不同神经功能评分标准在小鼠eae模型评价中的比较

《不同神经功能评分标准在小鼠eae模型评价中的比较》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、不同神经功能评分标准在小鼠EAE模型评价中的比较：童巧文，朱英标，姚苏琴，郦铮铮，夏念格，韩钊，郑荣远【摘要】　　目的：比较不同的神经功能损伤评分标准对小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）运动功能障碍评估的效能。方法：应用MOG35-55多肽加完全福氏佐剂乳化后免疫20只C57BL/6小鼠，复制EAE小鼠模型，并使用3种不同的评分标准（Kono’s5分法、Hooper’s7分法、ethods:Themicemodelsofexperimentalautoimmuneencephalomyelitis(EAE)ptomsandpatho

2、logicalchangesentmethods，including5-point，7-pointand15-point，oresensitivitythan5-pointscorescaletotheincidenceofdisease.Andthe15-pointdiseasescorescaleodelandhadgoodvalidity.Conclusion:The15-pointdiseasescorescalehasaobviousdominancefortheassessmentofthesymptonoftheneuro

3、logicalfunction.Therefore，the15-pointdiseasescorescaleisremendedasthefirstmethodtoselect.　　Keyentalautoimmuneencephalomyelitis；animalmodel；mice；clinicalas-sessment　　实验性自身免疫性脑脊髓炎（experimentalautoimmuneencephalomyelitis，EAE）模型是国际公认的多发性硬化(multiplesclerosis，MS)动物模型，被广泛用于MS发病

4、机制和评价免疫调节药物的实验研究。EAE模型技术日益成熟，而且不同的实验动物和致敏蛋白使EAE模型呈现为不同的临床表现和病程［1］。但由于动物对检测应答具局限性以及目前EAE模型不同评分标准较多，使得EAE模型评分就同一症状而言，其评分标准在大范围内也尚未达到规范化和统一化。因此本实验针对目前文献中小鼠EAE模型最常用的几种评定标准（Kono’s5分法、Hooper’s7分法、OG35-55多肽由西安美联多肽技术公司合成，采用高效液相色谱仪分离纯化，纯度>95%。不完全福氏佐剂（CFA）、百日咳毒素（PT）均购自美国Sigma公司

5、；结核杆菌素（H37Ra）购自美国Difco公司。　　1.1.2EAE模型制作：用0.01mol/L的PBS将MOG35-55稀释为2mg/mL，然后将稀释液与等量的完全福氏佐剂充分混合，通过三通管将乳剂抽打为油包水状态，即为诱导EAE的抗原乳剂。EAE组小鼠于背部两侧皮下注射抗原乳剂（内含MOG抗原200～250μg/只）。对照组不予抗原处理。免疫后第0、第48小时给予全部小鼠（包括对照组）腹腔注射百日咳毒素，每只动物500ng/0.2mL。　　1.2评价标准　　1.2.15分法评分标准（Kono，1988）[2-3]分级如下：0分为

6、不发病；1分为尾巴无力；2分为轻微后肢无力；3分为严重后肢麻痹；4分为四肢麻痹；5分为濒死或死亡。　　1.2.27分法评分标准（Hooper，1995）[4-5]分级如下：0分为不发病；1分为尾巴半瘫；2分为尾巴全瘫；3分为步态异常；4分为后肢轻瘫；5分为后肢重瘫；6分为前肢累及；7分为濒死状态或死亡。　　1.2.315分法评分标准（eier分析，效度检验使用pearson相关系数分析，10分制标准化换算=原始分/评分总分×10分（评分总分指原始分相对应的评分法的总分5、7、15）。　　2结果　　2.1发病情况EAE组20只小鼠，全部发

7、病。EAE组动物在免疫后第12天陆续开始发病，表现为食欲下降、体重减轻、皮毛不光滑、精神萎靡，并相继出现神经系统症状，表现为尾部无力拖垂、步履蹒跚或拖行、大小便失禁。免疫后第16～第20天到达疾病高峰期，达到高峰期后将小鼠处死。　　2.2不同评分标准的比较　　2.2.1神经功能评分情况：EAE组中最早在免疫后第12天开始发病，大多数小鼠均集中在免疫后第15～第18天发病，并于2～4d后达到疾病高峰。采用小鼠神经功能评分5分法、7分法、15分法分别对EAE小鼠的发病潜伏期、达峰期、高峰期评分分别进行评价。对潜伏期的评价：三种评分方法差异无

8、显著性；对达峰期评价：15分法为（18.7±1.89）d，与之相比，7分法和5分法达峰期缩短，其中5分法为（17.5±1.98）d，两组间差异有显著性（P<0.05）。因为三种评分的总分值不同，将三个