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1、氟对大鼠甲状腺形态、甲状腺过氧化酶活性及血清甲状腺激素的影响【关键词】甲状腺激素;氟;甲状腺过氧化物酶;大鼠Abstract:ObjectiveToobservetheeffectsoffluorideonthyroidmorphology,thyroidperoxidaseandserumthyroidhormones.MethodsOne-monthablactatingSDratslydividedintothreegroups:thecontrolgroup,loiddle-fluoridegroup,high-fluoridegr
2、oup,fedonths.Themorphologyofthyroidicroscope.TheTPOactivityeasuredethod.Radio-immunoassaythyroidhormones.ResultsThemajorchangesincludedincreasedfolliclesulationinhighfluoridegroups.etabolismfunction. Keyone;fluoride;thyroidperoxidase;rat 氟与人类的健康生活有着密切的关系,是人体和动物体内不可缺少的微量元
3、素。摄入适量的氟对机体有益,但如果摄入过量的氟,超过了机体的代谢能力,则会对组织和器官产生一定的不良影响。氟中毒病在世界范围内广泛分布，严重地影响着人和动物的健康[1]。有研究表明,甲状腺是对氟最敏感的器官之一，具有很强的摄氟和蓄积氟的能力，氟与甲状腺结构和功能损伤有直接的关系[2-4]。流行病学调查结果显示：地方性氟中毒与甲状腺肿的流行有很大的重叠性，并且氟中毒的发生与甲状腺肿的流行之间呈正相关关系[5]。本研究目的旨在复制氟过量的SD大鼠动物模型,从而观察氟过量是否能够导致甲状腺肿大，并探讨氟对甲状腺过氧化酶活性和甲状腺激素的影响，为研
4、究氟对甲状腺的损伤机理提供实验依据。 1材料与方法 1.1主要仪器和试剂氟化钠(国产分析纯);FT3、FT4放免药盒(中国原子能科学研究院高科股份有限公司);UV-2550紫外分光光度计(日本岛津公司);TGL-16G低温冷冻离心机(日本日立公司)。 1.2实验动物与分组选用断乳后1月龄,体重在110～130g健康雄性SD大鼠40只(购自锦州医学院实验动物中心)。随机分为4组:对照组、低氟组、中氟组、高氟组,4组均食用普通粮食配制的饲料。对照组饮用自来水(含氟0.40mg/L),低氟组饮用含氟15mg/L的自来水,中氟组饮用含氟量30
5、mg/L的自来水，高氟组饮用含氟60mg/L的自来水，喂养180天后处死,采血并分离血清测FT3、FT4,摘取甲状腺后多聚甲醛固定做光镜样本;液氮迅速冷冻后于-70℃冰箱保存待测其它指标。 1.3甲状腺组织形态学观察解剖大鼠，肉眼观察试验大鼠甲状腺的大小并称重，将甲状腺样本按常规方法制备石蜡切片，HE染色，在光镜下观察。 1.4TPO活性的测定采用Hosoya报道的愈创木酚法,根据实验室条件,略加修改。取200μL匀浆上清液，加入40mmol/L愈创木酚660μL、0.6mol/LH2O25μL，用PBS液加至1mL。反应是在加入H2O
6、2开始，记录1min内470nm吸收值的变化值。基本原理是愈创木酚作为电子供体与H2O2在TPO催化作用下反应,生成棕色四-愈创木酚,后者在470nm有吸收峰。测定在岛津UV-2550紫外分光光度计上完成。活性单位用GU表示,1GU定义为△A470nm/min=1.0。重复测定3次。 1.5血清甲状腺激素的测定FT3、FT4采用中国原子能科学研究院提供的试剂盒竞争结合放射免疫分析方法(RIA)测定。 1.6统计学分析所有数据以均数±标准差(±s)表示，应用SPSS13.0统计软件处理实验数据，组间比较采用单因素方差分析F检验，方差分析差
7、异有显著性后再进行样本的两两比较(q检验)。对TPO活性与染氟剂量做相关分析。 2结果 2.1甲状腺形态学观察 试验期内实验大鼠未发生氟中毒之外的其他疾病,试验中期，饮氟大鼠表现不同程度的氟中毒症状，部分鼠出现骨骼变形，站立不稳，食欲下降，精神沉郁。试验中后期，饮氟大鼠身体发育迟缓，表现出明显的氟骨症症状，说明氟中毒大鼠模型成功建立;对实验大鼠甲状腺进行解剖，结果肉眼观察到氟中毒大鼠甲状腺体积大于对照组的正常大鼠。观察大鼠组织切片时发现，对照组甲状腺滤泡大小均匀，胶质充盈，上皮细胞呈立方状，核呈圆形,腔内充满中等粉红色胶质,细胞质清晰
8、、均匀;而高氟各组滤泡上皮细胞渐变为扁平，间质纤维化，滤泡增大，滤泡腔内充满深染、黏稠的红色胶质,少量滤泡腔甚至有融合,形成巨形滤泡或囊腔(见图1)。 2.3血清甲状腺激素水平
