甲醛对胚胎心脏发育的毒理效应探析

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1、甲醛对胚胎心脏发育的毒理效应探析目前甲醛被视为室内空气中首要的空气污染物，其作为污染源，可能对暴露人群，特别是孕妇产生毒性效应，甲醛导致胚胎发育的毒性作用越来越受到人们的重视，但目前有关甲醛对胚胎心脏发育的毒性效应的研究相对较少。　　　　本研究孕鼠进行不同浓度的甲醛静式吸入染毒，通过血液检查、病理学等方法，观察各组新生仔鼠基本情况、大体心脏解剖、心肌酶变化及心肌细胞损伤情况，探讨给予孕鼠吸入甲醛染毒对新生仔鼠心脏的毒性作用及可能产生的机制。通过研究明确两者关系，为进一步认识其对机体的远期危害评价提供实验及理论依据。　　　　1对象与方法　　　　1.1实验动物选

2、择无交配史的成年健康SD雌鼠30只，重量250g左右，雄鼠10只，重量280g左右，置于专用饲养房中，以标准大鼠颗粒雌雄分开进行喂养。保持温度23℃~25℃，湿度25%~35%,动物自由饮水，进食。喂养1周无异常，按雌雄比例3∶1于下午16时合笼。次日清晨取雌鼠阴道分泌物进行检测，涂片发现精子起当日定为妊娠第0天。共有20只雌鼠成功受孕。受孕后单独饲养。　　　　将20只雌鼠随机分为4组，每组5只：第1组、第2组、第3组、第4组。各组甲醛实际染毒浓度分别为：第1组：吸入室内新鲜空气；第2组：吸入低浓度甲醛（4.80±1.30）mg/m3;第3组：

3、吸入中浓度甲醛（25.24±4.60）mg/m3,第4组：吸入高浓度甲醛（119.64±15.40）mg/m3.实验中各组染毒剂量根据甲醛急性吸入LC50来确定，结合预实验结果及国内外相关文献设计。各组均从孕第7天开始每日上午9∶00放入自制静式染毒柜（20cm30cm50cm,内置风扇、雾化吸入器）进行吸入甲醛染毒，每日2h,连续染毒12d.染毒前对染毒柜雾化吸入器的通气性及风扇的转动性等进行检查。染毒时调节风扇转动，时间定为30min,使用透明胶带密封染毒柜边缘，使实验过程中染毒柜内气体不易流出柜外，并且可充分混匀空气。甲醛浓

4、度采用常规甲醛测量仪测定。　　　　1.2实验试剂①甲醛（分析纯，纯度37%~40%）:沈阳华东试剂；②无水乙醇（分析纯）:天津市科密欧化学试剂有限公司；③二甲苯（分析纯）:天津市科密欧化学试剂有限公司；④AST试剂：罗氏诊断产品有限公司。　　　　1.3实验方法待孕鼠自然分娩，各组随机选出新生仔鼠各5只，用注射器取小鼠眼球血约3ml,离心机充分离心后取血清，放入罗氏modularPPI全自动生化分析仪测定血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）水平。打开仔鼠胸腔，取出心脏，每组各取1个，戊二醛固定后进行电镜检查。另取一部分甲醛固定，备做HE染色。各组剩余心脏用放大镜

5、观察仔鼠心脏畸形发生情况。　　　　1.4统计学分析所有数据均采用SPSS17.0统计软件进行录入和统计学处理，计量资料采用（x±s）表示，比较采用两样本t检验。P<0.05为差异有统计学意义。　　　　2结果　　　　2.14组仔鼠平均出生体重比较4组孕鼠共产仔鼠194只，其中第4组有2只死胎。第4组仔鼠平均出生体重分别与第1、2、3组两两比较，差异均有统计学意义（t=2.030,P<0.05;t=2.032,P<0.05;t=2.035,P<0.05）。见表1.　　　　　　　　2.24组仔鼠毒性反应4组仔鼠均未见明显外观畸

6、形，第4组有2例死胎，由于死胎发生率低，未进行统计学分析。心脏畸形有4只，均在第4组，主要心脏畸形表现为室间隔缺损（VSD）。　　　　第1、2、3组致畸率均为0.00%,第4组致畸率为11.76%.　　　　2.34组仔鼠血清AST水平比较第1、2、3、4组仔鼠血清AST水平分别为（162.06±19.10）U/L、（169.80±28.30）U/L、（207.26±30.00）U/L、（318.66±28.40）U/L.第4组和第1、2、3组仔鼠血清AST水平分别两两比较，差异均有统计学意义（t=1.9

7、87,P<0.05;t=1.990,P<0.05;t=1.994,P<0.05）。第3组和第1、2组仔鼠血清AST水平分别两两比较，差异均有统计学意义（t=2.060,P<0.05;t=3.182,P<0.05）。　　2.44组仔鼠心脏组织超微结构变化第1组仔鼠电镜下心脏超微结构基本正常，心肌肌原纤维排列整齐，肌丝清晰；线粒体结构完整，无肿胀，无空泡样变性；细胞核和核仁显示良好，呈黑色。第4组仔鼠电镜下可见：心肌组织肌原纤维排列紊乱；线粒体肿大，大小不等，嵴断裂、溶解，有较多空泡形成；线粒体间糖原颗粒少。第2组及第3组仔鼠电镜下

8、可见：心肌组织形态基本正常，线粒体结构基本完整。第1