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1、滋阴补肾丸对广防己减毒作用初探论文摘要：目的通过研究滋阴补肾丸对广防己中马兜铃酸A含量的影响,探讨广防己的解毒问题。方法广防己与滋阴补肾丸共煎后,采用RP-HPLC法测定马兜铃酸A的吸收值,观测其含量的变化情况。结果加入滋阴补肾丸后,广防己中马兜铃酸A的含量明显降低。结论滋阴补肾丸可显著降低广防己中马兜铃酸A的含量。关键词：滋阴补肾丸 广防己 马兜铃酸A 减毒作用Abstract：ObjectiveTostudytheeffectsofZiyinBushenPillonAristolochiaac
2、idAinAristolochiafangchi,andpreliminarystudyonreducingpoisonouseffectsofZiyinBushenPilltoAristolochiafangchi.MethodsAbsorptionofAristolochhiaacidAinthemingleddecoctionofAristolochiafangchiandZiyinBushenPillbyHPLC,andthechangeofAristolochiaacidAarkedly
3、decreasedafterZiyinBushenPillarkedlydecreasedAristolochhiaacidAcontentofAristolochiafangchi. Keym×250mm),柱号为E：1417177；流速：1mL/min；柱温：室温；检测波长：250nm；进样量：10μL；流动相：乙腈-(水＋冰醋酸)＝48∶52,其中,水-冰醋酸＝62.5∶1。理论塔板数不低于2000。 2方法与结果 2.1标准溶液的制备 称取AA-Ⅰ对照品7mg,置于50mL量瓶中,加无
4、水乙醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得浓度为0.14mg/mL的对照品储备液。精密量取对照品储备液2.0mL于10mL量瓶中,用无水乙醇定容至刻度,摇匀,即得浓度为0.028mg/mL的AA-Ⅰ对照品溶液。 2.2供试液的制备 2.2.1广防己样品溶液的制备 精密称取广防己样品0.6g,置于200mL烧杯中,加120mL自来水,煎煮30min,过滤,收集滤液,残渣加80mL自来水,煎煮30min,过滤,收集滤液,合并两次滤液,置于水浴上,浓缩至干。用适量的无水乙醇溶解并完全转移至10mL的量瓶中
5、,加无水乙醇至刻度,摇匀。放入冰箱冷藏,静置过夜。抽取上清液,过滤,弃去初滤液,收集续滤液,放入1mL塑料离心管中,作为供试液1。 2.2.2广防己与滋阴补肾丸供试液的制备 分别取广防己样品、滋阴补肾丸粉末少许,各精密称取0.6g,置于200mL烧杯中,混合两种药物,加入120mL自来水,按“2.2.1”项下制备广防己样品溶液的方法进行操作,其制备液作为供试液2。 2.3马兜铃酸A对照品的定性分析 分别吸取供试液1和对照品溶液,注入液相色谱仪,按“1.4”项下色谱条件,测绘其色谱图。色谱图
6、见图1。2.4标准曲线的制备 精密吸取对照品储备液1、2、3、4、5、6mL,分别置10mL的量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度。按“1.4”项下的色谱条件,依次进样测定,测得AA-Ⅰ的峰面积。以AA-Ⅰ的进样量(μg)为横坐标,以对应的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。由标准曲线可知,在0.08～0.40μg之间,进样量与峰面积之间呈良好的线性关系,回归方程为：Y＝1.7×105X＋5248,r＝0.9999。 2.5精密度试验 精密吸取对照品溶液10μL,按“1.4”项下的色谱条件,注入液相色谱仪,测
7、定对照品溶液的峰面积,平行测定5次。结果RSD＝0.45%,表明精密度良好。 2.6稳定性试验 按“1.4”项下色谱条件,精密吸取10μL供试液1,注入液相色谱仪,测定,然后于2、4、8、12、24h各测定1次,结果RSD＝0.10%,表明供试品溶液在24h内测定结果稳定。 2.7重复性试验 取广防己样品0.6g,精密称定,共称取5份,照“2.2.1”项下操作,制成供试品溶液。在“1.4”项下的色谱条件下,分别精密吸取供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪,测定,计算AA-Ⅰ的质量。结果RSD＝
8、0.78%,表明重复性良好。 2.8加样回收率试验 取0.2mL供试液1,用无水乙醇定容为1mL,作为供试液3。取0.2mL供试液1,加入标准溶液0.15mL,用无水乙醇定容为1mL,作为供试液4。取标准溶液0.15mL,用无水乙醇定容为1mL,作为供试液5。取以上各供试液10μL,按“1.4”项下色谱条件测定,结果回收率为(99.5±0.5)%,RSD＝0.5%。 2.9马兜铃酸A对照品的定量分析 分别取供试液1、2,按“1.4”项下色谱条件测定并计算各样品中AA-Ⅰ的含量
