,结果如图3,将结果总结为表1。从结果中可以观察到:①复合动作电位波形第一相峰值高于第二相,而第二相的持续时间大于第一相;②无论刺激神经干粗段(中枢端)记录细端(外周端)和刺激神经干细端记录神经干粗段,随着两记录电极距离增大,在一定范围内第一相峰值逐渐升高,持续时间延长,第二相峰值逐渐减小,电位持续时间逐渐延长。图2增大记录距离前后波形比较(粗-细)图3增大记录距离前后波形比较(细粗)表1记录距离对波形的影响实验项目第一相第二相峰值(mv)时程(ms)峰值(mv)时程(ms)粗端至细端记录一通道6.01.24.72.

7、4二通道6.11.63.14.0细端至粗端记录一通道2.81.42.32.6二通道2.91.62.03.02.2麻药阻滞记录单相动作电位图4是滴加麻药前的波形;图5是滴加麻药5min后的波形。将结果总结为表2,从结果中可以观察到:在记录两点间滴加麻药后,随着麻药发挥作用,第一相动作电位峰值逐步加大,第二相逐渐变小,直至消失形成单相动作电位。表2麻药阻滞记录单相动作电位如图6电极距离d(D、F间距)

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